分子腫瘤學5細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與腫瘤(編輯修改稿)
2024-11-14 11:51 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 κB 是對 ATL和 MM等淋巴細胞惡 性腫瘤靶向治療的一個靶點。 NF –κB 是維持 LSC生存的要素 在維持 LSC生存的要素中 NF –κB 和 PI3k通路是很重要。在 AML LSC中， NF –κB 是持續(xù)激活的，抑制 NF –κB 的藥物 MG132能誘導(dǎo) LSC凋亡，卻不能影響正常 HSC，因為正常 HSC在沒有絲裂原的刺激下， NF –κB 是不激活的 （三） NF –κB 及其他轉(zhuǎn)錄因子研究常用的一項方法 EMSA 凝膠遷移或電泳遷移率實驗 (EMSA) : （ EMSAelectrophoretic mobility shift assay）是一種研究 DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的 DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù)，可用于定性和定量分析。這一技術(shù)最初用于研究 DNA結(jié)合蛋白，目前已用于研究 RNA結(jié)合蛋白和特定的 RNA序列的相互作用。 通常將純化的蛋白和細胞粗提液和 32P同位素標記的 DNA或 RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。 DNA復(fù)合物或 RNA復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同，可是雙鏈或者是單鏈。當檢測 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的 DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白，或核細胞抽提液。在檢測 RNA結(jié)合蛋白時，依據(jù)目的 RNA結(jié)合蛋白的位置，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質(zhì)細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結(jié)合序列的 DNA或 RNA片段和寡核苷酸片段（特異）， 和其它非相關(guān)的片段（非特異），來確定 DNA或 RNA結(jié)合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據(jù)復(fù)合物的特點和強度來確定特異結(jié)合。 Ets轉(zhuǎn)錄因子家族在腫瘤發(fā)生中的作用 Ets基因最早發(fā)現(xiàn)于美國 Frederick的國家癌癥研究所分子腫瘤學實驗室 .通過研究禽類逆轉(zhuǎn)錄病毒 E26，研究者發(fā)現(xiàn)了一系列擁有與E26高度保守的同源序列的基因，根據(jù) E26 (Etwenty six)的縮寫而將該基因命名為 Ets. 該基因的共同特點是含有高度保守的 DNA結(jié)合域，能夠和特定序列結(jié)合調(diào)控靶基因的表達和功能 .通過調(diào)節(jié)細胞的 增生 、 分化 、 凋亡 及 上皮 間充質(zhì)間的相互作用 ,Ets參與許多生理和病理過程 . 大量研究發(fā)現(xiàn)， Ets在哺乳動物的發(fā)育和腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移 中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。 （一） Ets轉(zhuǎn)錄因子家族 人類 Ets家族基因在進化上高度保守，其共同點是均含有一個大約 85個氨基酸的 DNA結(jié)合域，也就是位于 C端的 Ets區(qū) . 該區(qū)富含精氨酸和賴氨酸殘基，為螺旋 轉(zhuǎn)角 螺旋基序，可識別并結(jié)合富含嘌呤的 DNA核心序列A/CGGAA/T，這一序列存在于許多基因的 5’側(cè)翼調(diào)節(jié)區(qū)，有反式活化功能 .目前 Ets轉(zhuǎn)錄因子家族包括 30多個成員，根據(jù) ETS結(jié)構(gòu)域構(gòu)象和位置不同， Ets家族分為多個亞家族。 亞族 組成 Ets Ets1 Ets2 EGR Erg2 Fli1 FevELG GABPa ETS4 TEL(ETV6) PEA3 E1AF ERM ETV1 ERB1 TCFs E1k1 Sapla NET/ERP/Sap Elf Elf1 NERF1b MEF Spi SpiBERF ERF PE1ESX ESX/ESE1 （二） Ets轉(zhuǎn)錄因子家族成員在胚胎發(fā)育中的調(diào)節(jié)作用 Ets轉(zhuǎn)錄因子家族成員在造血細胞系的建立和維持、早期分化、造血干細胞和骨髓中多能祖細胞的歸巢、淋巴細胞分化中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。 （三） Ets轉(zhuǎn)錄因子家族在腫瘤發(fā)生 中的調(diào)節(jié)作用 Ets基因 在整個進化過程中是一個保守基因，其正常功能發(fā)生改變時，可導(dǎo)致分化和發(fā)育異常及腫瘤發(fā)生，在某些類型的腫瘤中，有許多與 腫瘤相關(guān)的 Ets突變 發(fā)生，一個易位染色體將 Ets基因片段與一個不相關(guān)的基因融合，導(dǎo)致了嵌合癌蛋白的表達，該類蛋白分為兩類，第一類 Ets蛋白 可使他們的癌基因效應(yīng)作為轉(zhuǎn)錄因子，來下調(diào) Ets調(diào)控的基因，這對細胞周期的調(diào)控十分重要 . 第二類 Ets嵌合腫瘤蛋白 ，通過永久的激活某些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑或抑制一個關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的活性來促進癌基因 Ets家族的重要成員 Ets1的表達與胰腺癌、甲狀腺癌、乳腺癌、胃癌、子宮內(nèi)膜癌、口腔鱗癌、肝細胞性肝癌 (HCC)的發(fā)生、轉(zhuǎn)移顯著相關(guān) . Erg基因在髓細胞白血病、 Ewing’肉瘤、兒童長骨腫瘤中發(fā)生重排 . 發(fā)生浸潤的腫瘤組織基質(zhì)細胞中存在 Ets1和MMP1（ Matrix Metalloproteinase 1）、 MPMMP7共表達，并且
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