熒光定量pcr技術(shù)在臨床檢測(cè)中的應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-02-04 06:52 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 . 合成尿素酶，分解尿素 2. 在非淋球菌性尿道炎其感染率僅次于衣原 體感染，居第二位。 3. 流產(chǎn)超過(guò) 4次以上者，檢出率高達(dá) 80%。 4. 有 3040%男性尿道炎是由感染 UU所致。 5. 與男性不育相關(guān)。男性不育患者精液中，脲原體檢出率高達(dá) ％。檢出率隨精子數(shù)減少和精子活動(dòng)力下降而升高。 1. 非培養(yǎng)或形態(tài)學(xué)檢查的診斷技術(shù)，快速、特異、敏感。 2. 對(duì)無(wú)癥狀或癥狀輕者，可以早期確診。 3. 對(duì) NGH、 CT、 UU 等混合感染者，診斷和鑒別診斷。 4. 指導(dǎo)用藥、考核療效。 熒光定量 PCR診斷 NGH/CT/UU的意義 NGH/CT/UU NGH/CT/UU 熒光定量 PCR診斷 NGH/CT/UU的意義 5. 不孕不育、優(yōu)生優(yōu)育。 6. 流行病學(xué)調(diào)查，為性傳播疾病的監(jiān)控提供依據(jù)。 7. CT、 UU是 FDA批準(zhǔn)的 PCR檢測(cè)試劑盒，可作為首選 方法，在臨床推廣應(yīng)用。 人乳頭瘤病毒感染與致病 1. HPV具有宿主和組織特異性，只能感染人的皮膚和黏膜上皮細(xì)胞，人是 HPV的惟一宿主。 2. 有 100多個(gè)型。 3. 低危型： HPV 11引起良性病變 (尖銳濕疣 、喉乳頭瘤等 ) HPV 人乳頭瘤病毒感染與致病 HPV 4. 高危型： HPV 1 18引起惡性腫瘤 (宮頸癌 、 肛門癌、口腔癌等 ) 5. 免疫原性低，易形成持續(xù)性感染。 6. 新生兒產(chǎn)道感染。 HPV 1. 對(duì)典型病例可以明確診斷。 2. 對(duì)臨床表現(xiàn)和組織病理改變都不典型的病例同樣可以做出診斷。 3. 對(duì)亞臨床和隱性 HPV感染做出診斷。 4. 基因分型。 5. 考核療效與預(yù)后。 6. 病毒載量與患癌癥風(fēng)險(xiǎn) 。 HPV 熒光定量 PCR檢測(cè) HPV的意義 HPV 手足口?。?handfootmouth disease， HFMD） 為全球性傳染病，世界大部分地區(qū)均有流行的報(bào)道。 ? 1957年在加拿大首次報(bào)告，新西蘭 Seddon于 1957年最早加以描述， 1958年加拿大 Robinson從患者糞便和咽拭中分離出 CoxA16，同時(shí)患者血清抗體有四倍增長(zhǎng) ,初步查明CoxA16為本病病原； ? 1959年提出 HFMD命名， HFMD在全球廣泛流行，無(wú)明顯的地域分布。 ? 之后世界各地均經(jīng)常發(fā)生由各型柯薩奇、?？刹《竞?EV 71引起的手足口病流行。 ?發(fā)熱 , 不適 , 咽喉腫痛 , 口腔、手、腳側(cè)面及掌心、屁股出現(xiàn)小泡 傳染性極高 病程約 1周 HFMD的 病原 ? 手足口病可由多種腸道病毒所引起，其中包括 CoxA5,A10, A16, A19, EV71,以及部分埃可病毒和柯薩 奇 B組病毒 , 以 CoxA16 和 EV71最為常見(jiàn) ? 傳播途徑 : 糞 口途徑傳播 : 唾液與糞便 。 呼吸道傳播 : 空氣飛沫 。 接觸傳播 ? 皰疹液中含大量病毒，皰疹破潰后病毒排出。 ? HFMD為全球性傳染病，在全球廣泛分布，無(wú)明顯的地域分布 , 但 近年 EV71在東南亞一帶流行 , 引起較多的重癥和死亡病例。 ? 在 80年代和 90年代，中國(guó)手足口病的流行主要以 CoxA16為主， 2022年， CoxA16 和 EV71 共循環(huán)引起手 足口病爆發(fā) , EV71在大部分省市為優(yōu)勢(shì)病毒。 人腸道病毒感染的一般致病機(jī)制 進(jìn)入途徑 口腔 /呼吸道 咽喉及下腸胃道 傳播 扁桃體 、 深層淋巴結(jié) 、 腸道淋巴結(jié) 微病毒血癥 先天性感染 神經(jīng)系統(tǒng) 心 臟 肝臟 、 胰臟、 腎上腺 呼吸系統(tǒng) 皮膚及黏膜 病毒血癥 神經(jīng)系統(tǒng) 抗體產(chǎn)生 、 病毒血癥消失 ， 病毒感染癥狀改善 飛沫、接觸、飲食 肌肉 致病特點(diǎn) ① 隱性感染多見(jiàn)，很少引起腹瀉，嬰幼兒、免疫力低下的成人易感。 ② 病毒在機(jī)體腸道中增殖 ， 很少引起腸道癥狀，是以消化道為原發(fā)灶的全身感染。 ③ 不同人腸道病毒可引起相同癥狀，同一種人腸道病毒可引起不同臨床表現(xiàn)。 ④ 感染過(guò)程中形成病毒血癥。 中國(guó) HFMD的流行 1981年，我國(guó)在上海首次報(bào)道了 HFMD病例 1987年在中國(guó)分離到 CVA16 1995年以來(lái)，我國(guó)陸續(xù)在武漢、深圳、上海、重慶、山東和安徽等地的 HFMD患者中分離到 EV71病毒。 2022年，山東 發(fā)生了手足口病爆發(fā)流行 ，累計(jì) 報(bào)告 HFMD病例 39， 606例，其中 14例病例死亡。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)發(fā)現(xiàn)EV71是引起山東臨沂 HFMD的主要病原，同時(shí)還檢測(cè)到Echo3 和 /或 CVA16。 2022年全國(guó)出現(xiàn) HFMD爆發(fā)流行 ,以 HEV71為優(yōu)勢(shì) ,CVA16還有其它 EV共循環(huán)引起 加強(qiáng) HFMD病原檢測(cè)和監(jiān)測(cè)的十分必要 依據(jù)臺(tái)灣 19982022和中國(guó)大陸 20222022年的經(jīng)驗(yàn) 掌握手足口病病原譜，特別是 EV71感染所占的比例，對(duì)析 判斷 HFMD疫情導(dǎo)致重癥和死亡的比例有重要的科學(xué)參考價(jià)值。 手足口病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) ? 手足口病的診斷一般是通過(guò)采集適當(dāng)?shù)呐R床標(biāo)本后進(jìn)行基因檢測(cè)、抗原檢測(cè)、血清學(xué)抗體檢測(cè)、病毒分離和病毒鑒定，如果沒(méi)有采到合格的臨床標(biāo)本，或無(wú)法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。 ? 很多血清型的腸道病毒能引起手足口病，不同細(xì)胞系對(duì)不同病毒的敏感性是有所不同的，而不同時(shí)期腸道病毒的流行株也不同。 ? 通常用于腸道病毒分離的細(xì)胞系為 RD、 HEp Vero等，聯(lián)合使用上述的兩種或更多細(xì)胞有助于分離到更多的腸道病毒。 病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)類型 病毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法 檢測(cè)抗體/抗原 檢測(cè)病毒 檢測(cè)核酸 ELISA/HI/PA 蛋白印跡 病毒分離 ELISA 電鏡 中和試驗(yàn) RTPCR 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 套式 PCR LAMP 免疫熒光 基因芯片 每種方法 各有優(yōu)勢(shì) , 依據(jù)病毒 來(lái)定檢測(cè)策略 New molecular tools for epidemiology studies and diagnosis 三 結(jié)核桿菌與呼吸道病原體檢測(cè) ? TB： Tubercle bacilli ? CP： Chlamydia pneumonia ? MP： Mycoplasmal pneumonia ? SARS： severe acute respiratory syndrome ? H1N1甲型流感 ? 呼吸道合胞病毒 結(jié)核桿菌流行現(xiàn)狀（ 1） ?羅伯特 科赫（１
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