【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 得快，由于高溫下物質(zhì)消耗也快，使菌絲反而比在較低溫度下生長(zhǎng)的弱，為了能培育健壯的靈芝菌絲體，一般取比菌絲體生長(zhǎng)最快時(shí)培養(yǎng)溫度略低的溫度，來(lái)培養(yǎng)靈芝菌絲體，也就是 2528℃左右，是靈芝菌絲體培育的最適溫度。了解菌絲體生長(zhǎng)與溫度的關(guān)系對(duì)靈芝的人工栽培有著重要的指導(dǎo)意義。 （ 2）子實(shí)體生長(zhǎng)與溫度的關(guān)系 子實(shí)體的形成分化是菌絲體發(fā)育到一定階段，菌體內(nèi)部生理活性及酶系發(fā)生了相應(yīng)的變化，外界環(huán)境 適合其生長(zhǎng)時(shí)，靈芝就由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)向生殖生長(zhǎng)。靈芝屬恒溫結(jié)實(shí)型真菌，靈芝子實(shí)體生長(zhǎng)與溫度的關(guān)系和菌絲體大致相同，一般在， 20— 30℃范圍內(nèi)都能分化子實(shí)體原基，發(fā)育正常形態(tài)的子實(shí)體，稍高或低于這個(gè)溫度區(qū)間子實(shí)體生長(zhǎng)速度就會(huì)減慢。在接近 25℃溫度中培養(yǎng)的子實(shí)體生長(zhǎng)較慢，質(zhì)地較緊密，皮殼層發(fā)育得較好，色澤也光亮。在 30℃左右的溫度中培養(yǎng)的子實(shí)體生長(zhǎng)較快，個(gè)體發(fā)育周期較短，質(zhì)地不如 25℃中培養(yǎng)的緊密，皮殼及色澤也較差些。從子實(shí)體發(fā)育質(zhì)量來(lái)看， 25－ 30℃是靈芝子實(shí)體發(fā)生和發(fā)育的適宜溫度。 濕度 水分是所有生物體的 重要組成部分，水分也是菌絲保持正常新陳代謝、調(diào)節(jié)菌絲體內(nèi)外溫度的基本物質(zhì)。因此，了解菌絲體生長(zhǎng)、分化與培養(yǎng)基含水量的關(guān)系，以及子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育與空氣中濕度的關(guān)系對(duì)靈芝的人工培養(yǎng)是十分重要的，也是培養(yǎng)中經(jīng)常遇到的問(wèn)題之一。自然界中靈芝子實(shí)體的分布小環(huán)境，都有較高的空氣濕度。其發(fā)育離地面近，又正值夏秋多雨季節(jié)，這些都充分說(shuō)明靈芝的生長(zhǎng)發(fā)育需要充足的水分和較高的空氣濕度。 （ 1）菌絲體生長(zhǎng)與培養(yǎng)基濕度關(guān)系 菌絲體的生長(zhǎng)尖端非常細(xì)嫩，對(duì)環(huán)境的濕度極為敏感，培養(yǎng)基中的水分除被菌絲體直接吸收利用外，同時(shí)還對(duì)維持菌絲生長(zhǎng)尖 端的小環(huán)境起重要作用。養(yǎng)基中含水量對(duì)菌絲體生長(zhǎng)發(fā)育的影響，除了水分的直接作用外，還有間接作用。這種間接作用主要表現(xiàn)在含水的多少影響培養(yǎng)基的通氣性上。含水量過(guò)高，培養(yǎng)基通氣性差，好氧的靈芝菌絲體在培養(yǎng)基內(nèi)部就不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)極慢，所以，靈芝菌絲生長(zhǎng)對(duì)培養(yǎng)基的含水量有一定的要求，一般袋栽培養(yǎng)料的含水量控制在 50－ 65%之間，生產(chǎn)上用這樣一個(gè)簡(jiǎn)單的方法來(lái)快速估測(cè)，用手抓一把調(diào)配好的培養(yǎng)基，握緊，若指縫中滲出水而不下滴，表明含水量比較適宜；若指縫中未見(jiàn)水滲出，表明含水量過(guò)低；若指縫中有許多水滴下，表明含水量過(guò)高。而段 要栽培的含水量控制在 33－ 48%之間，視段木材質(zhì)而不同。菌絲體生長(zhǎng)階段，由于菌絲在培養(yǎng)基物內(nèi)部生長(zhǎng)處于相對(duì)封閉的環(huán)境中，所以，對(duì)空氣相對(duì)濕度的要求比較低，一般要求空氣相對(duì)濕度在 60－ 70%。 （ 2）子實(shí)體發(fā)生和發(fā)育與空氣濕度的關(guān)系 子實(shí)體的生長(zhǎng)也是依靠由菌絲尖端組成的菌柄頂端或菌傘邊緣來(lái)實(shí)現(xiàn)的。濕度較低的話這些幼嫩的尖端很快就干死，一旦菌絲尖端死亡，靈芝的生長(zhǎng)馬上停止。這就是靈芝的分化和生長(zhǎng)需要高濕度的原因。 空氣中的濕度對(duì)靈芝生長(zhǎng)發(fā)育的影響主要是從兩個(gè)方面表現(xiàn)出來(lái)的，一方面空氣中的濕度直接影響子實(shí)體具分生 能力的頂端，濕度一低幼嫩的頂端就會(huì)干死，子實(shí)體生長(zhǎng)也即停止。另一方面，空氣中濕度的高低對(duì)營(yíng)養(yǎng)基物中水分的蒸發(fā)也有很大的影響，空氣中濕度越低營(yíng)養(yǎng)基物中水分蒸發(fā)得越快。因此，比較高的空氣濕度對(duì)子實(shí)體的生長(zhǎng)發(fā)育是很重要的。一般說(shuō)相對(duì)濕度在90%左右對(duì)子實(shí)體的生長(zhǎng)發(fā)育較為合適。過(guò)高，超過(guò) 95%對(duì)子實(shí)體的生長(zhǎng)發(fā)育不一定有利，因?yàn)榭諝庵羞^(guò)多的水分子會(huì)將氧分子排擠走，氧氣不足對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)也會(huì)不利，同時(shí)芝體沒(méi)有水分的蒸騰也不利于營(yíng)養(yǎng)的輸送。 濕度的控制在靈芝的人工培養(yǎng)中是極為重要的，若連續(xù) 1—2 天濕度都低于 60%，這時(shí)子實(shí) 體具分生能力的頂端由潔白變成灰黃色，這表示頂端已遭受?chē)?yán)重破壞，若將這樣的子實(shí)體再放入90%的相對(duì)濕度空氣中也不容易恢復(fù)它的生長(zhǎng)，因此出芝培養(yǎng)時(shí)，要時(shí)時(shí)關(guān)注培養(yǎng)室或培養(yǎng)棚的空氣濕度。 空氣 一切生物與空氣的關(guān)系都很密切。高等綠色植物進(jìn)行光合作用時(shí)，利用陽(yáng)光，吸收空氣中二氧化碳，合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，向空氣中排出氧氣；進(jìn)行呼吸作用時(shí)，又從空氣中吸收氧氣排出二氧化碳。靈芝是異養(yǎng)性植物，沒(méi)有葉綠素，不能進(jìn)行光合作用，只能依靠氧化和分解現(xiàn)成的有機(jī)物作為自己的養(yǎng)料，所以不發(fā)生光合作用過(guò)程，只進(jìn)行呼吸作用，所以在它的生命過(guò)程 中也只進(jìn)行呼吸作用。 不同真菌對(duì)空氣的需求程度有所不同，在密閉試管中生長(zhǎng)的香菇菌絲其抑制為 30%左右，而靈芝的抑制率為 80%左右，可見(jiàn)靈芝正常生長(zhǎng)對(duì)空氣要求的嚴(yán)格程度。 空氣中通常含有 %的二氧化碳，當(dāng)空氣中二氧化碳濃度超過(guò) %時(shí)，靈芝子實(shí)體就不能發(fā)育菌傘，空氣中二氧化碳含量與靈芝的發(fā)育有密切關(guān)系。通常人工培養(yǎng)中出現(xiàn)的靈芝不正常形態(tài)大都是由于培養(yǎng)室中的二氧化碳濃度過(guò)高而造成的。二氧化碳對(duì)靈芝菌柄的生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用，所以，在子實(shí)體原基分化以后適當(dāng)提高培養(yǎng)室二氧化碳濃度，加速菌柄生長(zhǎng)，然后使培養(yǎng)室 通風(fēng)換氣降低室中二氧化碳濃度促使菌傘發(fā)育，培育成符合需要的靈芝體。 光照 （ 1）光照對(duì)菌絲體生長(zhǎng)的影響 一般來(lái)說(shuō)，光照對(duì)于進(jìn)行光合作用的綠色植物是必不可少的，而對(duì)于只進(jìn)行呼吸作用的真菌似乎不是必需的。然而實(shí)驗(yàn)已證明，對(duì)靈芝子實(shí)體的正常發(fā)育來(lái)說(shuō)，光照也是不可缺少的條件。光照對(duì)靈芝正常生長(zhǎng)發(fā)育的影響是多方面的，如光照對(duì)菌絲體的生長(zhǎng)有抑制作用，對(duì)子實(shí)體的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用以及菌柄和菌傘的生長(zhǎng)有明顯的向光性。據(jù)研究報(bào)道，靈芝菌絲體的生長(zhǎng)與光照有明顯的相關(guān)性，菌絲體生長(zhǎng)速度隨照度的增加而減慢。全黑條件下菌絲體生長(zhǎng)最快 ，當(dāng)照度增加到 3000勒克司時(shí)，菌絲體每天的生長(zhǎng)量不及全黑條件下的一半。因此光照對(duì)菌絲體的生長(zhǎng)有抑制作用。同時(shí)不同的光質(zhì)對(duì)靈芝菌絲體也 有不同的影響，黃光對(duì)菌絲體生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)，藍(lán)光次之，綠光更次，紅光的抑制作用最小。所以菌絲培養(yǎng)室的照明應(yīng)采用紅色光源。 （ 2）光照對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響 靈芝子實(shí)體的發(fā)育與光照密不可分，靈芝菌絲體在黑暗環(huán)境中生長(zhǎng)達(dá)到一定階段，若無(wú)光照的刺激，遲遲不發(fā)育原基；產(chǎn)生了子實(shí)體原基，這時(shí)如果放在不同的光照環(huán)境中培養(yǎng)，就會(huì)形成不同的子實(shí)體，在完全黑暗的條件下子實(shí)體長(zhǎng)成畸形，生長(zhǎng)極 為緩慢并瘦弱。光照不足（ 1000勒克司以下）則子實(shí)體瘦小，生長(zhǎng)減慢，發(fā)育不正常。光照充足則生長(zhǎng)迅速發(fā)育正常。因此人工培養(yǎng)時(shí)，要得到生長(zhǎng)迅速正常形態(tài)的子實(shí)體除必要的溫濕環(huán)境條件外，必須使培養(yǎng)室有足夠的光照。同時(shí)，光照還可以通過(guò)光能的形式，改變靈芝栽培的其它環(huán)境因子，間接影響靈芝子實(shí)體的生長(zhǎng)。常規(guī)季節(jié)栽培中，室外栽培的光照基本上是會(huì)滿(mǎn)足的，而周年栽培的和室內(nèi)出芝的生產(chǎn)基地出現(xiàn)的冬季產(chǎn)量降低并長(zhǎng)成畸形，除了通風(fēng)和溫濕度的原因外，光照不足也可能是其中一個(gè)因素。 無(wú)機(jī)鹽與生長(zhǎng)因子 （ 1）無(wú)機(jī)鹽 主要有磷、鉀、硫 、鎂離子，菌絲中的磷主要是促進(jìn)葡萄糖的代謝，并合成核酸類(lèi)物質(zhì)。菌絲能從基質(zhì)吸收的含磷化合物主要為各種磷酸鹽、磷酸腺苷、酪、朊等。而亞磷酸鹽或次磷酸鹽則不被吸收。鉀不參與菌絲的結(jié)構(gòu)，但它能影響細(xì)胞膜的通透性及細(xì)胞質(zhì)的膠態(tài)，控制著菌絲對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。同時(shí)，鉀又對(duì)糖代謝和菌絲的生長(zhǎng)速度有重要的影響，故鉀也是菌絲生理活動(dòng)中不可缺少的微量元素之一。當(dāng)基質(zhì)中鉀的含量低，不能滿(mǎn)足菌絲生長(zhǎng)的需要時(shí)，將使糖代謝速度減慢，中間代謝產(chǎn)物草酸不能轉(zhuǎn)化而在菌絲內(nèi)蓄積，危及菌絲的生長(zhǎng)。硫在菌絲內(nèi)主要是參與蛋白質(zhì)的合成；如半胱氨酸 、胱氨酸、蛋氨酸中都含有硫。維生素 B環(huán)狀硫酸膽堿、硫脲、甲基硫醇等化合物中也都含有硫。菌絲可以吸收基質(zhì)中無(wú)機(jī)的硫化物，如硫酸鹽、硫代硫酸鹽以及硫的氧化物等。被吸收到菌絲中的硫被直接用于合成各種含硫的有機(jī)物。基質(zhì)中只需含硫 ～。鎂是菌絲中幾種酶的活化劑，可影響對(duì)碳的吸收與利用，影響到含氧酸類(lèi)的濃度；鎂還可以與鋁、銅和汞等有毒性的離子形成螯合物，減輕對(duì)核蛋白、核膜、核酸的毒害作用。 （ 2）維生素 在靈芝菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中主要需水溶性維生素，即維生素 B 類(lèi)。在自然條件下，菌絲可合 成維生素 B 類(lèi)，而不需要外源性維生素。但在菌絲侵入基質(zhì)的初期合成維生素的數(shù)量還不能滿(mǎn)足其分裂的需要，此時(shí)如果能從基質(zhì)中吸收適量維生素類(lèi)、特別是 B 族維生素，對(duì)菌的生長(zhǎng)是有益的。在靈芝生長(zhǎng)的基質(zhì)中不缺少維生素B1。人工栽培時(shí)，在培養(yǎng)基中添加少許維生素 B1是有益的。 （ 3）其它生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 復(fù)硝酚鈉 在人工栽培靈芝中，在培養(yǎng)基中添加濃度 23 106的復(fù)硝酚鈉，能促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)，明顯提高產(chǎn)量。 核苷酸制劑 據(jù)報(bào)導(dǎo)在瓊脂培養(yǎng)基中，添加核苷酸濃度10mg/L，菌絲生長(zhǎng)速度比對(duì)照增加 %，在木屑、棉籽殼、廢棉的培 養(yǎng)基中添加該濃度的核苷酸，比對(duì)照平均增產(chǎn) 30%以上。 稀土元素 在靈芝人工培養(yǎng)料中添加 50－ 100ppm濃度的稀土，菌絲日生長(zhǎng)量?jī)H是對(duì)照 50%左右，但子實(shí)體的產(chǎn)量提高 10－ 20%，且子實(shí)體的品質(zhì)得到改善，各營(yíng)養(yǎng)成分的含量都有明顯提高。 酸堿度 酸堿度是指培養(yǎng)基中游離的氫離子濃度，是以其濃度的對(duì)數(shù)值 pH來(lái)表示，當(dāng)氫離子濃度越高， pH值越低；氫離子濃度越低，pH值越高。 pH值在 1－ 14間， pH值 7 時(shí)是中性，大于 7 時(shí)是堿性，小于 7 時(shí)是酸性?？梢杂?pH 試紙進(jìn)行測(cè)定，靈芝菌絲對(duì)培養(yǎng)基的 pH適應(yīng)范圍是 4－ 9，最適 宜范圍是 5－ 6， 常規(guī)原料如原木、木屑、生活用水等組成的培養(yǎng)基靈芝都能生長(zhǎng)。但靈芝菌絲的生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，使培養(yǎng)基酸化， pH 值下降，所以，配制靈芝培養(yǎng)基時(shí)要添加 1%的石膏粉，作為緩沖劑，保持培養(yǎng)基的酸堿度不產(chǎn)生大的變化。 五、 靈芝的有效成分與功效 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已從靈芝中分離出 150余種化合物，可分為十大類(lèi)：多糖類(lèi)、核苷類(lèi)、呋喃類(lèi)、甾醇類(lèi)、生物堿類(lèi)、氨基酸及蛋白質(zhì)類(lèi)、三萜類(lèi)、油脂類(lèi)、有機(jī)鍺、無(wú)機(jī)離子等。 由于靈芝孢子的外部包裹了兩層堅(jiān)韌的外壁，一般的物理化學(xué)方法又很難將其打破，因此也就限制 了對(duì)其化學(xué)組成、生物活性成分的認(rèn)識(shí)，因此傳統(tǒng)的藥用部位僅限于其子實(shí)體。近年來(lái)隨著人工栽培技術(shù)和孢子破壁技術(shù)的發(fā)展，使得靈芝孢子（粉）作為靈芝的又一藥用部位逐漸為人們所認(rèn)識(shí)，對(duì)靈芝孢子粉的研究日益增多。 靈芝孢子 粉 有效成分 的化學(xué)成分 靈芝孢子的化學(xué)成分可分為以下幾類(lèi)：蛋白質(zhì)和氨基酸類(lèi)、糖肽類(lèi)、維生素類(lèi)、胡蘿卜素、甾醇類(lèi)、三萜類(lèi)、生物堿類(lèi)、脂肪酸類(lèi)、內(nèi)酯和無(wú)機(jī)離子等。靈芝孢子蛋白質(zhì)含量達(dá) 18%，其中異亮氨酸、亮氨酸、賴(lài)氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸等機(jī)體必須氨基酸的含量非常豐富，均高達(dá) 10g/kg。 維生素類(lèi)主要是維生素 E，其含量超過(guò) 60mg/100g，另外也含有少量的維生素 C。靈芝孢子中富含多糖和寡糖，其中二糖、三糖、四糖分別是 19 167和 250mg/100g。固醇類(lèi)有麥角甾 7， 22二烯3β 醇（ ergosta7， 22diene3ol）、β 谷甾醇；從赤芝孢子粉的酸性提取物中分離到了一些三萜類(lèi)化合物，它們是赤芝孢子酸 A、 B、 C 和 E（ ganosporeic acid A、 B、 C、 E）和ganodermanontrol。三萜類(lèi)是靈芝子實(shí)體中含量高而且種類(lèi)頗多的一類(lèi)有機(jī)化合物，其種類(lèi)超過(guò) 100種，但在靈芝孢子粉中尚未找到如此多的三萜類(lèi)物質(zhì)。由于三萜類(lèi)是重要的生物活性物質(zhì)，因此，三萜類(lèi)化合物在靈芝子實(shí)體與孢子中的差異暗示了二者可能具有不同的藥用價(jià)值。靈芝孢子中的脂肪酸類(lèi)有二十四烷酸（ C24）、硬脂酸（ C18）、棕櫚酸（ C18）、二十二烷酸（ C22）等。內(nèi)酯類(lèi)屬五環(huán)三萜內(nèi)酯 ， 有赤芝孢子內(nèi)酯（ ganosporelactone） A 和 B。生物堿類(lèi)有膽堿（ choline）、甜菜堿（ betaine）和硫組氨酸甲基內(nèi)胺鹽。靈芝孢子中的無(wú)機(jī)元素有鈣、磷、鐵、鎂、鈉、鋅、鍺、硒等，其中有機(jī)鍺與人體健康和疾病的防 治有密切的關(guān)系。 靈芝孢子粉的藥理作用 （ 1）抗癌作用 靈芝孢子粉有明顯的抑制移植性動(dòng)物腫瘤小鼠肝癌腫瘤、小鼠肉瘤 180(S180）及小鼠網(wǎng)細(xì)胞肉瘤（ LⅡ）生長(zhǎng)的作用。在2~8g/(kg d)的劑量范圍內(nèi)灌胃（ ig）給藥 7d后對(duì)小鼠肝癌、S180和 LⅡ的抑瘤率分別在 ~%、 ~%和~%之間，并且有明顯的量效關(guān)系。靈芝孢子粉的醇提取物在體外具有直接抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。靈芝孢子粉醇提取物在 1mg/mL時(shí)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞 HeLa、人肝癌細(xì)胞 HepG人胃 癌細(xì)胞 SGC790人白血病細(xì)胞 HL60 和來(lái)源于小鼠的白血病細(xì)胞L1210均具有較強(qiáng)的殺傷能力。 靈芝孢子粉對(duì)荷 HAC肝癌小鼠 T 細(xì)胞表面分化抗原、體外細(xì)胞殺功能以及腫瘤抑制率的影響結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)小鼠總 T 細(xì)胞、T 輔助細(xì)胞明顯上升。在對(duì)小鼠肝癌細(xì)胞株 HAC、小鼠白血病細(xì)胞株 YAC1 和小鼠肥大細(xì)胞性白血病細(xì)胞株 P815腫瘤細(xì)胞的殺傷活性中靈芝孢子粉組的殺傷活性分別為 %、 %和%，靈芝孢子粉的總抑瘤率為 %。說(shuō)明靈芝孢子粉能激活和提高特異性（ CTL）和非特異性殺傷細(xì)胞（ NK、 LZK） 的抗腫瘤作用，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。 （ 2）免疫作用 靈芝孢子粉能激活巨噬細(xì)胞的吞噬功能，對(duì)糖皮質(zhì)激素有拮抗作用。靈芝孢子粉水提取物能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞酸性磷酸酶、β 葡萄糖醛酸酶活性及過(guò)氧化氫含量，并能對(duì)抗糖皮質(zhì)激素對(duì)小鼠脾臟 DNA合成的抑制