【正文】 長(zhǎng)繁殖(f225。iyǎng)技術(shù),第二十二頁(yè)，共六十八頁(yè)。i)（按用途分）,第二十三頁(yè)，共六十八頁(yè)。ng)與培養(yǎng)技術(shù),液體(y232。 半固體培養(yǎng)基：含0.2％～0.5％瓊脂，用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力。iyǎng)技術(shù),第二十六頁(yè)，共六十八頁(yè)。,（一）無(wú)菌技術(shù)(j236。jūn)接種與培養(yǎng)技術(shù),二、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù),第二十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。ng)環(huán)（針）—冷卻—挑取標(biāo)本（細(xì)菌）—接種—滅菌接種環(huán)（針）,平板劃線法,分區(qū)劃線,連續(xù)劃線,第二十九頁(yè)，共六十八頁(yè)。,連續(xù)(li225。,斜面(xi233。tǐ)接種,第二節(jié) 細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù),第三十二頁(yè)，共六十八頁(yè)。 t224。jūn)的生長(zhǎng)現(xiàn)象,第二節(jié) 細(xì)菌接種(jiēzh242。tǐ)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)現(xiàn)象,第二節(jié) 細(xì)菌(x236。,一、碳水化合物的代謝(d224。nɡ)→丙酮酸→酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)氣) →pH↓ →呈酸性變色(或出現(xiàn)氣泡) 方法： 將待檢細(xì)菌以無(wú)菌操作接種到糖發(fā)酵管中，置35℃溫箱培養(yǎng)18～24h，觀察結(jié)果。)試驗(yàn),第三節(jié) 細(xì)菌生化(shēnɡ hu224。,甲基紅試驗(yàn)(sh236。ngxi224。,結(jié) 果,第三十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。nd236。,方法：把待檢細(xì)菌接種在葡萄糖蛋白胨水中，35℃培養(yǎng)18~24h后，按每毫升培養(yǎng)液加入0.1ml含2％肌酸或肌酐的40％KOH溶液,數(shù)分鐘或數(shù)小時(shí)后觀察結(jié)果。n)（ONPG）,第三節(jié) 細(xì)菌生化(shēnɡ hu224。,七葉(qī y232。,方法：將待檢細(xì)菌接種到七葉苷培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察結(jié)果，培養(yǎng)基變黑色者為陽(yáng)性，培養(yǎng)基不變色為陰性。),第三節(jié) 細(xì)菌生化鑒定(ji224。ng)，生成玫瑰靛基質(zhì)， 是為靛基質(zhì)試驗(yàn)陽(yáng)性。ixi232。,方法：將細(xì)菌穿刺接種到醋酸鉛培養(yǎng)基中， 35℃、18～24h，觀察結(jié)果。),第三節(jié) 細(xì)菌生化(shēnɡ hu224。,二、蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝(d224。ngch233。,結(jié) 果,苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn), +,第四十五頁(yè)，共六十八頁(yè)。)鑒定技術(shù),原理：有的細(xì)菌能利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一(w233。,四、酶類試驗(yàn)(sh236。,方法：取潔凈濾紙條，粘取被檢細(xì)菌菌落，滴加氧化酶試劑1滴于菌落上。,四、酶類試驗(yàn)(sh236。ng)技術(shù),原理：細(xì)菌產(chǎn)生的觸酶（過(guò)氧化氫酶）能催化過(guò)氧化氫放出(f224。,結(jié) 果,觸酶試驗(yàn),+ ,第四十八頁(yè)，共六十八頁(yè)。nd236。i)原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白(xiān w233。,方法：于3支試管中分別加入1:4稀釋的血漿0.5ml，1支管加入待檢菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml,另兩支分別加陰陽(yáng)性對(duì)照菌肉湯培養(yǎng)物0.5ml，35℃培養(yǎng)3～4h后觀察結(jié)果。n),第三節(jié) 細(xì)菌生化鑒定(ji224。)酶，使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白。,四、酶類試驗(yàn)(sh236。 suān)作用，生成亞硝酸，亞硝酸與試劑中的對(duì)氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再與α萘胺結(jié)合，生成Nα萘胺偶氮苯磺酸(紅色化合物)。若加鋅粉后出現(xiàn)紅色，說(shuō)明鋅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，而待檢細(xì)菌無(wú)還原硝酸鹽的能力，硝酸鹽還原試驗(yàn)為陰性。)為陽(yáng)性 無(wú)色為陰性,四、酶類試驗(yàn)(sh236。,四、酶類試驗(yàn)(sh236。nlǐ)： B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進(jìn)金黃色葡萄球菌β溶血素活性。35℃孵育18～24h。)鑒定技術(shù),原理：KIA瓊脂中含有牛肉(ni但連續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時(shí)后，在細(xì)菌和氧的作用下，培養(yǎng)基的斜面所含氨基酸發(fā)生降解，釋放氨類，立即中和斜面部分的酸，培養(yǎng)18～24小時(shí)后，整個(gè)斜面轉(zhuǎn)變成堿性，斜面又變成紅色。若細(xì)菌能分解培養(yǎng)基中含硫氨基酸，則可產(chǎn)生H2S，H2S與培養(yǎng)基中枸櫞酸銨鐵起反應(yīng)，產(chǎn)生不溶性的黑色硫化亞鐵沉淀。)鑒定技術(shù),方法： 用接種針挑取待檢細(xì)菌(x236。如沙門菌、普通變形桿菌。h233。n)結(jié)果,第五十六頁(yè)，共六十八頁(yè)。ng)培養(yǎng)系統(tǒng) （一）自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng) 基本原理 （1）放射性物質(zhì)標(biāo)記法 一般采用放射性碳14標(biāo)記法：細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)利用標(biāo)記底物產(chǎn)生含14C的CO2，當(dāng)14C標(biāo)記的CO2量超過(guò)界限時(shí)，檢測(cè)器報(bào)告陽(yáng)性生長(zhǎng)。,第五十七頁(yè)，共六十八頁(yè)。儀器均配置電腦，在電腦上可設(shè)置培養(yǎng)時(shí)間、溫度等參數(shù)，顯示陽(yáng)性或陰性瓶所在的位置，及自動(dòng)分析。住院患者出現(xiàn)發(fā)熱等敗血癥癥狀時(shí)，應(yīng)及時(shí)采血，盡可能在使用抗生素前采血。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。使用真空采血系統(tǒng)，利用配套的一次性使用的無(wú)菌采血管，血液因負(fù)壓作用進(jìn)入培養(yǎng)瓶中。,第五十九頁(yè)，共六十八頁(yè)。 r249。)培養(yǎng)瓶，否則會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。ibiǎo)一個(gè)細(xì)菌種或一個(gè)細(xì)菌生物型。,4．解釋(jiěsh236。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。q236。 （2）添加試劑：有些試驗(yàn)經(jīng)孵育后需添加試劑才能呈現(xiàn)顏色變化。,第四節(jié) 微生物檢驗(yàn)(jiǎny224。經(jīng)數(shù)小時(shí)孵育后，每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定每一藥敏試驗(yàn)孔中細(xì)菌生長(zhǎng)(shēngzhǎng)情況，與細(xì)菌生長(zhǎng)(shēngzhǎng)對(duì)照孔的結(jié)果進(jìn)行比較計(jì)算出生長(zhǎng)(shēngzhǎng)率。n)的自動(dòng)化和微型化,（二）儀器的基本結(jié)構(gòu)和配套試劑 微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)大多與藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)組合在一起，藥敏試驗(yàn)系統(tǒng)常配備計(jì)算機(jī)專家系統(tǒng)。) 3.檢驗(yàn)信息系統(tǒng)的應(yīng)用,第六十五頁(yè)，共六十八頁(yè)。nd236。,方法：抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè),檢測(cè)抗原方法包括：凝集反應(yīng)、熒光免疫顯微技術(shù)、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析等。nd236。jūn)能力的試驗(yàn)，有些藥敏試驗(yàn)亦可用于鑒定某些細(xì)菌(x236。,內(nèi)容(n232。ngzhī)，用于觀察細(xì)菌的動(dòng)力。原理：某些細(xì)菌具有氧化酶（細(xì)胞色素氧化酶），能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化生成紅色的醌類化合