【正文】 出現(xiàn)男性化現(xiàn)象,因而限制了它的應(yīng)用。ngtnghu224。n t243。n t243。,醋酸(c249。肌內(nèi)注射后2~3天血藥濃度達(dá)到峰值。g/kg,14天時(shí)降至30pg/kg。,醋酸(c249。 內(nèi)服時(shí)孕激素作用約為黃體酮的75倍,無(wú)雌激素和雄激素活性,具有顯著排卵抑制作用。g//kg、1.2~1.8181。 美國(guó)FDA規(guī)定休藥期48h,但歐盟禁止使用。nli 內(nèi)服后脂肪中殘留未被檢出,但尿中殘留可檢出。不具有雌激素和雄激素樣活性,但有明顯抗雌激素作用。n)表明對(duì)家兔具有死胎率增加和致畸作用。i),對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的主要有甾類同化激素(包括雌酮、雌二醇、睪酮、皮質(zhì)酮等物質(zhì))及β2受體激動(dòng)劑(苯乙胺類)。 危害多具有隱蔽性,易造成(z224。,糖皮質(zhì)激素的危害(wēih224。ngdī)而引起休克,甚至死亡。)激素的危害,目前,同化激素對(duì)環(huán)境的污染已引起了社會(huì)各界的普遍關(guān)注。 但是,在利益驅(qū)動(dòng)下,在世界范圍內(nèi),同化激素仍在被大量濫用。nghu224。ng)腫瘤。,對(duì)其他動(dòng)物(d242。 在日本,發(fā)現(xiàn)(fāxi224。i),雌性激素造成的環(huán)境污染,同樣可能造成某些物種的絕種。 對(duì)女性的危害：可引起女性 性早熟、生殖器官畸形和癌變,這一效應(yīng)在其女性后代中表現(xiàn)更顯著。tā)動(dòng)物的危害,雌性激素的污染對(duì)人類之外的其他動(dòng)物,同樣有著嚴(yán)重的影響。,第二十頁(yè)，共六十七頁(yè)。xīn),除去浮在上層的脂肪。 由于酶解反應(yīng)較慢,為保證水解完全,可在較高的溫度下來(lái)加速水解或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。qǔ)皮質(zhì)激素,在一定的pH值條件下,一般用有機(jī)溶劑對(duì)樣品提取(t237。 乙酸乙酯提取動(dòng)物組織中的氫化波尼松、氟強(qiáng)的松龍、氟羥強(qiáng)的松龍、倍他米松,牛奶中的甲基強(qiáng)的松龍，牛奶中的氫化波尼松和地塞米松。qǔ),甲醇提取牛肉組織中的5種皮質(zhì)激素。 丙酮提取動(dòng)物肝臟(腎臟(sh232。,第二十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。 凈化方法(fāngfǎ)包括液液萃取、固相萃取、免疫親和色譜及柱切換技術(shù)等。,第二十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。),可以除去堿性和酸性的水溶性雜質(zhì)。,氟強(qiáng)的松龍?zhí)崛∫赫舭l(fā)至干后,依次用乙腈和正己烷,正己烷和水進(jìn)行液液萃取,最后用二氯甲烷提取。,第二十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。 固相萃取法克服了這一缺點(diǎn),且具有操作簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。,第二十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。 例如,用兩種抗體結(jié)合的免疫親和柱,可以分離純化肝、牛奶、尿樣和糞樣中9種皮質(zhì)激素。n)技術(shù),柱切換技術(shù)自動(dòng)化程度高,在線濃縮(n243。,超臨界CO2流體(li,（二）同化(t243。 半固體樣品(肌肉、肝、腎)在提取前需要均質(zhì)。qǔ),生物樣品中游離的類固醇激素可以用丙酮、乙醚、乙腈、堿性乙腈、四氫呋喃、叔丁基甲醚和氯仿(lǜ fǎnɡ)甲醇等有機(jī)溶劑提取。,第三十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。)溶液,由于合成類固醇常以酯制劑注入動(dòng)物,水解后使酯類釋放出游離的類固醇。),粗提取液的凈化方法包括液液萃取、固相萃取法、液相色譜、免疫親和色譜和超臨界流體色譜等。,液液萃取(cu236。ngc233。qǔ)法,柱層析采用氧化鋁、硅膠和Celite吸附劑,可有效分離分析物和內(nèi)源性雜質(zhì),已應(yīng)用于肉樣中七種類固醇的純化。 正相柱常用硅膠、氧化鋁、氰基型和氨基型吸附劑,反相柱常用C18和C8吸附劑。nh233。,第三十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。,第三十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。n hu224。 suān)美侖孕酮為中性、脂溶性的類固醇,固相萃取法對(duì)牛組織提取液中醋酸美侖孕酮的提取純化效果欠佳,故采用柱切換。,免疫(miǎny236。 免疫親和柱已應(yīng)用于生物樣品中己烯雄酚、雙烯雌酚和己烷雌酚的純化,以及肉和尿中去甲睪酮、睪酮和群勃龍的純化。tǐ)色譜法,超臨界流體萃取可以在低溫條件下獲得無(wú)溶劑的提取物,且快速,但從生物樣品中分離激素的研究目前還很少。,第四十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。 在超臨界流體萃取前后,還需要其他凈化方法加以處理。,第四十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。 早期(zǎoqī)采用苯肼硫酸溶液作顯色劑,后來(lái)采用其他一些顯色劑,如磷酸甲醇溶液、四唑藍(lán)、對(duì)甲苯磺酸和2,3,5三苯基2H四唑氯。,第四十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。 目前,GCMS得到了廣泛應(yīng)用。 zi)：,Delaha181。,⑴不同(b249?！▂232。,⑵不同提取(t237。,肝臟樣液過(guò)C18固相萃取柱后,依次(yīc236。 Courtheyn等對(duì)氯鉻酸吡啶氧化法作了改進(jìn),簡(jiǎn)化了樣品前處理步驟,采用負(fù)離子化學(xué)電離GCMS法測(cè)定尿液和糞便中地塞米松含量,以二氟美松作內(nèi)標(biāo),測(cè)定結(jié)果與酶聯(lián)免疫法一致,該方法檢測(cè)限0.1181。 由于皮質(zhì)激素有較強(qiáng)的紫外吸收,因此紫外檢測(cè)法常被廣泛采用,檢測(cè)波長(zhǎng)一般設(shè)在254nm。ng),例如,LCAPCIMS對(duì)牛組織中地塞米松的鑒別測(cè)定。)。 Schild采用RPHPLC測(cè)定血漿中的地塞米松。 Van de Hauwe等報(bào)道了電噴霧電離LCMS/MS法測(cè)定牛組織(zǔzhī)中地塞米松和二氟美松殘留量。,（二）同化(t243。,薄層(b225。 為了提高薄層色譜分析的靈敏度和選擇性,在顯色劑研究上做了大量的工作(gōngzu242。,第五十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。 目前,GCMS已成為同化激素殘留分析中普遍(pǔbi224。,同化激素及其代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)羥基或酮基等極性基團(tuán),為高極性、難揮發(fā)、熱穩(wěn)定差的化合物,GC法難以直接分析,因此需衍生化使形成易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性好的衍生物,以提高其色譜性能(x236。,第五十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。 suān)氯地孕酮、醋酸(c249。,第五十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,第六十頁(yè)，共六十七頁(yè)。 雌性激素的分析： 分析極性較大的雌激素結(jié)合物常采用陰離子交換色譜法或反相離子對(duì)色譜法,尤其是后者分離效果更好。,此外,雌二醇和雌三醇還具有天然熒光。 將激素進(jìn)行化學(xué)衍生化后可采用熒光檢測(cè)或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。 動(dòng)物組織中的玉米赤霉醇和己烯雌酚的殘留量通常(tōngch225。,雄性激素的HPLC分析(fēnxī)：,RPHPLC和NPHPLC均被用于雄激素的分析。g/kg級(jí),且甲睪酮代謝物的分子結(jié)構(gòu)中無(wú)生色團(tuán),無(wú)法利用紫外檢測(cè),有報(bào)道采用柱后固定化酶衍生化結(jié)合熒光檢測(cè)的方法(fāngfǎ),其定量限為1181。,Lagana等報(bào)道LC法檢測(cè)雞肉、牛肉和牛肝中9種同化激素(群勃龍、睪酮、孕酮、雌二醇、己烯雌酚、左環(huán)十四酮酚、玉米(y249。 Andresen等報(bào)道了LC法測(cè)定脂肪中醋酸美侖孕酮、醋酸甲地孕酮和醋酸氯地孕酮的殘留量。,Fang等報(bào)道了LCMS/MS法測(cè)定雞和兔肝中玉米赤霉醇?xì)埩袅俊?內(nèi)容(n232。作用與黃體酮相似,孕激素活性強(qiáng),無(wú)雌激素和雄激素活性,有抗雌激素作用