分子生物學(xué)許曉東(2)(編輯修改稿)
2025-02-09 07:34 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 腺病毒通過(guò)蛋白引發(fā)的 DNA復(fù)制 Schematic representation of the chromosome end decorated with members of the shelterin plex. (A) Linear (top) and folded Tloop (bottom) structural states of the telomere are depicted. Note that in the `open39。 linear conformation, POT1 alone might be sufficient to confer 3′ overhang protection. (B) An antiparallel intramolecular Gquadruplex either alone (top) or in the context of a Tloop (bottom) might perform a capping role to protect the chromosome terminus from degradation by nucleases or extension by telomerase or ALT. JCS November 15, 2022 vol. 122 no. 22 40134025 2 環(huán)狀 DNA雙鏈的復(fù)制 θ 型 （如大腸桿菌 E. coli） 滾環(huán)型（ rolling circle） （如 ФX174） D環(huán)形（ Dloop） （如哺乳動(dòng)物線粒體 DNA） 原核生物和真核生物 DNA復(fù)制的特點(diǎn) 原核生物 DNA復(fù)制的特點(diǎn) 1 DNA復(fù)制的引發(fā) oriC (84min) （ dnaA結(jié)合位點(diǎn)） dnaA與 OriC的結(jié)合啟動(dòng)了 DNA的復(fù)制 不同原核生物的復(fù)制起始位點(diǎn) HU+ATP RNA引物：所有的 DNA聚合酶都從 3‘ 羥基端開(kāi)始 DNA合成。 DNA復(fù)制首先需要由引發(fā)酶在 DNA模板上合成一段 RNA鏈，提供引發(fā)末端。長(zhǎng)度 11177。 1。 引發(fā)體 primosome 引發(fā)前體 preprimosome 引發(fā)酶 Primase (DnaG) DnaB helicase DnaC helicase assistant DnaT PriA PriB PriC 2 DNA雙螺旋的解旋 ① DNA解鏈酶 (DNA helicase) 需要水解 ATP獲得能量。 大部分沿模板的 5’ 3‘ 方向移動(dòng)，少數(shù)沿 3’ 5‘ 方向移動(dòng) (Rep蛋白 )。 ② 單鏈結(jié)合蛋白 (singlestrand binding protein, SSB蛋白 ) 防止單鏈 DNA退火。 原核生物 SSB蛋白有協(xié)同效應(yīng)。 ③ DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 (DNA topoisomerase) 第一型拓樸異構(gòu)酶（ Type I topoisomerase）：切斷一股 DNA，屬于這類(lèi)型的有拓樸異構(gòu)酶 I與拓樸異構(gòu)酶 III等。 第二型拓樸異構(gòu)酶（ Type II topoisomerase）：切斷雙股 DNA，屬于這類(lèi)型的有拓?fù)洚悩?gòu)酶 IIα與拓?fù)洚悩?gòu)酶 IIβ等。 3 岡崎片段與半不連續(xù)復(fù)制 岡崎片段 (Okazaki fragment)一般長(zhǎng)約 10002022個(gè)堿基，原核比真核長(zhǎng)。 前導(dǎo)鏈 Leading strand 后隨鏈 Lagging strand 然后， RNaseH降解 RNA引物， DNA聚合酶 I補(bǔ)齊缺口，再由 DNA連接酶連接兩個(gè)岡崎片段。 4 復(fù)制的終止 Tus與約 22bp的終止序列 Ter結(jié)合，使 dnaB不再解鏈。 當(dāng)復(fù)制叉前移，遇到重復(fù)性終止子序列（ Ter）時(shí)， TerTus復(fù)合物能阻擋復(fù)制叉的繼續(xù)前移，等到相反方向的復(fù)制叉到達(dá)后在 DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 IV的作用下使復(fù)制叉解體，釋放子鏈 DNA PNAS September 2, 2022 vol. 105 no. 351283112836 5 DNA聚合酶 細(xì)菌中，已有五種 DNA聚合酶被發(fā)現(xiàn)。 * DNA聚合酶 I（ Pol I）： C端 (Klenow 片段 )具有聚合酶活性和 3‘ 5’外切酶活性； N端具有 5‘ 3’ 外切酶活性；能去除岡崎片段 5‘ 端得 RNA引物；有內(nèi)切酶活性。 * DNA聚合酶 II（ Pol II）：活性低，在 DNA損傷修復(fù)中起作用。 * DNA聚合酶 III（ Pol III）：活性強(qiáng)，具有聚合酶活性和 3‘ 5’ 外切酶活性，
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