【正文】 長繁殖(f225。iyǎng)技術(shù),第二十二頁，共六十八頁。i)（按用途分）,第二十三頁，共六十八頁。ng)與培養(yǎng)技術(shù),液體(y232。 半固體培養(yǎng)基：含0.2％～0.5％瓊脂，用于觀察細菌的動力。iyǎng)技術(shù),第二十六頁，共六十八頁。,（一）無菌技術(shù)(j236。jūn)接種與培養(yǎng)技術(shù),二、細菌接種與培養(yǎng)技術(shù),第二十八頁，共六十八頁。ng)環(huán)（針）—冷卻—挑取標本（細菌）—接種—滅菌接種環(huán)（針）,平板劃線法,分區(qū)劃線,連續(xù)劃線,第二十九頁，共六十八頁。,連續(xù)(li225。,斜面(xi233。tǐ)接種,第二節(jié) 細菌接種與培養(yǎng)技術(shù),第三十二頁，共六十八頁。 t224。jūn)的生長現(xiàn)象,第二節(jié) 細菌接種(jiēzh242。tǐ)培養(yǎng)基中生長現(xiàn)象,第二節(jié) 細菌(x236。,一、碳水化合物的代謝(d224。nɡ)→丙酮酸→酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)氣) →pH↓ →呈酸性變色(或出現(xiàn)氣泡) 方法： 將待檢細菌以無菌操作接種到糖發(fā)酵管中，置35℃溫箱培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。)試驗,第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。,甲基紅試驗(sh236。ngxi224。,結(jié) 果,第三十八頁，共六十八頁。nd236。,方法：把待檢細菌接種在葡萄糖蛋白胨水中，35℃培養(yǎng)18~24h后，按每毫升培養(yǎng)液加入0.1ml含2％肌酸或肌酐的40％KOH溶液,數(shù)分鐘或數(shù)小時后觀察結(jié)果。n)（ONPG）,第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。,七葉(qī y232。,方法：將待檢細菌接種到七葉苷培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察結(jié)果，培養(yǎng)基變黑色者為陽性，培養(yǎng)基不變色為陰性。),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。ng)，生成玫瑰靛基質(zhì)， 是為靛基質(zhì)試驗陽性。ixi232。,方法：將細菌穿刺接種到醋酸鉛培養(yǎng)基中， 35℃、18～24h，觀察結(jié)果。),第三節(jié) 細菌生化(shēnɡ hu224。,二、蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝(d224。ngch233。,結(jié) 果,苯丙氨酸脫氨酶試驗, +,第四十五頁，共六十八頁。)鑒定技術(shù),原理：有的細菌能利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一(w233。,四、酶類試驗(sh236。,方法：取潔凈濾紙條，粘取被檢細菌菌落，滴加氧化酶試劑1滴于菌落上。,四、酶類試驗(sh236。ng)技術(shù),原理：細菌產(chǎn)生的觸酶（過氧化氫酶）能催化過氧化氫放出(f224。,結(jié) 果,觸酶試驗,+ ,第四十八頁，共六十八頁。nd236。i)原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白(xiān w233。,方法：于3支試管中分別加入1:4稀釋的血漿0.5ml，1支管加入待檢菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml,另兩支分別加陰陽性對照菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml，35℃培養(yǎng)3～4h后觀察結(jié)果。n),第三節(jié) 細菌生化鑒定(ji224。)酶，使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白。,四、酶類試驗(sh236。 suān)作用，生成亞硝酸，亞硝酸與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再與α萘胺結(jié)合，生成Nα萘胺偶氮苯磺酸(紅色化合物)。若加鋅粉后出現(xiàn)紅色，說明鋅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，而待檢細菌無還原硝酸鹽的能力，硝酸鹽還原試驗為陰性。)為陽性 無色為陰性,四、酶類試驗(sh236。,四、酶類試驗(sh236。nlǐ)： B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進金黃色葡萄球菌β溶血素活性。35℃孵育18～24h。)鑒定技術(shù),原理：KIA瓊脂中含有牛肉(ni但連續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后，在細菌和氧的作用下，培養(yǎng)基的斜面所含氨基酸發(fā)生降解，釋放氨類，立即中和斜面部分的酸，培養(yǎng)18～24小時后，整個斜面轉(zhuǎn)變成堿性，斜面又變成紅色。若細菌能分解培養(yǎng)基中含硫氨基酸，則可產(chǎn)生H2S，H2S與培養(yǎng)基中枸櫞酸銨鐵起反應(yīng)，產(chǎn)生不溶性的黑色硫化亞鐵沉淀。)鑒定技術(shù),方法： 用接種針挑取待檢細菌(x236。如沙門菌、普通變形桿菌。h233。n)結(jié)果,第五十六頁，共六十八頁。ng)培養(yǎng)系統(tǒng) （一）自動血培養(yǎng)檢測系統(tǒng) 基本原理 （1）放射性物質(zhì)標記法 一般采用放射性碳14標記法：細菌生長時利用標記底物產(chǎn)生含14C的CO2，當14C標記的CO2量超過界限時，檢測器報告陽性生長。,第五十七頁，共六十八頁。儀器均配置電腦，在電腦上可設(shè)置培養(yǎng)時間、溫度等參數(shù)，顯示陽性或陰性瓶所在的位置，及自動分析。住院患者出現(xiàn)發(fā)熱等敗血癥癥狀時，應(yīng)及時采血，盡可能在使用抗生素前采血。,第四節(jié) 微生物檢驗(jiǎny224。使用真空采血系統(tǒng)，利用配套的一次性使用的無菌采血管，血液因負壓作用進入培養(yǎng)瓶中。,第五十九頁，共六十八頁。 r249。)培養(yǎng)瓶，否則會導(dǎo)致假陽性結(jié)果。ibiǎo)一個細菌種或一個細菌生物型。,4．解釋(jiěsh236。,第四節(jié) 微生物檢驗(jiǎny224。q236。 （2）添加試劑：有些試驗經(jīng)孵育后需添加試劑才能呈現(xiàn)顏色變化。,第四節(jié) 微生物檢驗(jiǎny224。經(jīng)數(shù)小時孵育后，每隔一定時間自動測定每一藥敏試驗孔中細菌生長(shēngzhǎng)情況，與細菌生長(shēngzhǎng)對照孔的結(jié)果進行比較計算出生長(shēngzhǎng)率。n)的自動化和微型化,（二）儀器的基本結(jié)構(gòu)和配套試劑 微生物自動鑒定系統(tǒng)大多與藥敏試驗系統(tǒng)組合在一起，藥敏試驗系統(tǒng)常配備計算機專家系統(tǒng)。) 3.檢驗信息系統(tǒng)的應(yīng)用,第六十五頁，共六十八頁。nd236。,方法：抗原檢測和抗體檢測,檢測抗原方法包括：凝集反應(yīng)、熒光免疫顯微技術(shù)、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析等。nd236。jūn)能力的試驗，有些藥敏試驗亦可用于鑒定某些細菌(x236。,內(nèi)容(n232。ngzhī)，用于觀察細菌的動力。原理：某些細菌具有氧化酶（細胞色素氧化酶），能將二甲基對苯二胺或四甲基對苯二胺氧化生成紅色的醌類化合