【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 8 路線、研究方法和研究進(jìn)度： 技術(shù)路線 消毒劑稀釋為所需各個(gè)濃度對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌進(jìn)行殺滅作用，觀察作用時(shí)間不同下，消毒劑對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌的殺滅效果。 研究方法 1) 試 驗(yàn)準(zhǔn)備 2) 改良羅 琴 培養(yǎng)基的制作 3) 細(xì)菌的 鑒定 4 ) 麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn) 比濁 管的配制 5) 菌液的制備 及接種 6 ) 結(jié)果的 觀察與 判定 研究進(jìn)度 2020 年 5 月 查閱整理資料； 2020 年 10 月至 12 月 試驗(yàn)過程 ； 2020 年 3 月 至 5 月 撰寫論文； 2020 年 5 月 論文答辯。 ： 指導(dǎo)教師（簽名）： 年 月 日 ： 系（蓋章） 年 月 日 9 正 文 聚維酮碘與戊二醛對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌殺滅效果的研究 XXX XX 大學(xué) XX 校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系 摘要： 目的： 研究聚維酮碘和戊二醛在不同濃度、不同作用時(shí)間對(duì)牛型結(jié)核分支桿菌的殺 滅 效果 。方法：用 濃度從 %到 5%的聚維酮碘和 %到 2%的戊二醛，作用時(shí)間從 10min 到 12h分別 對(duì)牛型結(jié)核分支桿 菌進(jìn)行 殺菌試驗(yàn)，接種培養(yǎng)觀察長(zhǎng)菌情況。 結(jié)果 ： 5%的聚維酮碘 作用 10min、 2%的 聚維酮碘作用 2h、 1%濃度的聚維酮碘 作用 6h 后均可殺滅牛型 結(jié)核 分支 桿菌，而 1%濃度以下 的聚維酮碘 對(duì) 牛型 結(jié)核 分支 桿菌沒有殺滅效果； 2%的戊二醛對(duì)結(jié)核桿菌沒有殺滅作用。該試驗(yàn)結(jié)果為養(yǎng)殖場(chǎng)選擇消毒劑對(duì)環(huán)境進(jìn)行凈化提供了理論依據(jù)。 關(guān)鍵詞： 牛型結(jié)核分支桿菌；聚維酮碘；戊二醛；殺菌作用；消毒劑 Observation on the Effect of Povidone Iodine and Glutaraldehyde Ddisinfectant for Killing the Bovine Mycobacterium XXX Department of Veterinary Medicine, XX University Abstract: Objective: To study the effect of povidone iodine and germicidal efficacy of glutaraldehyde in different concentrations, different time on bovine type of Mycobacterium : concentration from % to 5% povidone iodine and % to 2% glutaraldehyde, time from 10min to 12h germicidal experiments were conducted on the type of Mycobacterium tuberculosis, bacterial culture was : 5% povidone iodine 10min, 2% povidone iodine 2h, 1% concentration of povidone iodine 6h can kill Mycobacterium bovis, and 1% concentrations povidone iodine on the type of Mycobacterium tuberculosis without killing effect。 2% glutaraldehyde has no killing effect on Mycobacterium test results for the farms to select disinfectants to purify the environment provides a theoretical basis. Key words: Bovine Mycobacterium 。 povidoneiodine。 glutaraldehyde。 germicidal efficacy。 disinfectant 1 前言 牛結(jié)核病 (Bovine tuberculosis， BTB)主要是由牛分支桿菌 (Mycobacterium bovis)引起的一種嚴(yán)重的人畜共患慢性、消耗性傳染病。以病牛貧血、消瘦、體虛乏力、精神萎靡不振和生產(chǎn)力下降等為特征 [1]。其特點(diǎn)是在多種組織器官形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死 [2]。 牛結(jié)核病為一種人獸共患病，不進(jìn)給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大損失，還嚴(yán)重威脅人類健康，經(jīng)調(diào)查， 在非洲的亞薩哈拉地區(qū)的國(guó)家生產(chǎn)的 90%的原奶和被這些國(guó)家的人直接消費(fèi)的奶要么是新鮮的要么是發(fā)酵的，但都沒有經(jīng)過巴氏消毒 [3] ， 導(dǎo)致這些地區(qū)大部分人都感 10 染了結(jié)核病。并且有相關(guān)研究指出，如果人是通過吸入的方式感染牛分枝桿菌，感染人會(huì)發(fā)展成典型的肺結(jié)核 [4] 。 利用消毒劑對(duì)畜禽及其周圍環(huán)境進(jìn)行消毒以殺滅病原體、切斷傳染途徑，已成為預(yù)防和控制畜禽傳染病流行的重要措施 [5]。選出能有效殺滅結(jié)核分枝桿菌的消毒劑，是控制其感染的一個(gè)有力途徑 [6]。 對(duì)結(jié)核桿菌的殺滅效果研究已經(jīng)相繼有了報(bào)道，如：“ 84”消毒液對(duì)結(jié)核桿菌的殺滅效果研究 [7]，含氯復(fù)方消毒劑殺滅結(jié)核桿菌效果的試驗(yàn)觀察 [8]，以及碘伏對(duì) 3株分支桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株殺滅效果的研究 [9]。 聚維酮碘作為 目前畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)常用的碘制劑之一，可殺死大部分細(xì)菌、真菌和病毒 [10]，是一種高效、廣譜的消毒殺菌劑。殺菌范圍廣，作用強(qiáng)能殺死病毒、細(xì)菌、芽孢、繁殖體、真菌、原蟲。無刺激性，毒性低。低濃度效果好，成本低 [11]。夏勇等的研究結(jié)果顯示聚維酮碘消毒劑安全無毒 [12]。 而 戊二醛作為養(yǎng)殖場(chǎng)常用消毒劑之一，是一種廣譜、高效的滅菌劑，對(duì)芽胞、一般的細(xì)菌繁殖體、分枝桿菌、病毒、真菌等都有良好的殺滅作用 [13]。 但是，聚維酮碘 和戊二醛對(duì)牛型結(jié)核分枝桿菌的殺菌效果 還 未見報(bào)道。 本 研究 采用養(yǎng)殖場(chǎng)常用的 鹵素類消毒劑聚維酮碘、醛 類消毒劑戊二醛進(jìn)行 殺 菌試驗(yàn)，試驗(yàn)通過觀察不同濃度消毒劑、不同消毒時(shí)間對(duì)結(jié)核桿菌的 殺 菌效果，為養(yǎng)殖場(chǎng)在開展對(duì)牛結(jié)核病的的預(yù)防工作選擇消毒劑時(shí)提供理論依據(jù)。 2 材料與方法 試驗(yàn)藥品 戊二醛、聚維酮碘、 磷酸二氫鉀、枸櫞酸鎂、硫酸鎂、谷氨酸鈉、丙三醇、馬鈴薯淀粉、新鮮雞蛋、孔雀石綠、 NaCl、蒸餾水等。 以上試劑均購(gòu)自國(guó)產(chǎn)分析純。 細(xì)菌材料 試驗(yàn)所需 細(xì) 菌由 實(shí)驗(yàn)室 提供 。 主要試驗(yàn)器材 高壓滅菌鍋、離心機(jī)、水浴鍋、無菌操作臺(tái)、 生化 培養(yǎng)箱、移液槍等。 試驗(yàn)方法 細(xì)菌的鑒定 吸 取少量生理鹽水置于載玻片上，用接種環(huán)適量挑取在改良羅 琴培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的單菌落于載玻片上，涂抹均勻，用齊 尼二氏染色法染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察，如可見紅色、抗酸性、短桿狀、微彎、團(tuán)狀聚集菌體 , 偶見分枝即為牛結(jié)核分枝桿菌。 改良羅氏 培養(yǎng)基的制作 磷酸二氫鉀 14g，枸櫞酸鎂 ，硫酸鎂 ，谷氨酸鈉 ，丙三醇 12mL，溶 11 解于 600mL 水中，加馬鈴薯淀粉 30g，混勻，沸水浴煮 1h 成糊狀，待冷后加經(jīng)消毒紗布過濾的新鮮雞卵液 1000mL，再加入無菌的 2%孔雀綠水溶液 20mL，混勻后 分裝于無菌試管內(nèi)， 85℃ 間歇滅菌 2 次，冷卻后經(jīng) 37℃ 無菌試驗(yàn) 24h 備用 。 消毒液的配制 試驗(yàn)室提供給 5%的聚維酮碘和 2%的戊二醛。試驗(yàn)所需其他濃度均以原濃度為基礎(chǔ) ，加入滅菌蒸餾水 配制。 每個(gè)濃度消毒劑均為 2ml。 標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳葷峁艿闹苽? 表 1: 麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)管的制備 Table Ⅰ : preparation of McFarland standard tube 麥?zhǔn)蠘?biāo)準(zhǔn)管號(hào) 體積（ ml）