20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五章-抗-體-制-藥-預(yù)覽頁
【正文】 液凍存。,單克隆抗體(k224。,動物體內(nèi)誘生法制備的McAb純化的一般程序： （1）澄清和沉淀處理： a.1000g 離心5min，去除沉淀物（紅細(xì)胞、細(xì)胞碎塊、纖維蛋白凝塊和脂質(zhì)） b.20 000g 高速離心30min ,去除殘留的小顆粒物質(zhì) c.用0.2 181。常用SephadexG 200 作為分離介質(zhì)，可收集到3個峰，最高峰為IgM，另外(l236。 B、陰離子交換層析：用于IgG類的分離純化。適用于IgG類。,第二十二頁，共六十九頁。 原理：抗體同抗原結(jié)合的功能決定于抗體分子的可變區(qū)（V），同種性免疫源性則決定于抗體分子的穩(wěn)定區(qū)（C）。,第二十六頁，共六十九頁。li232。抗體分子中鼠源部分只占很小比例，可基本消除免疫源性。,雙功能抗體：雙特異性抗體(bispecific antibody,BsAb)。j236。ng)抗體和抗體工程,抗體研究的三個階段： ①以1890年Behring發(fā)現(xiàn)白喉抗毒素為代表，其特點是用抗原免疫動物來獲得多克隆抗體； ②以1975年K246。他創(chuàng)建了噬菌體抗體庫（Repertoire of antibodies displayed on phages）技術(shù),克服了人體不能隨意免疫的缺點，用人外周血制備抗體文庫，從而獲得人源性基因工程抗體。,第三十二頁，共六十九頁。,Western Blotting免疫(miǎny236。)硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。,二、噬菌體抗體庫技術(shù)的特點 模擬天然全套抗體庫：抗體文庫可以達(dá)到或超過1011庫容，所以能包含B細(xì)胞全部克隆。 避開了人工免疫和雜交瘤技術(shù)：由于抗體庫的大容量和極高的篩選效率，使得可以調(diào)出任意抗體基因，用基因工程方法制備抗體，因而能避免(b236。,第三十八頁，共六十九頁。,抗體診斷(zhěndu224。在體外，由于抗原性狀和反應(yīng)條件不同，可發(fā)生凝集或沉淀等可見反應(yīng)，故可用已知抗體來鑒定抗原，做病原學(xué)診斷和血型測定，稱為血清學(xué)鑒定。,血清學(xué)鑒定用的抗體類試劑 （1）鑒定病原菌用的抗體試劑 A、常用診斷血清的品種和用途 B、診斷血清的制備步驟 a、制備細(xì)菌(x236。 免疫途徑：靜脈、腹腔、皮下。,（2）乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 的反向被動血凝診斷試劑 A、試劑制備原理：紅細(xì)胞經(jīng)甲醛處理后，在酸性條件下能吸附蛋白質(zhì)，當(dāng)純化的抗HBs血清吸附其上時便具有抗體活性，若待測樣品中存在(c C、診斷方法：RPHA（reverse passive hemagglutination)反向被動血凝試驗，即用純化的抗體致敏醛化血細(xì)胞測定相應(yīng)抗原 在V型血凝板上進(jìn)行，陰性樣品不凝集，血細(xì)胞沉積于V型孔底部，呈尖點狀；陽性樣品血細(xì)胞凝集成塊狀。i y249。,免疫標(biāo)記技術(shù)用的抗體類試劑 給抗體標(biāo)記(biāoj236。 （1）熒光抗體診斷試劑：熒光抗體是用熒光色素,如異硫氰酸熒光素（FITC）、羅丹明（RB200）、藻紅素（PE）等標(biāo)記抗體蛋白，即成熒光抗體。,第五十二頁，共六十九頁。能測出ng/ml，甚至pg/ml水平的微量抗原物質(zhì)。) 由于腫瘤的特異性小分子抗體尚在研究之中，所以導(dǎo)向藥物還未在臨床廣泛應(yīng)用。li225。 目前的客觀現(xiàn)實是：研究進(jìn)展迅速，但未達(dá)到常規(guī)治療的應(yīng)用階段。,（一）.放射性核素標(biāo)記的抗體治療(zh236。ow249。,第六十頁，共六十九頁。,第六十二頁，共六十九頁。正常成人的CD4細(xì)胞在每立方毫米500個到1600個，艾滋病病毒感染者的CD4細(xì)胞出現(xiàn)進(jìn)行性或不規(guī)則性下降，標(biāo)志著免疫系統(tǒng)受到嚴(yán)重?fù)p害(sǔnh224。,第六十四頁，共六十九頁。,第六十六頁，共六十九頁。i)的一般流程 3.如何改造鼠源性單抗 4.簡述McAb制備的兩種方法（體外培養(yǎng)和體內(nèi)誘生） 5.簡述抗體研究的三個階段 6.噬菌體抗體庫的特點 7.什么叫抗體診斷試劑 8.抗體診斷藥物分幾類 9.免疫標(biāo)記類抗體試劑有哪些 10.簡單介紹抗體治療藥物,第六十八頁，共六十九頁?？贵w指能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。建庫的外源基因來自人體外周血、骨髓或脾臟的淋巴細(xì)胞提取的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的cDNA擴增，這是人體多克隆細(xì)胞的總mRN
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