谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 19:45 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 結(jié)果表明用丙酮和飽和硫酸銨沉淀的酶活收率要比乙醇沉淀酶活收率稍高一些。但是飽和硫酸銨沉淀法在酶液中引入了水溶性無(wú)機(jī)鹽， 需要進(jìn)行脫鹽等步驟，較繁瑣。有機(jī)溶劑沉淀法則不需脫鹽及多次分離等步驟，過(guò)程短，且其為揮發(fā)性液體，在干燥中可揮發(fā)成氣體而不殘留， 或僅留其痕跡。而考慮到作為食品用酶，最好不用丙酮沉淀法，所以最終采用乙醇沉淀。 第三、理化性質(zhì)的研究 粗酶的最適溫度 冷凍干燥后的粗酶制成酶液分別在 50、60 ℃ 下測(cè)定酶活，以最高點(diǎn)酶活為 100 %。 溫度對(duì)粗酶穩(wěn)定性的影響 冷凍干燥后的粗酶制成酶液， 分別在 50、 60 ℃ 的水浴中保留 10 min，用冰浴快速冷卻，然后在 37℃ 下測(cè)定酶活，以未經(jīng)處理的酶液酶活為 100%。 pH 對(duì)粗酶穩(wěn)定性的影響 分別將酶液 pH 值調(diào)節(jié)至（ 、 、 、 、 、 ）， 于 4 ℃ 放置 12 h， 取出調(diào)節(jié)各樣品的 pH 至 ， 37 ℃ 測(cè)定各樣品酶活， 以未經(jīng)處理的酶液酶活為 100 %。計(jì)算相對(duì)酶活，得出曲線。 粗酶的最適 pH 將酶液的 pH 值調(diào)節(jié)至 、 、 、 、 、 、 、 測(cè)定酶活， 以最高點(diǎn)相對(duì)酶活為100 %，作出曲線。 金屬離子對(duì)酶活的影響 在酶反應(yīng)體系中分別加入相同濃度（ 1 mg/L）的各種金屬離子（ Ca2+、 Na+、 K+、 Mg2+、 Cu2+）， 37 ℃ 保溫 10 min測(cè)定谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶粗酶酶活。以不加任何金屬離子的酶活為參照。 底物濃度對(duì)反應(yīng)速度影響 分別加入底物（ mol/L） 、 、 、 、 mL，每支試管各加入 mL 濃縮酶液， 37 ℃反應(yīng) 10 min，各管加 mol/L TrisHCl 緩沖液至 mL，分別測(cè)定酶活性，求出反應(yīng)速率，采用 LineweaverBurk 雙倒數(shù)法求
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