【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ** P 從表 33 中可見：與模型組比較，用優(yōu)降糖處理糖尿病小鼠在試驗(yàn) 17d 能夠極顯著地降低小鼠的血糖濃度；從試驗(yàn) 17d 血糖值的測(cè)定，麥冬多糖 200mg/㎏ 對(duì)小鼠血糖濃度 也有顯著地降低；用麥冬多糖 400mg/kg 處理的糖尿病小鼠在試驗(yàn) 17d 也能夠極顯著地降低小鼠的血糖濃度； 綜上所述：麥冬多糖及優(yōu)降糖在試驗(yàn) 17d對(duì)糖尿病小鼠血糖濃度有顯著地降低作用。 川麥冬多糖對(duì)糖尿病小鼠體重的影響比較 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，除去實(shí)驗(yàn)中途死亡的小鼠， 將所測(cè)的小鼠體重?cái)?shù)據(jù)通過(guò)整理后， 統(tǒng)計(jì)如下表 34。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 10 與模型組比較，從表 34 中可見：在造模后 3d～ 17d 期間，模型組 體重增長(zhǎng)為%，優(yōu)降糖組體重增長(zhǎng)為 %，麥冬 200 組體重增長(zhǎng)為 %，麥冬 400 組體重增長(zhǎng)為 %。 在各個(gè)階段各組別體重變化：優(yōu)降糖處理高血糖小鼠在試驗(yàn) 7～ 17d 期間小鼠體重變化不明顯；在造模后 3d～ 7d、 7～ 11d 內(nèi)，能顯著地增加小鼠的體重， 11d～ 17d期間小鼠體重的變化，麥冬多糖 200mg/㎏ 能明顯地抑制小鼠體重的降低；從造模處理后 3～ 7d 、 7d～ 11d，麥冬 400mg/㎏ 對(duì)小鼠體重的影響能夠明顯地增加，但 11d～17d，此段時(shí)間內(nèi)對(duì)小鼠體重增加有一定的減緩趨勢(shì)；在造模 0～ 3d，各組別小鼠體重都有一定下降。 綜合上述，在試驗(yàn) 3d～ 17d，麥冬多糖能夠明顯的減緩對(duì)小鼠體重的降低。優(yōu)降糖 有降低小鼠體重的減少的趨勢(shì)。 繪制折線圖，通過(guò)對(duì)各組別小鼠從建模 0d、 3d、 7d、 11d、 17d多次稱量小鼠，然后求平均值， 以小鼠造模的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程為為橫坐標(biāo) ,小鼠的平均值體重為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見表 34 表 0～ 17d各組別 小鼠體重變化的折線圖 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 11 從表 34可見，在造模 0～ 3d，各組別小鼠體重均有所下降；在造模 3d～ 試驗(yàn) 7d，各組別小鼠體重又有所增加；在試驗(yàn) 7～ 11d灌胃麥冬多糖組的小鼠體重繼續(xù)增加，而優(yōu)降糖組與模型組小鼠體重下降；到了試驗(yàn) 11～ 17d, 各組別小鼠體 重又有所降低。 討論 糖尿病模型的建立 由于四氧嘧啶誘導(dǎo)的大鼠糖尿病模型與人類 Ⅰ 型即胰島素依賴性糖尿病類似，故四氧嘧啶是制備大鼠糖尿病模型的常用藥物 。其作用機(jī)制是 通過(guò)產(chǎn)生超氧自由基選擇性地破壞胰島 B 細(xì)胞 ,使細(xì)胞內(nèi) DNA 損傷 ,同時(shí)激活多聚 ADP 核糖體合成酶的活性 ,從而使輔酶 Ⅰ 含量下降 ,兩者共同作用 導(dǎo)致 mRNA 功能受損 ,引起細(xì)胞死亡，導(dǎo)致血中胰島素濃度下降及高血糖產(chǎn)生，形成胰島素依賴性糖尿病 [12]。 隨著臨床上 Ⅰ 型糖尿病發(fā)病率的逐年增加 ,研究 Ⅰ 型糖尿病的治療和研究 Ⅰ 型糖尿病動(dòng)物模型制備 也隨之增多。 Ⅰ 型糖尿病小鼠模型中 , 四氧嘧啶制備大鼠糖尿病模型在試驗(yàn)中最常用，最經(jīng)濟(jì)。因此，研究建立較為規(guī)范的四氧嘧啶制備糖尿病大鼠模型具有普遍的意義。本實(shí)驗(yàn)僅對(duì)不同注射方式和劑量四氧嘧啶對(duì)小鼠糖尿病制備的影響加以研究。結(jié)果表明，分次劑量注射四氧嘧啶比一次劑量注射在造模成功率上更高，而在降低死亡率上僅有一種趨勢(shì)。另外，在成功率、死亡率上，雌鼠都高于雄鼠，這可能是不同性別的小鼠對(duì)四氧嘧啶的耐受力有關(guān)。此次實(shí)驗(yàn)所做的對(duì)比分析還算太少，所得到的數(shù)據(jù)太有限，分次劑量注射在使用四氧嘧啶制備小鼠糖尿病模型上，還需期待更 進(jìn)一步的研究。 川麥冬多糖對(duì) 四氧嘧啶所致 小鼠糖尿病血糖的影響 麥冬多糖是麥冬塊莖的主要提取物 , 具有麥冬的藥性 ,有很高的醫(yī)用價(jià)值。 通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)證明，川麥冬多糖與陽(yáng)性藥優(yōu)降糖一樣與模型組比較差異均具有顯著性，說(shuō)明川麥冬多糖對(duì)四 氧嘧啶致糖 糖尿病小鼠具有顯著降血糖作用，而且也證實(shí)麥冬多糖是麥冬中降血糖的主要成分之一。 近年來(lái)，關(guān)于麥冬多糖對(duì)糖尿病的相關(guān)研究有很多，王智杰研究的結(jié)果為麥冬多糖（ 150、 300 mg /kg）能在給藥后 12 及 24h 明顯抑制四氧嘧啶所致小鼠血糖升高 [13]， 而且何陵湘也做過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)分析得出， NOD 小鼠口服麥冬多糖 ( 7150、 300 mg /kg ), 12d 能降低血糖及升高血清胰島素 [7]；吳忠忱也通過(guò)研究的表明，西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 12 麥冬多糖 l00 ~ 200 m g /kg 有明顯降糖作用 [14]； 陳衛(wèi)輝 在 麥冬多糖對(duì)正常和實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠血糖的影響 的所有中得出結(jié)論，即 劑量為 100 和 300mg/kg 的麥冬多糖灌胃對(duì)葡萄糖、四氧嘧啶及 腎上腺索引起的小鼠高血糖均有抑制作用 ,對(duì)正常小鼠的血糖亦有降低作用 [15]。 這一系列的研究都表明，麥冬多糖能夠降低血糖，這些結(jié)論與本實(shí)驗(yàn)所得 出的結(jié)論一致。但是筆者在做這實(shí)驗(yàn)時(shí)，方法有與他們又有很大差異，如在選材上，筆者所用的是川麥冬；在實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)上，筆者又選取的是不同劑量上麥冬多糖（ 200、 400 mg /kg )對(duì)糖尿病小鼠的影響，這些都為以后麥冬多糖的臨床試驗(yàn)提供參考價(jià)值。 麥冬多糖對(duì)胰島素依賴 —— 四 氧嘧啶所致的小鼠血糖升高有明顯的抑制作用，說(shuō)明麥冬多糖具有減輕 四 氧嘧啶對(duì)胰島 B 細(xì)胞的損傷程度或?qū)@種損傷具有一定的保護(hù)和修復(fù)作用， 從而降低了血糖水平 ,并且緩解糖尿病小鼠消瘦 ,多飲多食的癥狀 , 使其逐步好轉(zhuǎn)。 從本實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)， 400mg/kg麥冬多糖組在抑制血糖濃度上比 200mg/kg麥冬多糖組要強(qiáng)，療效隨麥冬多糖含量的增加有增強(qiáng)的趨勢(shì)。推測(cè)，增加麥冬多糖的含量在降血糖方面可能療效會(huì)更好一些，尚需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證實(shí)。 本實(shí)驗(yàn)在作對(duì)比實(shí)驗(yàn)上選擇的陽(yáng)性藥優(yōu)降糖 (格列本脲 )，為臨床上治療糖尿病的常用化學(xué)藥劑 ,該藥片的主要機(jī)理是 通過(guò)增加門靜脈胰島素水平或?qū)Ω闻K直接作用，抑制肝糖原分解和 糖原異生作用 ，肝生成和輸出 葡萄糖 減少 ，進(jìn)而達(dá)到治療效果。臨床上這類藥物雖然降血糖作用好，但長(zhǎng)期應(yīng)用毒副作用較多 , 且對(duì)免疫器官無(wú)保護(hù)作用。中藥毒副作用小 ,穩(wěn)定性強(qiáng)，但起效一般較慢。從實(shí)驗(yàn)中也可以看出， 400mg/kg麥冬多糖組在造模后 3天的血糖濃度高于優(yōu)降糖組，但在造模后 14天的血糖濃度明顯低于優(yōu)降糖組，說(shuō)明在治療糖尿病上中藥應(yīng)成為首選。 本實(shí)驗(yàn)直接從川麥冬中提取出麥冬多糖，并未進(jìn)一步分離分析其化學(xué)成分 , 實(shí)驗(yàn)研究到底是多聚糖、 某一單糖或者單萜糖苷哪種多糖所起的藥理作用，其降血糖作用機(jī)制又如何等 ,也都并未進(jìn)一步去分析研究，也希望同行共同研究突破。使這麥冬多糖降血糖新中藥能更好更早造福于人類。 對(duì)麥冬多糖降血糖機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究，有助于確定中藥麥冬的有效作用部位及作用機(jī)理，并對(duì)相關(guān)的中藥開發(fā)和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。有關(guān)麥冬多糖降血糖作用機(jī)理的研究仍有待進(jìn)一步探討。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 13 糖尿病的根本是代謝異常 ,而代謝直接影響著身體的體重大小，因此 ,從某種程度上來(lái)說(shuō)，糖尿病小鼠的體重變化可 以反映病情變化的好壞。 臨床上，將 糖尿病癥狀總結(jié)為 “ 三多一少 ” ，所謂 “ 三多 ” 是指 “ 多食、多飲、多尿 ” ， “ 一少 ” 指“ 體重減少 ” 。 所謂 體重減少 ，就是由于患者 胰島素 分泌 不足，機(jī)體不能充分利用 葡萄糖 ，使脂肪和蛋白質(zhì)分解加速來(lái)補(bǔ)充能量和熱量。其結(jié)果使體內(nèi)碳水化合物、脂肪及蛋白質(zhì)被大量消耗，再加上水分的丟失，病人體重減輕、形體消瘦，嚴(yán)重者體重可下降數(shù)十斤，以致疲乏無(wú)力，精神不振。同樣，病程時(shí) 間越長(zhǎng)， 血糖 越高 。病情越重，消瘦也就越明顯 ?? 從本實(shí)驗(yàn)中 表 31 可看出 ，在造模 0～ 3d， 四氧嘧啶致使小鼠糖尿病，由于 未給小鼠灌任何藥物，再加上腹腔穿刺、斷尾測(cè)血糖的刺激，因此所有組小鼠體重下降；在 造模 3d～試驗(yàn) 7d，給各組小鼠灌喂藥物，腹腔穿刺、斷尾測(cè)血糖等刺激因素減弱，此段時(shí)間各組小鼠體重有一定的增加；在試驗(yàn) 7～ 11d，灌喂麥冬多糖的小鼠在這段時(shí)間體重繼續(xù)增加，而模型組、優(yōu) 降糖組小鼠由于未灌喂任何藥物，故小鼠體重下降；在試驗(yàn) 11～ 17d， 優(yōu)降糖組與模型組小鼠體重繼續(xù)下降； 麥冬 200mg/Kg 組、麥冬400mg/Kg 組小鼠的體重不在增長(zhǎng)，反而下降，我認(rèn)為主要原因是由于： ，未能及時(shí)補(bǔ)上，雖后期補(bǔ)上，但是將前期小鼠食用的精料改換用玉米，營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不全面 。 ，它對(duì)小鼠的體重上具有一定的減緩作用，但是否能夠持續(xù)增加小鼠體重，還需要進(jìn)一步研究；在造模 0～ 試驗(yàn) 17d，灌喂麥冬多糖的糖尿病小鼠體重整體趨勢(shì)上是增加的，但灌 喂麥冬多糖 200mg/Kg 組的小鼠體重增長(zhǎng)趨勢(shì)高于麥冬多 400mg/Kg組的小鼠 ,這說(shuō)明麥冬 200mg/Kg劑量在減緩糖尿病小鼠體重上優(yōu)于麥冬 400mg/Kg 劑量。而 灌喂優(yōu)降糖、蒸流水的小鼠體重整體趨勢(shì)上降低，但灌喂優(yōu)降糖的小鼠 體重降低趨勢(shì)低于 灌喂蒸流水的 的小鼠，這可能是優(yōu)降糖起到一定的作用。 在建立糖尿病小鼠模型 3d后，給予不同藥物灌喂小鼠，在造模 3d～ 試驗(yàn) 17d麥冬多糖能夠明顯地減緩小鼠體重的降低，優(yōu)降糖在小鼠體重降低上也有一定的減緩趨勢(shì)，而模型組明顯地反映出糖尿病消瘦的特點(diǎn)，從而得出結(jié)論，麥冬多糖在治 療糖尿病小鼠過(guò)程中，能夠有效的減緩小鼠體重的降低。 對(duì)于糖尿病的治療，體重變化只是一個(gè)方面，更重要的 血糖、血脂、血壓的控制，但體重也能夠從側(cè)面反映出在藥物在治療過(guò)程中的所起到的作用。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 14 本實(shí)驗(yàn)所探究的問(wèn)題是結(jié)合前人的探索基礎(chǔ)上對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的改進(jìn)，對(duì)臨床應(yīng)用具有一點(diǎn)的參考意義 .下面在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所遇到的問(wèn)題和心得體會(huì)與大家分享，希望能給大家進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)和研究過(guò)程中帶來(lái)一定的啟發(fā)和幫助。 ，在配制其溶液的時(shí)候，由于麥冬多糖是由 單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物， 所以 水溶性一般比單糖低，不易溶于水， 可以適當(dāng)在水浴中 加熱一下，多攪拌一會(huì)， 就可以完全溶解； ，部分小鼠血液豐富或者缺乏， 為避免 測(cè)試紙采到的血液量過(guò)多或過(guò)少， 而影響實(shí)驗(yàn)的精確性，可以在小鼠斷尾前用 50℃ 左右熱水燙一下小鼠的尾巴，燙完后及時(shí)用紗布擦干小鼠尾巴，防止水分稀釋血液，造成誤差，這種方法可以加速小鼠血液循環(huán)，以采到合適的血液； ， 抓住 小鼠，使其頭、頸和身體呈一直線。抓小鼠的動(dòng)作很簡(jiǎn)單，左手的小指和無(wú)名指抓住小鼠的尾巴，另外三個(gè)手指抓住小鼠的頸部即可。抓好小鼠就可以灌胃了，一般用 1ml的注射器配灌胃針頭。灌胃針頭從小鼠的嘴角進(jìn)入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進(jìn)，進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感，進(jìn)入食道后就可以推注藥液了 ； ，可以采用將小鼠放在燒杯中用電子天平稱量，然后瞬間讀數(shù)，多次稱量求平均值。 結(jié) 論 從本試驗(yàn)可以分析出以下結(jié)論： 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 15 a. 分二次劑量注射 四氧嘧啶比一次劑量注射造模成功率更高， 分二次劑量 注射有 降低小鼠死亡率的趨勢(shì)； b. 川麥冬多糖對(duì)四 氧嘧啶致糖 糖尿病小鼠具有顯著降血糖作用，而且也證實(shí)麥冬多糖是麥冬中降血糖的主要有效成分； ，療效隨麥冬多糖含量的增加有增強(qiáng)的趨勢(shì)； ，但起效較慢； 。 致謝 光陰似箭，歲月如梭 ， 來(lái)不及感嘆，大學(xué)生活已近尾聲，四年多的努力與付出，隨著本次論文的完成，將要?jiǎng)澫峦昝赖木涮?hào)。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 16 首先，我 要衷心感謝一直以來(lái)給予我無(wú)私幫助和關(guān)愛的老師們，謝謝你們這四年以來(lái)對(duì)我的關(guān)心和照顧，從你們身上，我學(xué)會(huì)了如何學(xué)習(xí)，如何工作，如何做人 。 特別是我的導(dǎo)師 茍興能老師 ，從課題選擇到具體的寫作過(guò)程，無(wú)不凝聚著 他 的心血和汗水。老師要指導(dǎo)很多同學(xué)的論文，加上本來(lái)就有的教學(xué)任務(wù)和科研項(xiàng)目，工作量之大可想而知， 他 還在百忙之中抽出大量的時(shí)間來(lái)指導(dǎo)我們。 他 的循循善誘的教導(dǎo)和不拘一格的思路給予我無(wú)盡的啟迪， 他 精益求精的 工作作風(fēng) ，嚴(yán)以律己、寬以待人的崇高風(fēng)范，將一直是我工作、學(xué)習(xí)中的榜樣。在我的畢業(yè)論文寫作期間，老師為我提供了種種 專業(yè)知識(shí)上的指導(dǎo)和一些富于創(chuàng)造性的建議，沒(méi)有這樣的幫助和關(guān)懷，我不會(huì)這么順利的完成畢業(yè)論文。在此向 茍興能老師 表示深深的感謝和崇高的敬意。 同時(shí)，論文的順利完成， 還要 特別感謝我 的實(shí)驗(yàn)搭檔葉明偉、譚春尾、楊志梅、周玉西、羅敏、吳慧愉，在這