【文章內(nèi)容簡介】 年來 對 苦參堿 的研究已 得 到了突飛猛進的發(fā)展，尤其是 苦參堿 的制備技術(shù)和 藥理 性質(zhì)的研究。 國外研究概況 從苦豆子中提取分離純化苦參堿，在本世紀(jì) 30年代起國外學(xué)者 Oreknov等就已經(jīng)做了研究。他們采用分級堿化、石油醚中反復(fù)溶解、轉(zhuǎn)變?yōu)榈鈿渌猁}的方法來分離提取苦參堿。而在 1964 年，外學(xué)者 Aslunov等首次采用了氧化鋁柱層析法來提取分離苦參堿 [1]。在 1973 年， Mohaxoba 等將苦豆子提取的總生物堿按照極性的大小分成強堿和弱堿，然后用不同極性的溶 劑進行萃取，再結(jié)合柱層析法進行提取和分離 [2]。在 1974年 ， Mohaxoba 又從可溶于石油醚的非極性生物堿中 ， 利用生物堿堿性強弱的不同 ， 用 同一溶劑分段萃取，再結(jié)合氧化鋁柱層析提取分離苦參堿，在 1977年 Kyhkapob用甲醇提取總生物堿經(jīng)苯提取后柱層析，提取和分離苦參堿 [3]。 國內(nèi)研究概況 國內(nèi)對苦參堿的研究起步較晚 [19]。在 1983年寧夏人名出版社出版 的 仲仁山 著的《苦豆子的研究及其應(yīng)用》一書中記載了 1971年寧夏鹽池制藥廠趙博光等利用生物堿的極性不同，用不同極性溶劑進行萃取，分為若干 部分，再利用氧化鋁柱層析和反流分布法進行分離，從而得到苦參堿的工藝。 1980年中草藥雜志第 8期 350頁公開了同樣是趙博光等對苦豆草成熟的種子及花期葉中的苦參堿提取分離的生產(chǎn)工藝進行了初步的研究。認為用甲苯提取分離苦參堿，所得產(chǎn)品純度高 ， 且具有價廉、易回收的優(yōu)點 [4]。 中國專利公開了《從苦豆子制備苦參堿的工藝》，它是將苦豆子經(jīng)浸出、提取、轉(zhuǎn)型、沉 淀、催化加氫和水相有機萃取，重結(jié)晶等工藝步驟，制得苦參堿 。高紅寧 [5]等利用陶瓷膜微濾技術(shù)來澄清苦參水提液 ， 李宗效 [6]等利用工業(yè)甲醇回流提取苦參粉多次后合并提取液過濾 ， 濾液減壓蒸餾回收溶劑 ， 然后用親脂性溶劑運城學(xué)院學(xué)士學(xué)位論文 4 脫脂萃取的方法來提取和分離苦參堿 。 張存莉 [7]等用不同濃度的乙醇和陽離子交換樹脂對苦參中苦參堿進行了提取和純化 ， 并對不同的苦參中的苦參堿的純化工藝進行了比較和研究 。 張奎遠 [8] 等利用正交設(shè)計對乙醇的濃度 、 用量 、 提取時間 、提取次數(shù)等進行了正交實驗確定了苦參中苦參堿的最佳提取工藝 。 于喜水 [9]等做了乙醇法 、 氨 氯仿法 、 陽離子交換樹脂法三種方法的對比實驗 ， 證明了樹脂法提取苦參堿收率高 、 質(zhì)量好 。 楊基森 [10]等用正交試驗對苦參 提取 、 精制工藝條件進行了考察 ， 以苦參堿為定量指針 ， 用薄層掃描法測定不同工藝條件苦參堿含量變化的動向參數(shù) ， 結(jié)果表明水提醇沉法損失較大 ， 醇提水沉法損失次之 。 蔡中琴 [11]等也用正交試驗對苦參堿的提取工藝進行了優(yōu)選 。 試驗選擇提取溶劑 、 提取方式 、濃縮溫度三個因子 ， 每因子三水平 ， 用正交表進行試驗設(shè)計 。 結(jié)果表明用水作 提取劑， 采用滲漉法 ， 滲漉液 80下濃縮為提取苦參堿的條件 。 秦學(xué)功 [12]等也考察了苦豆子中苦參堿的提取工藝 。 在室溫下用稀鹽酸水提取苦豆子中苦參總堿 ， 考查pH值 、 浸提時間 、 苦豆子粉粒度及保持副壓 、 超聲波振蕩下總 堿浸出率 ， 并對比熱浸狀況 ， 結(jié)果表明稀酸水冷浸條件下苦參總堿浸出率比熱浸要高 ， 并且也可加快浸提速度 。 秦學(xué)功 [12]等也作了用大孔吸附樹脂吸附分離苦參堿的研究， 以總生物堿吸附量和解吸率為指標(biāo) ， 從大范圍篩選樹脂 ， 并研究吸附與解吸的優(yōu)化條件 。 隨著苦參堿研究的深入，其分析檢測方法也得到了很大程度的改進，目前用來分析檢測苦參堿的方法主要有以下幾種，即酸堿滴定法、安培滴定法、改良REIFER、試劑顯色法、毛細管氣相色譜法、雙波長薄層掃描法、紙色譜法、柱色譜法、分光光度法薄、層色譜法、高效液相色譜法 [13]，其中前幾種方 法操作過程復(fù)雜、靈敏度低，在苦參堿的分析測定中不常用。分光光度法也可用于苦 參 中苦參堿的測定中，但此法也有一定缺陷 ， 在測定中可能會受到其它雜質(zhì)和色素的干擾而影響了測定結(jié)果 。 因此 ， 此法一般是和薄層色譜法同時運用的 。 而薄層色譜法自從 1958年建立后 ， 應(yīng)用范圍極其廣泛 。 經(jīng)過各種改進后 ， 基本上代替了紙色譜法 。 它操作迅速 ， 能以較高的分離性能處理微量物質(zhì) ， 此法除特別的揮發(fā)性物質(zhì)外 ， 基本上可用于所有的各種化合物 ， 尤其成為植物成分分析和研究方面不可缺少的實驗手段 ， 也是目前對生物堿定性分離的主要方法 。 具有代表性的有康紅英 [14]等采用薄層色譜法鑒別和分離了色嗄諾中的苦參堿 ， 證明了此法簡便 、 省時 、分離效果好 、 斑點清晰 、 結(jié)果易判斷 。 陸華 [15]等采用薄層掃描法測定了苦參散中苦參堿的含量 。 高效液相色譜法則在苦參堿含量測定中應(yīng)用的比較普遍 ， 它可以運城學(xué)院學(xué)士學(xué)位論文 5 將苦參堿與其它副 產(chǎn)品 完全分離 ， 從而快速 、 準(zhǔn)確的測 定苦參堿的含量。 具有代表性的有熊英等采用 RPHPLC法測定了龍鳳潔身純中苦參堿和蛇床子素的含量 ，證明此法靈敏 、 準(zhǔn)確 。 本文的研究內(nèi)容 本論文 通過單因子試驗，對苦參中苦參堿的提取工藝條件進行了研究，研究了乙醇濃度、浸泡時間、浸泡溫度、提取次 數(shù)和液料比對苦參中苦參堿提取的影響；采用紫外可見分光光度法測定該成分含量，作為評價指標(biāo)。以期為苦參的精深加工與利用和苦參中苦參堿的生物學(xué)活性研究與應(yīng)用提供依據(jù)。 本文的研究目的及意義 通過對苦參中苦參堿的提取工藝的研究，選擇提取苦參中苦參堿的最佳提取條件。 苦參素在治療慢性乙型肝炎中有同 IFNα相似的治療作用，且不良反應(yīng)少，價格低廉。研究苦參中苦參堿的提取，可以為苦參素的制造和治療慢性乙型肝炎提供依據(jù)。 2 實驗部分 實驗儀器及 藥品試劑 主要 儀器 UV7504 紫外 可見分光光度 計 ： 上海欣茂儀器有限公司 ； DF101S 磁力攪拌器： 金壇市岸頭國瑞實驗儀器廠 ； HHS 數(shù)字恒溫水浴鍋 ： 天津華北實驗儀器有限公司 ； FA1004 電子天平 ： 上海恒平科學(xué)儀器有限公司 ； NOKIA1200 計時器 ： 北京諾基亞制造廠 。 藥品試劑 （ 1） 苦參堿 標(biāo)準(zhǔn)品： 購自 鄭州永和制藥有限公司 運城學(xué)院學(xué)士學(xué)位論文 6 （ 2） 苦參 ： 購自運城市 藥材市場 （ 3） 溴麝草酚蘭 pH= 緩沖液 ： 精確稱取 溴麝草酚蘭 ， 加入到依式子 “++水 =1000mL， X: ， Y: 二鈉 ”配制的溶液中，振搖。 （ 4） 碘化汞鉀 溶液 ： 二氧化汞 ， 加水 60mL 使之溶解。另取碘化鉀 5g，加水 10mL 使之溶解。將兩種液體混合 ， 加水稀釋至 1000mL。 （ 7） ： 精確稱取 磷酸二氫鈉 ， 加水稀釋 ， 定容于 100mL 的容量瓶中。 （ 8） ： 精確稱取 磷酸氫二鈉 ， 加水稀釋 ， 定容于 100mL 的容量瓶中。