大豆蛋白的提取與含量測定(編輯修改稿)
2025-06-19 23:57 本頁面
【文章內容簡介】 Folin酚法所用試劑是由兩部分組成，試劑甲相當于雙縮脲試劑，可與蛋白質中的肽鏈起顯色反應。試劑乙中的磷鉬酸和磷鎢酸在堿性條件下不穩(wěn)定，易被酚類還原而呈蘭色（鉬蘭和鎢蘭混合物）。 由于蛋白質中含有帶酚基的酪氨酸還原呈蘭色 ， 溶液蘭色的深淺與蛋白濃度成正比 。 因此用 Folin酚法測定蛋白質含量 ， 靈敏度較高 。 樣品中含酚類化合物及檸檬酸均有干擾作用 ， 如果樣品酸度較高則顯色較淺 ， 要提高碳酸鈉一氫氧化鈉的濃度 。 此法也可測定溶液中酪氨酸和色氨酸的濃度 。 Folin酚法有不少個別改進的操作方法 ， 但基本原理都是一個 ， 只是在各溶液的濃度及填加量上 、 保溫的溫度及保溫時間上有所不同而已 ， 本實驗所介紹的是本室常用的 ， 靈敏度較高的操作方法 。 試劑和器材 材料： 本實驗所提取大豆蛋白水提取液 ， 經(jīng)合適稀釋至可測定范圍 。 試劑： （ 1） 。 （ 2） 200μg/ml的標準酪 （ 牛血清 ） 蛋白溶液 。 （ 3） Folin試劑甲： （ 俗稱堿性銅試劑 ） ： 10g NaoH溶于 400ml水中 ， 再加 50gNa2CO3； 稱取 0 . 5 g酒石酸鉀鈉溶于 80mlH2O中 ， 再加； 以上兩溶液混合定容到 500ml， 冰箱保存可用一個月 。 Folin試劑乙：在 2升磨口回流裝置的燒瓶內 ， 加鎢酸鈉（ NaWO42H2O） 100g， 鉬酸鈉 （ NaMoO2M2O） 25g，蒸餾水 700ml， 85%的磷酸 50ml， 濃鹽酸 100ml， 充分混合后 ， 小火回流 10小時 ，
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