蛋白質(zhì)制備資料(存儲(chǔ)版)
【正文】 配體。,〔一〕免疫電泳原理(yu225。,,+,+,,電 泳前,電 泳后,火箭(huǒji224。o)毛細(xì)管電泳,能用于別離多種生物(shēngw249。,〔二〕影響(yǐngxiǎng)毛細(xì)管電泳的因素,遷移時(shí)間和峰面積是重要指標(biāo)。,4.毛細(xì)管凝膠電泳〔CGE〕,按填充(ti225。ng)因素,熱力學(xué) 平衡(p237。),樣品純度(ch,(三〕溫度,通常選擇4℃冷室或25 ℃溫箱進(jìn)行結(jié)晶。,三、結(jié)晶(ji233。,較靈敏，適合測定20～40μg/mL 的蛋白質(zhì)溶液．,雖精確度不高，但操作簡便， 樣品可回收。nɡ)于蛋白質(zhì)純度鑒定。ng)分析法,此法優(yōu)點(diǎn)是時(shí)間(sh237。n yǒnɡ),SDSPAG電泳(di224。ir243。此法可測量微量抗原物質(zhì)，也可測量微量抗體物質(zhì)。熒光胺與伯胺專一結(jié)合后得到熒光加成產(chǎn)物，可用于PAG。)在一起，上 到CMSepharose Fast Flow 陽離子交換 柱上，采用0.05mol/L檸檬酸緩沖液〔pH 5.0〕平衡吸附，請(qǐng)問：在此條件下，哪種 蛋白質(zhì)不被吸附，被吸附的蛋白質(zhì)哪種先 被鹽溶液〔1mol/LNaCl梯度〕洗下來， 為什么？,第三十一頁，共三十二頁。n)層析(IEX),柱層析技術(shù),凝膠過濾層析,疏水相互作用層析〔HIC〕,親和層析,免疫親和層析,共價(jià)層析,固定化金屬離子親和層析,染料配體親和層析,吸附層析,聚焦層析,高效液相層析〔HPLC〕,第二十九頁，共三十二頁。,五、超速離心沉降(ch233。n yǒnɡ)法,常用(ch225。j236。nɡ)大晶體。,〔二〕蛋白質(zhì)濃度,結(jié)晶母液濃度越高，結(jié)晶時(shí)機(jī)越大。jīng)條件,〔一〕蛋白質(zhì)純度(chjīng),一、根本原理,決定(ju233。ch233。ngy242。,第十九頁，共三十二頁。d236。zh236。,⑵酶催化反響直接或間接地與化學(xué)反響耦聯(lián)，而這個(gè)化學(xué)反響能產(chǎn)生顏色很深的不溶性產(chǎn)物(chǎnw249。,2.銀染色法,是利用銀離子與蛋白質(zhì)以鹽或配價(jià)絡(luò)鹽的形式結(jié)合， 后由甲醛將銀離子復(fù)原成可見的銀顆粒。,〔四〕雙向電泳〔二維凝膠電泳〕,雙向凝膠電泳技術(shù)(j236。,等電聚焦(j249。,3.電泳條件,pH范圍越窄，分辨力越高。,等電聚焦電泳：兩性電解質(zhì)載體(z224。ng)蛋白質(zhì)分子量 〔SDS學(xué)名為十二烷基磺酸鈉〕,第九頁，共三十二頁。 d224。,由于Cl和Gly離子的泳動(dòng)速度不同，造成電壓梯度不連續(xù)。n yǒnɡ),PAG電泳(di224。,第三頁，共三十二頁。n yǒnɡ),顯微電泳,等電聚焦,蔗糖密度梯度,等速電泳,〔按支持物〕,紙上電泳,醋酸纖維薄膜電泳,薄層電泳,非凝膠電泳和凝膠電泳,二、電泳的類型,第二頁，共三十二頁。i),蛋白質(zhì)別離純化(ch),蛋白質(zhì)的層析別離,蛋白質(zhì)的電泳別離,蛋白質(zhì)的結(jié)晶,內(nèi) 容 提 要,〔第五講〕,第一頁，共三十二頁。zh237。n yǒnɡ),第四頁，共三十二頁。nx249。nɡ suō)膠,別離(fēnl237。n yǒnɡ),SDSPAG電泳是專門用來測定
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