【文章內(nèi)容簡介】 3: 健康人 M4: 健康人 M5: 腫瘤患者 M1: 腫瘤患者 M2: 腫瘤患者 M3: 腫瘤患者 M4: 腫瘤患者 M5: 實驗數(shù)據(jù) 與結果分析 ： 表 1 正常男性淋巴細胞周期 /腫瘤患者淋巴細胞周期 （ M1M2M3） 比率和 PRI 組別 分析細胞數(shù) M1(%) M2(%) M3(%) PRI正常組 1000 27 腫瘤組 1000 正常人與腫瘤患者M1，M2，M3期0102030405060M1 M2 M3正常人腫瘤患者 結果分析：從表 1 可以看出腫瘤組中 M2 期細胞的百分數(shù)低于正常組，而第三周期的細胞所占的百分數(shù)高于正常組，說明腫瘤患者的淋巴細胞 增殖周期交正常人短。 結果討論 ： SCE表示在染色體復制過程中 DNA鏈的等位點發(fā)生了交換，標志染色體在 DNA水平上存在不穩(wěn)定性和損傷，如果某一個體的 SCE 有明顯增高，說明染色體收到環(huán)境中一定因素的影響，或者是受到遺傳 缺陷的內(nèi)在制約因素所致。本研究結果顯示，腫瘤患者 SCE 明顯高于正常組，說明其染色體不穩(wěn)定。在正常情況下，人類外周血中淋巴細胞不再分裂， 幾乎都處于 G0 期。但當加入植物血凝素 (PHA) 后，在這種有絲分裂原作用下，能使原來處于 G0 期的小淋巴細胞轉(zhuǎn)化成大的能夠進行有絲分裂的大淋巴細 胞。由于 Brdu 在 DNA 復制中可被作為核苷酸前體摻入到新合成的 DNA 中，取代胸腺嘧啶核苷，細胞在含有 Brdu 的培養(yǎng)基中經(jīng)歷 2個周期后，中期染色體兩條單體的 DNA 雙鏈在化學組成上就有了差別，利用此方法可明顯地區(qū)分培養(yǎng)細胞的分裂周期。 5 結論與心得 1 結論 ：本文結果表明：在同等條件下， 體外同時培養(yǎng)了腫瘤患者和健康人的淋巴細胞，結果顯示腫瘤患者的淋巴細胞增殖周期較健康人短。 SCE 頻率較健康人高。 2 心得 ： 在實驗中要嚴格遵守實驗步驟、實驗要求， 不能大意馬虎。對于有溫度要求的操作步驟，一 定要等到溫度達到要求時方可操作，否則會影響反應效果，導致實驗失敗。 俗話說萬事開頭難，做試驗一定要敢做敢問，不要怕做錯或者最后做失敗了，只要嚴格按照實驗步驟一步一步操作，加上嚴謹?shù)膽B(tài)度，總會得到預期的結果的。如果做失敗了一次，就要反思哪些步驟出現(xiàn)了問題，哪些不當操作影響了實驗結果，找出問題所在之后再去重新做一邊，操作中就會胸有成竹，也順手的多。 試驗中 團隊合作 也是很重要的一環(huán)， 有時候比較復雜的操作就需要他人的幫助才能順利完成，如果實驗失敗了自己想不出來問題所在，也可以向周圍同學請教，一個人一條思路，說不定你 會從同學那里得到很大的幫助。 致謝 幾個月的畢業(yè)設計讓我結識了良師益友，從開始的開題報告到最后的論文寫作，李老師都給了我很大的幫助，我不懂的地方，她會很耐心的給我講，同時幫我收集了很多 附錄 ：常用溶液配置 (一 )1/15mol/L PBS(磷酸緩沖液 Phosphate Buffer Solution， PBS) 甲液： 1/15mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4 蒸餾水 加至 1000ml 乙液： l/15mol/L KH2PO4溶液 KH2P04 蒸餾水 加至 1000m1 分裝在棕色瓶內(nèi)，于 4℃冰箱中保存，用時甲、乙兩液各按不同比例混合，即可得所需 pH 的緩沖液 ,見下表 : pH 甲液 ml 乙液 mI pH 甲液 ml 乙液 mI (二 )10μ g／ ml 秋水仙素 秋水仙素 lOmg 生理鹽水 100ml 裝入茶色瓶中，為貯備液， 4℃冰箱中保存。甩時取貯備液 1ml 加生理鹽水9ml 即可。 (三 )Giemsa 染液 1．貯備液 Giemsa 粉 1g 純甘油 66ml 甲醇 66ml 先將 Giemsa 粉置于研缽中加少量甘油，充分研磨，呈無顆粒的糊狀。再將全部甘油加入，放入 56℃溫箱中 2 小時，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般兩周后使用為好。 (四 )BrdU 溶液 (200ug/m1) 用無菌青霉素瓶，在室溫下稱取 ，在無菌條件下加入滅菌生理鹽水，溶解，混勻，用黑紙包嚴，避光置冰箱冰格中保存。最好用時現(xiàn)配。 (十 )2 SSC 溶液 用分析天平稱取氯化鈉 克，檸檬酸鈉 克溶于蒸餾水中，加蒸餾水至 1000 毫升。 參考文獻： 〔 1〕 謝雄等譯 1981 化學 物質(zhì)致突變性檢測法 ,人民衛(wèi)生 出版社 〔 2〕 黑木登志夫 1981 國外醫(yī)學 衛(wèi)生學分冊 8： 148. 〔 3〕 White et al. 1980 . 69:283 〔 4〕 Madle 1981 . 85:347 〔 5〕 Speit 1982 . 105:261 〔 6〕 Hartwell LH． Kastan MB Cell cycle rol and cancer [J]. :182l— 1828． 〔 7〕 吳昊， 王秀琴 科學通報 1980； 25： 239. 〔 8〕 陳勇夫 ,等中華老年醫(yī)學雜志 1986； 1 44. 〔 9〕 羅立華 ,等中華老年醫(yī)學雜志 1986； 4： 44. 〔 10〕 王毓鑾 ,等山西醫(yī)藥雜志 1984； 5： 263 〔 11〕 金霈，等 .腫瘤防治研究 1985； 8： 132. 〔 12〕 呂寶忠，等 .遺傳學報 1981； 12： 1. 〔 13〕 Heerma NA,et al. 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