分子生物學(xué)之dna復(fù)制(編輯修改稿)
2025-02-09 07:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 趨于穩(wěn)定 . 并定名為 Telomer ? 1938 頂端缺失染色體易于融合，而正常染色體不易連接。 推測染色體末端具有特殊端粒結(jié)構(gòu)。 1970s 分子生物學(xué)發(fā)展 端粒研究獲得突破 ● 端粒 DNA TTGGGG(T2G4)序列高度重復(fù)的末端 5’ TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG 3’ (rich G chain) 3’ AACCCC AACCCC AACCCC 5’ (rich C chain) ● 1985. 四膜蟲 端粒酶（ ） 將 T2G4 末端重復(fù)延伸 = RNA ( CAACCCCAA ) 鏈 + 端粒結(jié)合蛋白 ●Telomerase 是 反轉(zhuǎn)錄酶 RNA 與 3’ end of DNA 互補(bǔ) , 作為合成 cDNA的模板 T2G4的延伸 以端粒 3’end 作引物 G鏈 –T2G4TTGGGGTTGGGG C鏈 A2C4 telomerase 3’ AACCCCAAC 5’ TTG G鏈 –T2G4TTGGGGTTGGGG C鏈 A2C4 TTG telomerase 3’ AACCCCAAC 5’ GGGTTG G鏈 –T2G4TTGGGGTTGGGG C鏈 A2C4 TTG GGGTTG GGGTTG telomerase 3’ AACCCCAAC 5’ telomerase 3’ AACCCCAAC 5’ When Grich strand is longer enough telomerase 3’ AACCCCAAC 5’ G G hoogsteen bond 四股螺旋 G鏈 –T2G4TTGGGG TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG C鏈 A2C4 G鏈 –T2G4TTGGGG t t g g g g t t g C鏈 A2C4 AACCCCAA g g g g t t g g g Primase AACCCC AACCCCAACCCCAACCCCAACCCDNA pol or 多細(xì)胞組織的體細(xì)胞中，端粒酶的活性受到抑制，造成每一代細(xì)胞分裂后染色體末端縮短。這種縮短如果到達(dá)信息（ ） 細(xì)胞將逐漸衰老和死亡。細(xì)胞分裂 端粒閾值 細(xì)胞停止分裂或死亡 When telomerase activity is repressed 人體發(fā)育完成，端粒酶被抑制， 細(xì)胞分裂次數(shù)與端粒長短呈反比 細(xì)胞分裂 端粒閾值 端粒長短 端粒酶活性 Harley (1989) 端粒的重復(fù)片段為探針檢測 胎兒細(xì)胞株 嬰兒細(xì)胞株 青年細(xì)胞株 老年細(xì)胞株 年齡 小 大 端粒長度 長 短 早衰性侏儒癥的端粒明顯較正常人短 機(jī)制、癌細(xì)胞的無限繁殖 癌細(xì)胞中的端粒酶被激活 The termination of DNA replication (單起點(diǎn)雙方向 ) 兩復(fù)制叉的相遇處具有多個(gè)終止位點(diǎn) (不是復(fù)制叉簡單相遇） terE, D, A terF, B, C(22bp保守區(qū) ) F B Terminus Utilization Substance（ TUS 36kd） C A D E TerTUS復(fù)合體 terE, D, A 僅對(duì)逆時(shí)針方向的復(fù)制叉具有終止效應(yīng) terF, B, C 僅 對(duì) 順時(shí)針 方向的復(fù)制叉具有終止效應(yīng) F B C A D E TerTUS復(fù)合體 (Rep. fork trap) 終止 DnaB(螺旋酶 ) 防止 DNA過度復(fù)制 避免出現(xiàn) DNA多聚體，高拷貝 環(huán)狀 DNA分子復(fù)制完成后，兩個(gè)環(huán)狀染色體互相纏 繞，成為 連鎖體 。需要拓?fù)洚悩?gòu)酶使 DNA兩條鏈斷 開和再連接。 . DNA的復(fù)制基因 與酶類體系 a) 原核生物的酶類 與起始有關(guān)的蛋白因子 Dna B 解開ＤＮＡ雙鏈 300kd hexamer RNApol RNA primer for leading strand Dna C 與 DnaB相互作用 25kd Dna G RNA primer for lagging Strand 60kd SSB 結(jié)合單鏈 DNA 74kd Elongation genes與酶 dnaE DNA polymerase III(α) 140kd dnaZ DNA polymerase III(β) 52kd polA DNA polymerase I 109kd polB DNA polymerase II 90120kd
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