【文章內(nèi)容簡介】 得快，由于高溫下物質(zhì)消耗也快，使菌絲反而比在較低溫度下生長的弱，為了能培育健壯的靈芝菌絲體，一般取比菌絲體生長最快時培養(yǎng)溫度略低的溫度，來培養(yǎng)靈芝菌絲體，也就是 2528℃左右，是靈芝菌絲體培育的最適溫度。了解菌絲體生長與溫度的關(guān)系對靈芝的人工栽培有著重要的指導意義。 （ 2）子實體生長與溫度的關(guān)系 子實體的形成分化是菌絲體發(fā)育到一定階段，菌體內(nèi)部生理活性及酶系發(fā)生了相應(yīng)的變化，外界環(huán)境 適合其生長時，靈芝就由營養(yǎng)生長轉(zhuǎn)向生殖生長。靈芝屬恒溫結(jié)實型真菌，靈芝子實體生長與溫度的關(guān)系和菌絲體大致相同，一般在， 20— 30℃范圍內(nèi)都能分化子實體原基，發(fā)育正常形態(tài)的子實體，稍高或低于這個溫度區(qū)間子實體生長速度就會減慢。在接近 25℃溫度中培養(yǎng)的子實體生長較慢，質(zhì)地較緊密，皮殼層發(fā)育得較好，色澤也光亮。在 30℃左右的溫度中培養(yǎng)的子實體生長較快，個體發(fā)育周期較短，質(zhì)地不如 25℃中培養(yǎng)的緊密，皮殼及色澤也較差些。從子實體發(fā)育質(zhì)量來看， 25－ 30℃是靈芝子實體發(fā)生和發(fā)育的適宜溫度。 濕度 水分是所有生物體的 重要組成部分，水分也是菌絲保持正常新陳代謝、調(diào)節(jié)菌絲體內(nèi)外溫度的基本物質(zhì)。因此，了解菌絲體生長、分化與培養(yǎng)基含水量的關(guān)系，以及子實體生長發(fā)育與空氣中濕度的關(guān)系對靈芝的人工培養(yǎng)是十分重要的，也是培養(yǎng)中經(jīng)常遇到的問題之一。自然界中靈芝子實體的分布小環(huán)境，都有較高的空氣濕度。其發(fā)育離地面近，又正值夏秋多雨季節(jié)，這些都充分說明靈芝的生長發(fā)育需要充足的水分和較高的空氣濕度。 （ 1）菌絲體生長與培養(yǎng)基濕度關(guān)系 菌絲體的生長尖端非常細嫩，對環(huán)境的濕度極為敏感，培養(yǎng)基中的水分除被菌絲體直接吸收利用外，同時還對維持菌絲生長尖 端的小環(huán)境起重要作用。養(yǎng)基中含水量對菌絲體生長發(fā)育的影響，除了水分的直接作用外，還有間接作用。這種間接作用主要表現(xiàn)在含水的多少影響培養(yǎng)基的通氣性上。含水量過高，培養(yǎng)基通氣性差，好氧的靈芝菌絲體在培養(yǎng)基內(nèi)部就不能生長或生長極慢，所以，靈芝菌絲生長對培養(yǎng)基的含水量有一定的要求，一般袋栽培養(yǎng)料的含水量控制在 50－ 65%之間，生產(chǎn)上用這樣一個簡單的方法來快速估測，用手抓一把調(diào)配好的培養(yǎng)基，握緊，若指縫中滲出水而不下滴，表明含水量比較適宜；若指縫中未見水滲出，表明含水量過低；若指縫中有許多水滴下，表明含水量過高。而段 要栽培的含水量控制在 33－ 48%之間，視段木材質(zhì)而不同。菌絲體生長階段，由于菌絲在培養(yǎng)基物內(nèi)部生長處于相對封閉的環(huán)境中，所以，對空氣相對濕度的要求比較低，一般要求空氣相對濕度在 60－ 70%。 （ 2）子實體發(fā)生和發(fā)育與空氣濕度的關(guān)系 子實體的生長也是依靠由菌絲尖端組成的菌柄頂端或菌傘邊緣來實現(xiàn)的。濕度較低的話這些幼嫩的尖端很快就干死，一旦菌絲尖端死亡，靈芝的生長馬上停止。這就是靈芝的分化和生長需要高濕度的原因。 空氣中的濕度對靈芝生長發(fā)育的影響主要是從兩個方面表現(xiàn)出來的，一方面空氣中的濕度直接影響子實體具分生 能力的頂端，濕度一低幼嫩的頂端就會干死，子實體生長也即停止。另一方面，空氣中濕度的高低對營養(yǎng)基物中水分的蒸發(fā)也有很大的影響，空氣中濕度越低營養(yǎng)基物中水分蒸發(fā)得越快。因此，比較高的空氣濕度對子實體的生長發(fā)育是很重要的。一般說相對濕度在90%左右對子實體的生長發(fā)育較為合適。過高，超過 95%對子實體的生長發(fā)育不一定有利，因為空氣中過多的水分子會將氧分子排擠走，氧氣不足對子實體生長也會不利，同時芝體沒有水分的蒸騰也不利于營養(yǎng)的輸送。 濕度的控制在靈芝的人工培養(yǎng)中是極為重要的，若連續(xù) 1—2 天濕度都低于 60%，這時子實 體具分生能力的頂端由潔白變成灰黃色，這表示頂端已遭受嚴重破壞，若將這樣的子實體再放入90%的相對濕度空氣中也不容易恢復(fù)它的生長，因此出芝培養(yǎng)時，要時時關(guān)注培養(yǎng)室或培養(yǎng)棚的空氣濕度。 空氣 一切生物與空氣的關(guān)系都很密切。高等綠色植物進行光合作用時，利用陽光，吸收空氣中二氧化碳，合成營養(yǎng)物質(zhì)，向空氣中排出氧氣；進行呼吸作用時，又從空氣中吸收氧氣排出二氧化碳。靈芝是異養(yǎng)性植物，沒有葉綠素，不能進行光合作用，只能依靠氧化和分解現(xiàn)成的有機物作為自己的養(yǎng)料，所以不發(fā)生光合作用過程，只進行呼吸作用，所以在它的生命過程 中也只進行呼吸作用。 不同真菌對空氣的需求程度有所不同，在密閉試管中生長的香菇菌絲其抑制為 30%左右，而靈芝的抑制率為 80%左右，可見靈芝正常生長對空氣要求的嚴格程度。 空氣中通常含有 %的二氧化碳，當空氣中二氧化碳濃度超過 %時，靈芝子實體就不能發(fā)育菌傘，空氣中二氧化碳含量與靈芝的發(fā)育有密切關(guān)系。通常人工培養(yǎng)中出現(xiàn)的靈芝不正常形態(tài)大都是由于培養(yǎng)室中的二氧化碳濃度過高而造成的。二氧化碳對靈芝菌柄的生長有明顯的促進作用，所以，在子實體原基分化以后適當提高培養(yǎng)室二氧化碳濃度，加速菌柄生長，然后使培養(yǎng)室 通風換氣降低室中二氧化碳濃度促使菌傘發(fā)育，培育成符合需要的靈芝體。 光照 （ 1）光照對菌絲體生長的影響 一般來說，光照對于進行光合作用的綠色植物是必不可少的，而對于只進行呼吸作用的真菌似乎不是必需的。然而實驗已證明，對靈芝子實體的正常發(fā)育來說，光照也是不可缺少的條件。光照對靈芝正常生長發(fā)育的影響是多方面的，如光照對菌絲體的生長有抑制作用，對子實體的生長有促進作用以及菌柄和菌傘的生長有明顯的向光性。據(jù)研究報道，靈芝菌絲體的生長與光照有明顯的相關(guān)性，菌絲體生長速度隨照度的增加而減慢。全黑條件下菌絲體生長最快 ，當照度增加到 3000勒克司時，菌絲體每天的生長量不及全黑條件下的一半。因此光照對菌絲體的生長有抑制作用。同時不同的光質(zhì)對靈芝菌絲體也 有不同的影響，黃光對菌絲體生長的抑制作用最強，藍光次之，綠光更次，紅光的抑制作用最小。所以菌絲培養(yǎng)室的照明應(yīng)采用紅色光源。 （ 2）光照對子實體生長發(fā)育的影響 靈芝子實體的發(fā)育與光照密不可分，靈芝菌絲體在黑暗環(huán)境中生長達到一定階段，若無光照的刺激，遲遲不發(fā)育原基；產(chǎn)生了子實體原基，這時如果放在不同的光照環(huán)境中培養(yǎng)，就會形成不同的子實體，在完全黑暗的條件下子實體長成畸形，生長極 為緩慢并瘦弱。光照不足（ 1000勒克司以下）則子實體瘦小，生長減慢，發(fā)育不正常。光照充足則生長迅速發(fā)育正常。因此人工培養(yǎng)時，要得到生長迅速正常形態(tài)的子實體除必要的溫濕環(huán)境條件外，必須使培養(yǎng)室有足夠的光照。同時，光照還可以通過光能的形式，改變靈芝栽培的其它環(huán)境因子，間接影響靈芝子實體的生長。常規(guī)季節(jié)栽培中，室外栽培的光照基本上是會滿足的，而周年栽培的和室內(nèi)出芝的生產(chǎn)基地出現(xiàn)的冬季產(chǎn)量降低并長成畸形，除了通風和溫濕度的原因外，光照不足也可能是其中一個因素。 無機鹽與生長因子 （ 1）無機鹽 主要有磷、鉀、硫 、鎂離子，菌絲中的磷主要是促進葡萄糖的代謝，并合成核酸類物質(zhì)。菌絲能從基質(zhì)吸收的含磷化合物主要為各種磷酸鹽、磷酸腺苷、酪、朊等。而亞磷酸鹽或次磷酸鹽則不被吸收。鉀不參與菌絲的結(jié)構(gòu)，但它能影響細胞膜的通透性及細胞質(zhì)的膠態(tài)，控制著菌絲對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。同時，鉀又對糖代謝和菌絲的生長速度有重要的影響，故鉀也是菌絲生理活動中不可缺少的微量元素之一。當基質(zhì)中鉀的含量低，不能滿足菌絲生長的需要時，將使糖代謝速度減慢，中間代謝產(chǎn)物草酸不能轉(zhuǎn)化而在菌絲內(nèi)蓄積，危及菌絲的生長。硫在菌絲內(nèi)主要是參與蛋白質(zhì)的合成；如半胱氨酸 、胱氨酸、蛋氨酸中都含有硫。維生素 B環(huán)狀硫酸膽堿、硫脲、甲基硫醇等化合物中也都含有硫。菌絲可以吸收基質(zhì)中無機的硫化物，如硫酸鹽、硫代硫酸鹽以及硫的氧化物等。被吸收到菌絲中的硫被直接用于合成各種含硫的有機物?；|(zhì)中只需含硫 ～。鎂是菌絲中幾種酶的活化劑，可影響對碳的吸收與利用，影響到含氧酸類的濃度；鎂還可以與鋁、銅和汞等有毒性的離子形成螯合物，減輕對核蛋白、核膜、核酸的毒害作用。 （ 2）維生素 在靈芝菌絲生長過程中主要需水溶性維生素，即維生素 B 類。在自然條件下，菌絲可合 成維生素 B 類，而不需要外源性維生素。但在菌絲侵入基質(zhì)的初期合成維生素的數(shù)量還不能滿足其分裂的需要，此時如果能從基質(zhì)中吸收適量維生素類、特別是 B 族維生素，對菌的生長是有益的。在靈芝生長的基質(zhì)中不缺少維生素B1。人工栽培時，在培養(yǎng)基中添加少許維生素 B1是有益的。 （ 3）其它生長調(diào)節(jié)劑 復(fù)硝酚鈉 在人工栽培靈芝中，在培養(yǎng)基中添加濃度 23 106的復(fù)硝酚鈉，能促進菌絲生長，明顯提高產(chǎn)量。 核苷酸制劑 據(jù)報導在瓊脂培養(yǎng)基中，添加核苷酸濃度10mg/L，菌絲生長速度比對照增加 %，在木屑、棉籽殼、廢棉的培 養(yǎng)基中添加該濃度的核苷酸，比對照平均增產(chǎn) 30%以上。 稀土元素 在靈芝人工培養(yǎng)料中添加 50－ 100ppm濃度的稀土，菌絲日生長量僅是對照 50%左右，但子實體的產(chǎn)量提高 10－ 20%，且子實體的品質(zhì)得到改善，各營養(yǎng)成分的含量都有明顯提高。 酸堿度 酸堿度是指培養(yǎng)基中游離的氫離子濃度，是以其濃度的對數(shù)值 pH來表示，當氫離子濃度越高， pH值越低；氫離子濃度越低，pH值越高。 pH值在 1－ 14間， pH值 7 時是中性，大于 7 時是堿性，小于 7 時是酸性?？梢杂?pH 試紙進行測定，靈芝菌絲對培養(yǎng)基的 pH適應(yīng)范圍是 4－ 9，最適 宜范圍是 5－ 6， 常規(guī)原料如原木、木屑、生活用水等組成的培養(yǎng)基靈芝都能生長。但靈芝菌絲的生長過程中會產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，使培養(yǎng)基酸化， pH 值下降，所以，配制靈芝培養(yǎng)基時要添加 1%的石膏粉，作為緩沖劑，保持培養(yǎng)基的酸堿度不產(chǎn)生大的變化。 五、 靈芝的有效成分與功效 近年來，國內(nèi)外學者已從靈芝中分離出 150余種化合物，可分為十大類：多糖類、核苷類、呋喃類、甾醇類、生物堿類、氨基酸及蛋白質(zhì)類、三萜類、油脂類、有機鍺、無機離子等。 由于靈芝孢子的外部包裹了兩層堅韌的外壁，一般的物理化學方法又很難將其打破，因此也就限制 了對其化學組成、生物活性成分的認識，因此傳統(tǒng)的藥用部位僅限于其子實體。近年來隨著人工栽培技術(shù)和孢子破壁技術(shù)的發(fā)展，使得靈芝孢子（粉）作為靈芝的又一藥用部位逐漸為人們所認識，對靈芝孢子粉的研究日益增多。 靈芝孢子 粉 有效成分 的化學成分 靈芝孢子的化學成分可分為以下幾類：蛋白質(zhì)和氨基酸類、糖肽類、維生素類、胡蘿卜素、甾醇類、三萜類、生物堿類、脂肪酸類、內(nèi)酯和無機離子等。靈芝孢子蛋白質(zhì)含量達 18%，其中異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸等機體必須氨基酸的含量非常豐富，均高達 10g/kg。 維生素類主要是維生素 E，其含量超過 60mg/100g，另外也含有少量的維生素 C。靈芝孢子中富含多糖和寡糖，其中二糖、三糖、四糖分別是 19 167和 250mg/100g。固醇類有麥角甾 7， 22二烯3β 醇（ ergosta7， 22diene3ol）、β 谷甾醇；從赤芝孢子粉的酸性提取物中分離到了一些三萜類化合物，它們是赤芝孢子酸 A、 B、 C 和 E（ ganosporeic acid A、 B、 C、 E）和ganodermanontrol。三萜類是靈芝子實體中含量高而且種類頗多的一類有機化合物，其種類超過 100種，但在靈芝孢子粉中尚未找到如此多的三萜類物質(zhì)。由于三萜類是重要的生物活性物質(zhì)，因此，三萜類化合物在靈芝子實體與孢子中的差異暗示了二者可能具有不同的藥用價值。靈芝孢子中的脂肪酸類有二十四烷酸（ C24）、硬脂酸（ C18）、棕櫚酸（ C18）、二十二烷酸（ C22）等。內(nèi)酯類屬五環(huán)三萜內(nèi)酯 ， 有赤芝孢子內(nèi)酯（ ganosporelactone） A 和 B。生物堿類有膽堿（ choline）、甜菜堿（ betaine）和硫組氨酸甲基內(nèi)胺鹽。靈芝孢子中的無機元素有鈣、磷、鐵、鎂、鈉、鋅、鍺、硒等，其中有機鍺與人體健康和疾病的防 治有密切的關(guān)系。 靈芝孢子粉的藥理作用 （ 1）抗癌作用 靈芝孢子粉有明顯的抑制移植性動物腫瘤小鼠肝癌腫瘤、小鼠肉瘤 180(S180）及小鼠網(wǎng)細胞肉瘤（ LⅡ）生長的作用。在2~8g/(kg d)的劑量范圍內(nèi)灌胃（ ig）給藥 7d后對小鼠肝癌、S180和 LⅡ的抑瘤率分別在 ~%、 ~%和~%之間，并且有明顯的量效關(guān)系。靈芝孢子粉的醇提取物在體外具有直接抑制癌細胞生長的作用。靈芝孢子粉醇提取物在 1mg/mL時對人宮頸癌細胞 HeLa、人肝癌細胞 HepG人胃 癌細胞 SGC790人白血病細胞 HL60 和來源于小鼠的白血病細胞L1210均具有較強的殺傷能力。 靈芝孢子粉對荷 HAC肝癌小鼠 T 細胞表面分化抗原、體外細胞殺功能以及腫瘤抑制率的影響結(jié)果表明：實驗小鼠總 T 細胞、T 輔助細胞明顯上升。在對小鼠肝癌細胞株 HAC、小鼠白血病細胞株 YAC1 和小鼠肥大細胞性白血病細胞株 P815腫瘤細胞的殺傷活性中靈芝孢子粉組的殺傷活性分別為 %、 %和%，靈芝孢子粉的總抑瘤率為 %。說明靈芝孢子粉能激活和提高特異性（ CTL）和非特異性殺傷細胞（ NK、 LZK） 的抗腫瘤作用，抑制腫瘤細胞增殖。 （ 2）免疫作用 靈芝孢子粉能激活巨噬細胞的吞噬功能，對糖皮質(zhì)激素有拮抗作用。靈芝孢子粉水提取物能提高小鼠腹腔巨噬細胞酸性磷酸酶、β 葡萄糖醛酸酶活性及過氧化氫含量，并能對抗糖皮質(zhì)激素對小鼠脾臟 DNA合成的抑制