【文章內(nèi)容簡介】 序關(guān)機(jī)。 (2) 儀器不使用時請罩防塵罩。 (3) 注意檢查儀器的運(yùn)行情況，并填寫《儀器使用登記表》。 10 期間核查 由 XX市計量質(zhì)量檢測研究所執(zhí)行 11 相關(guān)記錄 (1) 儀器使用登記表 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS07 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 隔水式恒溫培養(yǎng)箱操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 18 頁 共 49 頁 GNP9270 型隔水式恒溫培養(yǎng)箱操作維護(hù)規(guī)程 1 儀器原理和適用范圍 采用電熱器加熱、精制雙金屬片熱控溫度原理。具有鋼板外殼和內(nèi)箱，中填玻璃棉隔熱等設(shè)計特點(diǎn)。 適用于中小實(shí)驗(yàn)室作干燥、恒溫培養(yǎng)等工作。 儀器工作條件 —— 電源 220V； 50Hz； 5A； 400W功率；接地良好、桌面穩(wěn)定； 環(huán)境條件 —— 防震、通風(fēng)。 2 技術(shù)參數(shù) 溫度調(diào)節(jié)范圍室溫加 3℃～ 60℃； 溫度波動范圍 177。 1℃、溫度均勻性177。 1℃； 最大容量為 420 420 500mm3； 3 操作步驟 接通電源，調(diào)節(jié)溫度旋鈕至工作所需溫度，觀察溫度計是否達(dá)到，多次微調(diào)后定位 擱置工作物后關(guān)上箱蓋，直到需取用時拿出； 放長假不工作前，應(yīng)拔出電源插頭，確保安全。 4 注意事項 為確保培養(yǎng)目的實(shí)現(xiàn)，外插溫度計應(yīng)為合格品， 并隨時觀察溫度是否正確； 為確保儀器內(nèi)鋼制金屬內(nèi)殼與擱板不受腐蝕，酸堿試劑不得置于箱內(nèi)； 箱殼必須有效接地 ,若有電感，應(yīng)立即切斷電源 ,檢查排除故障； 5 儀器維護(hù) 日常維護(hù) —— 保持機(jī)外清潔，每月用消毒液清洗機(jī)內(nèi)，經(jīng)常注意溫度變動； 定期、期間核查按《儀器設(shè)備管理程序》進(jìn)行 ,定期每年一次、其間 1～ 2次，主要了解溫度恒定、鋼制內(nèi)殼和擱板銹蝕狀況等。 6 相關(guān)記錄 《儀器使用登記表》 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS08 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 結(jié)核分支菌培養(yǎng)儀操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 19 頁 共 49 頁 BD960 結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)儀操作維護(hù)規(guī)程 1 技術(shù)參數(shù) 物理參數(shù) 高 53 inches ( cm) 寬 36 inches ( cm) 深 28 inches ( cm) 周邊應(yīng)留空間 左，后，右 12 inches ( cm) 前 48 inches ( cm) 重量（沒有測試管） 754 lbs. (342 kg) 重量（有測試管） 794 lbs. ( kg) 電氣要求 輸入電壓 100 – 120 或 200 – 240 VAC 輸入電流 最大 Amp 輸入頻率 50 or 60 Hz ?3 Hz 散熱 4000 BTU/hr 功耗 2021 Watts 環(huán)境要求 非操作狀態(tài) 溫度 ? C ? C (0? F – 149? F) 濕度 30% 80% RH, noncondensing 操作狀態(tài) ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS08 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 結(jié)核分支菌培養(yǎng)儀操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 20 頁 共 49 頁 溫度 24? C 28? C (? F – 86? F) 濕度 30% 80% RH, noncondensing 定位 水平放置，避免陽光直射，避免發(fā)熱裝置 海拔高度 海拔 04,000 M 2 適用范圍 適用于該儀器操作手冊所列的分支桿菌的培養(yǎng)鑒定和藥敏。 3 工作原理 若接種的 MGIT培養(yǎng)管中有分支桿菌生長，管中的營養(yǎng)成分和氧氣將不斷被消耗， MGIT培養(yǎng)管中的熒光顯示劑將隨著管內(nèi)氧氣濃度的變化而發(fā)生反應(yīng)。一旦培養(yǎng)管內(nèi)氧氣被利用，管內(nèi)熒光指示劑將在特定光源的激活下釋放熒光。 BACTEC MGIT960熒光強(qiáng)度記憶探測器將每隔 60min連續(xù)測定培養(yǎng)管內(nèi)熒光強(qiáng)度，從而判斷管內(nèi)分支桿菌生長情況。 4 試劑 （ 1）試劑名稱： Middlebrook7H9培養(yǎng)肉湯， OADC營養(yǎng)添加劑，抑菌劑 PANTA。 （ 2）試劑生產(chǎn)廠家：美國 BD 生物技術(shù)有限公司 （ 3）包裝規(guī)格： 7X100 （ 4）試劑盒組成：培養(yǎng)肉湯，營養(yǎng)添加劑，抑菌劑 5 操作步驟 （ 1） 標(biāo)本的采集和處理：吸 1ml的痰液加 1 ： 1的 4%的氫氧化鈉消化 15分鐘，取消化液離心 10分鐘。棄去上清液，加入 PBS液 5ml，溫和混勻。再離心，棄去上清液，加入無菌 PBS液 1ml 充分混勻。 （ 2） 胃液、腦脊液、骨膜液、胸膜液和膀胱穿刺尿等標(biāo)本要先去污染處理。 （ 3） 在 MGIT管標(biāo)簽上直接標(biāo)記 ，在無菌條件下用滴管加入 OADC營養(yǎng)添加劑；在無菌條件下加入 PANTA抗菌素混合溶液。 （ 4） 加入 （注意：標(biāo)本量超過 ）。 （ 5） 旋緊管蓋、適當(dāng)混勻。 （ 6） 將 MGIT培養(yǎng)管置入 BACTEC MGIT960全自動分支桿菌培養(yǎng)儀孵育培養(yǎng)。 （ 7） BACTEC MGIT960熒光強(qiáng)度記憶探測器每隔 60min連續(xù)測定培養(yǎng)管內(nèi)熒光強(qiáng)度，從而判斷管內(nèi)分支桿菌生長情況。 （ 8）陽性標(biāo)本進(jìn)行涂片，確認(rèn)為分枝桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn) 后發(fā)出報告。 樣品要求： （ 1）標(biāo)本類型：深部痰液。 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS08 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 結(jié)核分支菌培養(yǎng)儀操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 21 頁 共 49 頁 （ 2）標(biāo)本采集：見標(biāo)本采集手冊 （ 3）標(biāo)本儲存和運(yùn)輸：室溫放置，室溫運(yùn)輸并立即送檢。 （ 4）標(biāo)本拒收狀態(tài)：非無菌方式采集的標(biāo)本。 6 藥敏試驗(yàn) （ 1）試劑及試劑制備： MGIT AST SIRE藥敏試劑盒為凍干試劑， 2～ 8℃保存，溶解后可 70℃保存 6個月。建議溶解后立即使用。 SM 160ug INH 20 ug RFP 200 ug EMB 700 ug 試劑制備方法：分別在每一抗菌 素試劑瓶內(nèi)加入 4ml滅菌蒸餾水或去離子水后混勻，得到以下各試劑濃度。 SM 40ug/ml INH 5 ug/ml RFP 50 ug/ml EMB 175g/ml （ 2）陽性管 MGIT管的制備： MGIT陽性管 1～ 3d的陽性培養(yǎng)物。如陽性管超過 4d 陽性的培養(yǎng)物，則需立即振蕩 MGIT管 10s后，取 1 ml均勻培養(yǎng)物用 4 ml生理鹽水稀釋（ 1： 5稀釋）轉(zhuǎn)種。 （ 3陽性對照管的制備： ①取未接種的 MGIT培養(yǎng)管并除去管內(nèi)肉湯。 ②將該空培養(yǎng)管標(biāo)記為陽性對 照管并標(biāo)記配置日期。 ③配置 ％亞硫酸鈉（ 100ml無菌蒸餾水或去離子水中）。 ④將 5ml亞硫酸鈉溶液加入管內(nèi)，將蓋旋緊。使用前至少應(yīng)在室溫放置 1h。 ⑤陽性對照管能多次使用 （ 4）藥敏操作步驟： ①將 MGIT管分別標(biāo)記生長對照（ GC） ,SM、 INH、 RFP、 EMB等。 ②每管中分別加入 OADC營養(yǎng)添加劑。 ③每管中分別加入對應(yīng)量的已稀釋的 S、 H、 R、 E，至終濃度為表 1所示。 表 1抗生素終濃度 抗生素名稱 終濃度 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS08 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 結(jié)核分支菌培養(yǎng)儀操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 22 頁 共 49 頁 SM INH RFP EMB ug/ml ④分別在 5管中加入 1： 5稀釋的陽性培養(yǎng)菌液。 ⑤ BACTEC MGIT960全自動分支桿菌培養(yǎng)儀孵育。 ⑥取 ml 1： 5稀釋的陽性培養(yǎng)菌液接種一血平板，裝入一塑料袋中于 35～ 37℃孵育。 ⑦ 48h后檢查該平血平板是否有其它雜菌生長。 ⑧ 如血平板未見有雜菌生長則可以讀取 BACTEC MGIT960結(jié)果。 ⑨如血平板有雜菌生長則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟。 （ 5）判讀 MGIT管 ① MGIT GC生長對照管和陽性對照管為陽性，陰性管為陰性。 ②當(dāng) GC生長對照管為陽性時則開始判讀藥敏管，并且連續(xù)判讀后續(xù) 2d的結(jié)果。 ③耐藥：藥敏管和 GC管在同一天被判讀儀判讀為結(jié)果陽性，或比 GC管晚 1～ 2d。 ④敏感：藥敏管在 GC出現(xiàn)陽性后 2d內(nèi)仍未見生長則為敏感。 7 MTC與 MOTT鑒定法 （ 1）凡制備作分支桿菌藥敏實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室均需進(jìn)行分支桿菌菌種鑒定。 ① PNB培養(yǎng)基： PNB用二甲基甲酰胺或丙二醇溶解稀釋后加入 BBL MGIT分支桿菌生長指示管中，使最終濃度為 ，制備方法同藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基配制法。 ② TCH培養(yǎng)基： TCH5mg溶于 10ml無菌蒸餾水，取 80 ul加入 BBL MGIT分支桿菌生長指示培養(yǎng)管中，使最終濃度為 5ug/ml，制備方法同藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基配制法。 ③接種方法：與藥敏試驗(yàn)相同，且與藥敏試驗(yàn)同步進(jìn)行。 （ 2）結(jié)果與報告見表 2 表 2 ：分支桿菌菌種初步鑒定 PNB TCH 牛 分 支 桿 菌 人 型 結(jié) 核 分 支 桿 菌 MOTT + + ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS08 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 結(jié)核分支菌培養(yǎng)儀操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 23 頁 共 49 頁 + 8 注意事項 環(huán)境要求： BACTEC MGIT960全自動分支桿菌培養(yǎng)儀，應(yīng)安放在穩(wěn)固工作臺上，保持通風(fēng)，避免震動，避免陽光直射，避免灰塵，避免無線電波干擾，電源條件應(yīng)滿足117/220/240VAC177。 10%； 50/60HZ。檢測室溫范圍為 20— 30℃，相對濕度為 30— 50%。 9 儀器維護(hù) (1)嚴(yán)格按照儀器的關(guān)機(jī)程序關(guān)機(jī)。 (2) 儀器不使用時請罩防塵罩。 (3) 注意檢查儀器的運(yùn)行情況，并填寫《儀器使用登記表》。 10 期間核查 由 XX市計量質(zhì)量檢測研究所執(zhí)行 11 相關(guān)記錄 (2) 儀器使用登記表 ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS09 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 生物安全柜操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 24 頁 共 49 頁 BSC1100Ⅱ B2 型生物安全柜操作維護(hù)規(guī)程 1 技術(shù)參數(shù) 2 適用范圍 適用于微生物操作和實(shí)驗(yàn)分析。 3 操作步驟 200的操作高度，當(dāng)聲 /光報警時及時復(fù)位。 “ 0”位。 ：開啟電源 排風(fēng)與送風(fēng) 滅菌 30’ 后關(guān)閉 照明 開始工作 :關(guān)閉送風(fēng) 照明 開啟滅菌 30’ 后關(guān)閉 排風(fēng) 關(guān)閉電源。 ,請清潔臺面及墻體。 :預(yù)置報警值 160Pa,HEPA壽命終止壓差 180 Pa，更換須由專業(yè)人員操作。 ，請勿將軟紙、細(xì)微的物品等放于進(jìn)風(fēng)格柵附近，以免其被吸入負(fù)壓風(fēng)道和風(fēng)機(jī)中，影響裝備的運(yùn)行。 參數(shù) 數(shù)值 人員安全性 ≤ 4個 產(chǎn)品安全性 ≤ 4個 交叉感染 ≤ 2個 平均送風(fēng)風(fēng)速 ≥ ∕ S 吸入口風(fēng)速 ＞ m∕ S 無故障工作時間 ≥ 8000小時 終端風(fēng)機(jī)風(fēng)量 () 1500m3 電源 AC220V 50HZ 潔凈度等級 100級 振動幅值 XYZ三個方向≤ 4μ m 噪聲 ≤ 65dB（ A） 照明 ≥ 680Lx 紫外線 ≥ 60uW/cm2 電源消耗功率 ≤ 850V ABCD 人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 微生物 室 作業(yè)指導(dǎo)書 文件編號： ABCD3WS09 版本 /修訂號 ： A/0 主題內(nèi)容 生物安全柜操作維護(hù) 規(guī)程 生效日期： 20210808 第 25 頁 共 49 頁 4 注意事項 ，即