南農(nóng)生物分離工程生物分離1細(xì)胞破碎(編輯修改稿)
2025-02-09 12:34 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 研缽 機(jī)械法 優(yōu)點(diǎn) A、 在大規(guī)模 cell破碎中 ， 高壓勻漿機(jī)和珠磨機(jī)用得最多 。 B、 高壓勻漿機(jī)最適合于酵母和細(xì)菌 。 C、 珠磨機(jī)可用于酵母和細(xì)菌 ， 但對(duì)真菌菌絲和藻類更合適 . 二、非機(jī)械法 方法 技術(shù) 原理 效果 成本 舉例 化學(xué)法 滲透沖擊 滲透壓破壞細(xì)胞 溫和 便宜 血紅細(xì)胞的破壞 酶消化法 細(xì)胞壁被消化，使細(xì)胞破碎 溫和 昂貴 增溶法 表面活性劑溶解細(xì)胞壁 溫和 適中 膽鹽作用于大腸桿菌 脂溶法 有機(jī)溶劑溶解細(xì)胞壁并使之失穩(wěn) 適中 便宜 甲苯破碎酵母細(xì)胞 堿處理法 堿的皂化作用使細(xì)胞壁融解 劇烈 便宜 化學(xué)法 Osmotic Shock(滲透沖擊法 ) 最簡(jiǎn)單的是滲透沖擊法。 此法將一定體積的細(xì)胞液加到 2倍體積的水中，細(xì)胞中溶質(zhì)濃度高，水不斷進(jìn)入細(xì)胞，使細(xì)胞膨脹，最后導(dǎo)致破裂，釋放胞內(nèi)物。 ? 細(xì)胞破碎的難易決定于其類型，紅血球細(xì)胞容易溶破，動(dòng)物細(xì)胞只有當(dāng)其組織被機(jī)械切碎或勻漿后才易溶破。植物細(xì)胞很難溶破，因?yàn)橹参锛?xì)胞中含有大量的木質(zhì)成分，通過滲透流很難滲透。 滲透流的動(dòng)力來自滲透壓，滲透壓可以通過化學(xué)平衡來估算： P=RTC 該式稱為范特苛夫定律。 ? 許多細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)濃度大約為 NaCl 或 。 ? 例： 一種耐鹽細(xì)胞其能積累細(xì)胞內(nèi)低分子量鹵化物，適應(yīng)高滲透壓，能在含有, , , 中培養(yǎng)，當(dāng)其從含鹽量高的培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)移至清水中，在數(shù)分鐘內(nèi)能將胞內(nèi)產(chǎn)物釋放出來，試估計(jì)細(xì)胞膜所受滲透壓的大小。（設(shè)操作溫度為 25℃ ） 解：細(xì)胞所受滲透壓按照下式計(jì)算： ? P＝ RTC ? ＝ 298 ( 2＋ 3＋ 3＋ 4) 103 ? ＝ 106 Pa ? 酶解法 陽性菌： 溶菌酶 ，分解糖苷鍵，低滲溶液破裂 陰性
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