超臨界流體色譜法簡介(編輯修改稿)
2024-11-12 23:56 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 相對(duì)分子質(zhì)量的范圍要大出好幾個(gè)數(shù)量級(jí) ， 基本與LC法相當(dāng) 。 當(dāng)然 ， 尺寸排阻色譜法 （ SEC）所測(cè)分子質(zhì)量范圍是所有色譜法中最大的 。 超臨界流體色譜法被廣泛應(yīng)用于天然物 、 藥物 、 表面活性劑 、 高聚物 、 多聚物 、 農(nóng)藥 、炸藥和火箭推進(jìn)劑等物質(zhì)的分離和分析 。 206 毛細(xì)管電泳 capillary electrophoresis 201概述 早在一百多年以前 ， 較原始的電泳實(shí)驗(yàn) ， 是在一個(gè) U形一管中進(jìn)行的 ， 管中盛有溶液 ， 兩端置有電極 ， 加上幾百伏電壓后 ， 首次實(shí)驗(yàn)了對(duì)毒素和抗毒素的分離 。 1909年 ， “ 電泳 ” 這一術(shù)語 ， 他的實(shí)驗(yàn)是用于測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn) 。 此后 ， 許多的研究報(bào)告涉及氨基酸 、肽類 、 蛋白質(zhì)的分離 。 為了防止電泳完成了的溶液中 ， 再次發(fā)生對(duì)流混合 ， 曾使用了各種穩(wěn)定介質(zhì) ， 如瓊脂 、 纖維粉 、 玻璃絲 、 硅膠及丙烯酸胺；為了防止熱擴(kuò)散而使用了一種內(nèi)徑小的管道 ， 管道內(nèi)徑由 3mm縮小至 75μ m。 1981年 ，Jenson． 和 Lukacs 使用 75μ m內(nèi)徑的熔融石英毛細(xì)管 ，電泳分離氨基酸和肽 。 至此 ， 出 現(xiàn) 了 毛 細(xì) 管 電 泳（ capillary electrophoresis， CE） 技術(shù) 。 毛細(xì)管電泳，又稱高效毛細(xì)管電泳（ High Performance capillary electrophoresis， HPCE），它不同于經(jīng)典的區(qū)帶電泳，有如下特點(diǎn)： （ 1） 它是在內(nèi)徑 （ 1O～ 200） μm的石英毛細(xì)管中進(jìn)行的 ，在毛細(xì)管中的散熱較好 ， 沿著管截面的溫度梯度很小 ， 因此 ， 可以提高加在毛細(xì)管兩端的電壓 ， 所加電壓可高達(dá)幾十千伏 。 （ 2） 它不需要阻流介質(zhì) ，、 但可使用凝膠作分子篩介質(zhì) 。 （ 3） 可使用在柱檢測(cè)法 ， 縮短分析時(shí)間 ， 結(jié)合計(jì)算機(jī)處理數(shù)據(jù) ， 可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作 。 （ 4） 靈敏度高 ， 檢測(cè)眼可達(dá) （ 1013～ 1O15） mol， 使用激光誘導(dǎo)的熒光檢測(cè)限可達(dá) （ 1O19～ 1O21） mol。 （ 5） 分辨率高 ， 理論塔板數(shù)為幾十萬至幾百萬／米 。 （ 6）取樣量少，有時(shí)只需幾個(gè)納升（ nL， 109L），流動(dòng)相只需幾毫升。 201 高效毛細(xì)管由泳的基本原理 含離子的溶液 ， 在電場(chǎng)中所發(fā)生的物理過程服從歐姆定律 ， 當(dāng)有直流電通過溶液時(shí) ， 陰離子向陽極遷極 ， 陽離子向陰極遷移 ， 溶液的導(dǎo)電率取決于離于濃度和其遷移率 (又稱淌度 ， 即指溶質(zhì)在單位時(shí)間和單位電場(chǎng)強(qiáng)度下移動(dòng)的距離 )。 離子遷移率以 μ表示 ， 其大小受溶質(zhì)的電荷／離子大小比例所控制 。 在
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