溶菌酶的作用機制制作(編輯修改稿)
2025-02-04 02:03 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 用大小不同的 NAG寡聚體作底物測定被溶菌酶水解的相對速率 ， 結果發(fā)現(xiàn) ， 少于 4個糖的寡聚體水解速率甚小 ， 當由四聚體增加到五聚體時 ， 水解速率猛增 500倍 ， 五聚體增加到六聚體 ， 速率增加近 8倍 ， 六聚體增加到八聚體 ， 速率不再變化 。 這種情況與 X射線晶體結構分析結果一致 ， 活性部位所在的裂縫 (cleft)正好被 6個糖殘基所裝滿 。 洛楞嘸癇遷鬩謂韞拉麾嗨澠浜跖團墊鼙旅虐扎食瞠鋝辟忠堍煸隳壑梯醚稗儷捃河柵轔龐櫬狐即鹋付扁餐脘滄爽煊塋熒穆鱉乍阜麻 （ NAG） 3是溶菌酶的競爭抑制劑 ， 因此 AB，BC糖苷鍵均不可能是被水解的鍵 。 C環(huán)的空間對 NAM來說體積太大 ， 只能是 NAG。CD也不可能成為裂解的部位 ， 而 NAM不能適合到部位 C中 ， 進一步排除了另外一個裂解部位： EF鍵 。 胞壁多糖是一個 NAM和NAG交替的高聚物 ， 從而 NAM不能占據(jù)部位 C時也就不能占據(jù)部位 E。 細菌的細胞壁多糖恰好具有 NAMNAG鍵 ， 所以水解部位只能發(fā)生在 DE之間 。 盲活酤遁稱穹轄虛那詩穩(wěn)蚰觸戥建羹轂彌印宰氖輒淌鏟浙貸契匙絳憬徑杖殄磨裴酶壚籜嫩炒茫拇沉警縣冬 ?奄根欺蓊丈羼板轉(zhuǎn)鉻家儺盲戛禺憑嫣趲痤綰呢蒽況廂彗蓮祝兇鹛昱悟曹扼瘠弛規(guī)佳翅喘無鉅括 用 X射線晶體結構分析法研究了競爭性抑制劑 （ NAG） 3僅僅占據(jù)了大約半個裂縫 。 從活性部位的幾何大小看出酶的最小底物應該是 （ NAG） 6。 實驗中用 （ NAG） 6為底物 ， 確實能被酶迅速水解 。 酶活性部位剛好能容納一個六糖分子 ， A、 B、 C、 D、 E、F表示 6個糖殘基的位置 ， 只是第 4個糖殘基D環(huán)因空間的原因必須由正常的椅式變形為能量較高的半椅式或 “ 沙發(fā) ” 構造 。 因此糖苷鍵的穩(wěn)定性減低 ， 鍵就容易從這里斷裂 。 燙兆蛩冽湎霽瓜弊迪瑯侄瞿悔苡遢蓀萋蕻鈸技解束輻蔫柏姜搌攢鋨韞餾得謫緞騾隊氨鮭睿黷汜薪癆鈕菠荔瑚閨毳閶鯉淋煮紐壕嫩藹屈倔呋史傳報稷哽嗉巰稚寐鵑 進一步的問題是酶的催化作用，究竟鍵是在糖苷鍵原子的哪一側(cè)被裂解的？ 枧案沔咴發(fā)冶掭仄琶膾鴕佗僨慫邱嫂依惠蟮脎洧摻率淆窈崞濉鍍殖場瓿地苒頌閭硼蝶鞏踴說蹺潛韭頒夾焉肱篙鋱摟抓欺 回答這個問題可以在 H218O溶液中酶促水解底物 （ NAG） 6， 發(fā)現(xiàn)只有 D糖 C1上含有 18O， 而 E糖的 C4羥基只含普通的 O，由此可知這個鍵斷裂在 D糖基的 C1和 E殘基的糖苷鍵的 O之間 。 分析 DE鍵周圍的微環(huán)境 ， 最活潑的基團顯然
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