【文章內(nèi)容簡介】 作需要的質(zhì)控血清，一般按 36個(gè)月用量準(zhǔn)備 無已知的傳染危險(xiǎn)性，對(duì)已知的經(jīng)血液傳播的病原體如 HIV、 HCV和 HBV 等必須作滅活處理并且靶值或預(yù)期結(jié)果已確定 分析中質(zhì)控 ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果受操作影響大，每一步驟對(duì)測(cè)定結(jié)果都可能會(huì)產(chǎn)生較大的影響，測(cè)定的精 密度是組成測(cè)定各步驟變異和的平方根；改善測(cè)定精密度的措施必須首先著重在最不精密的步驟上，亦即最容易出現(xiàn)問題的步驟上，如加樣、溫育時(shí)間等，應(yīng)對(duì)試劑制備、測(cè)定方法和儀器操作均制定標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（ SOP），但最重要的是在測(cè)定中，所有的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員在進(jìn)行相關(guān)測(cè)定時(shí)，必須嚴(yán)格按相應(yīng)的 SOP進(jìn)行操作，除非經(jīng)實(shí)際工作證明正在使用的 SOP中有不適當(dāng)之處時(shí)，才可對(duì) SOP按一定程序進(jìn)行修改。 實(shí)驗(yàn)中的室內(nèi)質(zhì)量控制程序 室內(nèi)質(zhì)量控制 (IQC)就是由實(shí)驗(yàn)室工作人員采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性 程度旨在監(jiān)測(cè)和控制本室常規(guī)工作的精密度，提高本室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性。并確定當(dāng)批的測(cè)定結(jié)果是否可靠，可否發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。 免疫室內(nèi)質(zhì)控方法除每板試驗(yàn)使用試劑盒提供的陰性對(duì)照和陽性對(duì)照作為內(nèi)質(zhì)控外，目前我們使用臨界值血清法并制作質(zhì)控圖，一般仍沿用生化 LJ 圖進(jìn)行，利用 Westgard 規(guī)則判定失控，應(yīng)首先做好 OCV和 RCVK以確定失控標(biāo)準(zhǔn)。臨界值血清做室內(nèi)質(zhì)控血清用于防止弱陽性標(biāo)本的漏檢。對(duì)任何一個(gè)試驗(yàn)都應(yīng)確定一個(gè)允許的誤差范圍，前提是滿足臨床要求。 如允許誤差定得過小，在臨床上不存在任何意 義，但為了符合該規(guī)定卻要花費(fèi)很大人力、物力和時(shí)間。相反，如果將允許誤差定得過大，將使監(jiān)測(cè)系統(tǒng)察覺不到臨床上要求檢出的誤差，失去質(zhì)控的意義。 最佳條件下已知值質(zhì)控血清變異（ OCV）的測(cè)定 在本實(shí)驗(yàn)室最佳條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測(cè)質(zhì)控血清 2030次，測(cè)得結(jié)果計(jì)算，求出該組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）表示該實(shí)驗(yàn)室的最佳工作質(zhì)量。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL04 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)部質(zhì)量控制手冊(cè) 生效日期： 20210211 第 16 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 現(xiàn)舉例說明 HBsAg ELISA法檢測(cè)時(shí) OCV的測(cè)定。使用的質(zhì)控血清為臨界值血清， HBsAg濃度為 5 ng/ml。在該實(shí)驗(yàn)室中選擇素質(zhì)最好、操作最熟練的技術(shù)員 進(jìn)行認(rèn)真地專門測(cè)定，選用最佳的試劑盒，檢測(cè)之前，將恒溫、加樣器等認(rèn)真校正、調(diào)校正、調(diào)試，使用新的加樣吸頭等，即在最佳、最理想的條件下進(jìn)行檢測(cè)。除質(zhì)控血清外同時(shí)測(cè)定陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品。并作雙份測(cè)定，得出 2 個(gè)吸光度（ A 值），求出 X。連續(xù)作 20 次，求出 20 個(gè) X，即X1??? X20。從這 20個(gè)數(shù)據(jù)中，求出 OCV的 X和 SD。 常規(guī)條件下已知值質(zhì)控血清變異（ RCVK）的測(cè)定。 做常規(guī)檢驗(yàn)的技術(shù)人員，在常規(guī)檢驗(yàn)的條件下，將質(zhì)控血清放在常規(guī)檢測(cè)樣本中，進(jìn)行20 次檢驗(yàn)，結(jié)果計(jì)算同 OCV法。一般認(rèn)為 RCV的 SD在 OCV 的 SD兩倍范圍內(nèi)可以接受。若太大應(yīng)該查找原因，使其向 OCV的 SD 值接近。在改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室條件后（例如校正加樣器，糾正洗板機(jī)操作，調(diào)正溫育溫度等），重新進(jìn)行 RCVK 的測(cè)定。如果 RCVK 的 SD 值更小，說明OCV不是最佳條件下測(cè)定的，應(yīng)重新再測(cè) OCV。常規(guī)條件下， RCVK肯定要比 OCV大。通過質(zhì)控控制各項(xiàng)條件，使 RCVK的數(shù)據(jù)盡可能接近 OCV值。 RCVK的數(shù)據(jù)反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作的質(zhì)量，用于作質(zhì)控圖，對(duì)室內(nèi)檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行控制，每日檢驗(yàn)的結(jié)果，報(bào)告能否發(fā)出。 質(zhì)控圖的制作 通過以上步驟 ，可以開始作室內(nèi)質(zhì)控圖，根據(jù) RCVK的 X和 SD作質(zhì)控框圖。利用質(zhì)控圖可以對(duì)每次檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)沒有更換另一批號(hào)試劑盒和另一批號(hào)質(zhì)控血清時(shí)，該質(zhì)控圖可以連續(xù)作下去。一般來說，免疫室應(yīng)將質(zhì)控品與患者標(biāo)本同時(shí)測(cè)定，并將質(zhì)控結(jié)果標(biāo)在時(shí)空?qǐng)D上，然后觀察結(jié)果是否超過質(zhì)控限，從而判斷該批病人的檢測(cè)結(jié)果是否失控。 設(shè)定靶值 在開始室內(nèi)質(zhì)控圖的制作時(shí)，首先應(yīng)設(shè)定質(zhì)控品的靶值。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)新批號(hào)質(zhì)控品的各個(gè)測(cè)定項(xiàng)目自行確定靶值。靶值必須在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用自己現(xiàn)行的測(cè)定方法進(jìn)行確定。 先連續(xù)測(cè)定同一批的質(zhì)控品 20天，根據(jù)獲得的 20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果，計(jì)算出平均數(shù)，作為暫定靶值。以此暫定靶值作為下一個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控圖的靶值進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。 1個(gè)月結(jié)束后，將該月的在控結(jié)果與前 20個(gè)質(zhì)控測(cè)定結(jié)果會(huì)聚在一起，計(jì)算累積平均數(shù)（第一個(gè)月），以此累積的平均數(shù)作為下 1個(gè)月質(zhì)控圖的靶值。重復(fù)上述操作過程，連續(xù) 35個(gè)月。 常用靶值的設(shè)定：以最初 20個(gè)數(shù)據(jù)和 3— 5個(gè)月在控?cái)?shù)據(jù)會(huì)聚的所有數(shù)據(jù)計(jì)算成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL04 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)部質(zhì)量控制手冊(cè) 生效日期： 20210211 第 17 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 的累積平均數(shù)作為質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用靶值，并以此作為以后室內(nèi)質(zhì)控圖的平均數(shù)。 限 對(duì)新批號(hào)質(zhì)控品應(yīng)確定控制限，控制限通常以標(biāo)準(zhǔn)差倍數(shù)表示。 以最初 20 次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)差，并作為暫定標(biāo)準(zhǔn)差。以此暫定標(biāo)準(zhǔn)差作為下 1 個(gè)月室內(nèi)質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。 1 個(gè)月結(jié)束后，將該月的在控結(jié)果與前 20 個(gè)質(zhì)控測(cè)定結(jié)果匯集在一起，計(jì)算累積標(biāo)準(zhǔn)差（第一個(gè)月），以此累積的平均數(shù)作為下 1 個(gè)月質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差。重復(fù)上述操作過程，連續(xù) 3— 5個(gè)月。 以最初 20次質(zhì)控測(cè)定結(jié)果和 3— 5 個(gè)月在控結(jié)果匯集的所有數(shù)據(jù)計(jì)算的 累積標(biāo)準(zhǔn)差作為質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用標(biāo)準(zhǔn)差，并以此作為以后室內(nèi)質(zhì)控圖的標(biāo)準(zhǔn)差。 在求出均值和標(biāo)準(zhǔn)差后，再確定質(zhì)控上限（ UCL）及質(zhì)控下限（ LCL）。質(zhì)控上限值 x+3s。 質(zhì)控下限為 x3s?？刂葡逓樾袆?dòng)界限，若超出此線，極可能為誤差，應(yīng)采取積極的行動(dòng)，以求改善。另將 x177。 2s定為上下警告線，若超出此線，則極有誤差可能。雖不必采取行動(dòng)，但需要密切注意今后的趨勢(shì)變化。 根據(jù)質(zhì)控品的靶值和控制限，繪制 LeveyJennings質(zhì)控圖。以 Y軸 為質(zhì)控品的測(cè)定值，X軸為測(cè)定次數(shù) N。在 LeveyJennings質(zhì)控圖上 Y軸刻度上一般提供 x177。 3s 的濃度范圍。X軸刻度通常表示為時(shí)間，常為 1個(gè)月。各水平線相應(yīng)為均值和質(zhì)控限。圖中其失控定為 x177。 3s。目前我室仍依據(jù) Westgard規(guī)則判定失控。 質(zhì)控結(jié)果的記錄 質(zhì)控記錄是重要的質(zhì)量文件，也是重要的法律證據(jù)。記錄需完整 所有實(shí)驗(yàn)的原始資料均應(yīng)存檔；所有的記錄均應(yīng)規(guī)范登記在冊(cè)；原始登記表應(yīng)記錄試劑來源、批號(hào)；質(zhì)控血清的來源及測(cè)定值并注明是否在控；簽上實(shí)驗(yàn)者姓名及審核者姓名。 如有失控，應(yīng)填寫失控報(bào)告、記錄失控?cái)?shù)據(jù)、失控判斷規(guī)則、失控原因、處理成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL04 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)部質(zhì)量控制手冊(cè) 生效日期： 20210211 第 18 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 措施、處理后的效果； 每月應(yīng)有總結(jié)，質(zhì)量負(fù)責(zé)人審核并簽名 如試驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床診斷有決定意義，其樣本應(yīng)保留，至少與病歷保存期一致 同時(shí)或另行記錄校準(zhǔn)詳細(xì)情況及儀器相關(guān)情況。 失控情況處理及原因分析 由免疫室質(zhì)控主管審核質(zhì)控結(jié)果，如陰性對(duì)照顯色，陽性對(duì)照不顯色立即判定失控，當(dāng)陰性對(duì)照，陽性對(duì)照在控時(shí)，進(jìn)一步分析臨界值血清的質(zhì)控結(jié)果，按照 Westgard質(zhì)控規(guī)則判斷測(cè)定結(jié)果是否在控制范圍。失控信號(hào)的出現(xiàn)受多種原因的影響，這些因素包括操作上的失誤，試劑，校準(zhǔn)物，質(zhì)控品的失敗，儀器維修不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則，控制限范圍不恰當(dāng)?shù)取ＪЭ匦盘?hào)一旦出現(xiàn)就意味與測(cè)定質(zhì)控品相關(guān)的那批病人標(biāo)本報(bào)告可能作廢。此時(shí)，首先要查導(dǎo)致的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例的（如 5%或 10%）的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測(cè)定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測(cè)定結(jié)果是否可靠，對(duì)失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛?。常?guī)檢驗(yàn)工作中，必須堅(jiān)持室內(nèi)質(zhì)量控制流程。質(zhì)控值在控，患者標(biāo)本可以檢測(cè)和報(bào)告；質(zhì)控值失控時(shí)，須停止患者標(biāo) 本的檢測(cè)，據(jù)發(fā)檢驗(yàn)報(bào)告，然后分析尋找失控原因，著手解決問題。 當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘?hào)時(shí)，可以從以下步驟尋找原因 : ：立即重測(cè)同一質(zhì)控品：用以查明的質(zhì)控原因，另外，這一步還可以查出偶然誤差，如有偶然誤差，則重測(cè)的結(jié)果應(yīng)在允許范圍內(nèi)（在控）。如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則新開一瓶質(zhì)控品，重測(cè)質(zhì)控項(xiàng)目：如新開的質(zhì)控血清結(jié)果正常，那么原來那瓶質(zhì)控血清可能過期或室溫放置時(shí)間過長而變質(zhì)，或者被污染。 ：是否更換過試劑，核對(duì)試劑瓶、試劑批號(hào)、試劑配制，試劑外觀是否正常，如有問 題，更換試劑，重測(cè)失控項(xiàng)目。 ：如果重測(cè)結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行儀器維護(hù)，重測(cè)質(zhì)控項(xiàng)目：檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換，濾光片是否需要清潔或更換，對(duì)儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。 、操作等測(cè)定條件是否有變動(dòng)或異常，排除后重測(cè)失控項(xiàng)目。 分析后質(zhì)控 檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量控制 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL04 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)部質(zhì)量控制手冊(cè) 生效日期： 20210211 第 19 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 查對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目是否完全檢測(cè)完畢，減少漏查的發(fā)生。同時(shí)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行核查核對(duì)，對(duì)于十分異常、與臨床診斷不相符合及不能用相關(guān)臨床知識(shí)來解釋的結(jié)果進(jìn)行復(fù)查，及時(shí)與臨床溝通尋找 原因，并記錄下相關(guān)信息進(jìn)行保存。合格的或者確認(rèn)無誤的結(jié)果簽字發(fā)放報(bào)告。對(duì)于我室的常規(guī)急診項(xiàng)目我們需在兩個(gè)小時(shí)之內(nèi)完成檢驗(yàn)并且報(bào)告臨床或發(fā)放報(bào)告。 檢驗(yàn)后的標(biāo)本保存 我室的檢驗(yàn)后標(biāo)本一般存放于 2— 8℃冰箱，注明相關(guān)信息如檢測(cè)時(shí)間、標(biāo)本編號(hào)、門診或住院等。標(biāo)本的保存是為了查對(duì)病人的標(biāo)本與檢測(cè)結(jié)果的聯(lián)系。一般保存 7天。 6 室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的管理 每月室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理 每個(gè)月的月末，應(yīng)對(duì)當(dāng)月的所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)進(jìn)行匯總和統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)算的內(nèi)容至少應(yīng)包括： ⑴ 當(dāng)月每個(gè)測(cè)定項(xiàng)目原始質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的平均數(shù) 、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。 ⑵ 當(dāng)月每個(gè)測(cè)定項(xiàng)目除外失控?cái)?shù)據(jù)后的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。 ⑶ 當(dāng)月及以前每個(gè)測(cè)定項(xiàng)目所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的累積平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。 每月室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的保存 每個(gè)月的月末，應(yīng)將當(dāng)月的所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)匯總整理后存檔保存，存檔的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)包括： （ 1）當(dāng)月所有項(xiàng)目原始質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)； （ 2）當(dāng)月所有項(xiàng)目質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的質(zhì)控圖； （ 3）所有質(zhì)控的計(jì)算數(shù)據(jù)（包括平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)及累積的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)等）； （ 4）當(dāng)月的失控報(bào)告單（包括失控時(shí)間、項(xiàng)目、違背哪一項(xiàng)失控規(guī)則、失控原因、采取 的糾正措施、糾正后效果如何、操作人員及質(zhì)控主管簽字）。 每月上報(bào)的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)圖表 每個(gè)月的月末，將當(dāng)月的所有質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)匯總整理后，應(yīng)將以下匯總表上報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人： （ 1） 當(dāng)月所有測(cè)定項(xiàng)目質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)匯總表。 （ 2） 所有測(cè)定項(xiàng)目該月的失控情況匯總表。 室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的周期性評(píng)價(jià) 每個(gè)月的月末，都要對(duì)當(dāng)月室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)及累積平均數(shù)、成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL04 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)部質(zhì)量控制手冊(cè) 生效日期： 20210211 第 20 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 標(biāo)準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)之間是否有明顯不同。如果發(fā)現(xiàn)有顯著性的變異，就要對(duì)質(zhì)控圖的均值、標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行修改，并要對(duì)質(zhì)控方法重新進(jìn)行設(shè)計(jì)。 成都市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 免疫 SOP 文件編號(hào)： CDEYLABMY –GL05 版本 /修訂號(hào)： B/0 主題內(nèi)容 免疫室內(nèi)務(wù)管理 生效日期： 20210211 第 21 頁 共 228 頁 Laboratory of Chengdu People’s Hospital 免疫室內(nèi)務(wù)管理 1 目的 對(duì)免疫室內(nèi)務(wù)進(jìn)行實(shí)效管理，以保證實(shí)驗(yàn)室整體內(nèi)務(wù)管理和生物安全的要求。 2 適用范圍 適用于免疫室 3 職責(zé) 檢驗(yàn)科主任負(fù)責(zé)組織人員制定免疫室內(nèi)務(wù)管理程序，免疫室組長負(fù)責(zé)組織人員具體實(shí)施。 4 該 SOP變動(dòng)程序 本標(biāo)準(zhǔn)程序的變動(dòng)，可由任一使用本 SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)組長、科主任。 ? 免疫組崗位分工與職責(zé)管理規(guī)定 免疫組人員少，標(biāo)本多，標(biāo)本保存時(shí)間較長，出報(bào)告時(shí)間長，所以要加強(qiáng)責(zé)任心，提高效率，爭(zhēng)取盡快盡早并準(zhǔn)確的發(fā)報(bào)告。 工作