【正文】
的獲得 二、重組載體的構建 三、重組載體的導入和篩選 探究 2:基因工程的一般程序是怎樣的? 四、目的基因的表達和鑒定 目的基因: 基本操作步驟 一、 目的基因的獲得 在基因操作中使用的外源基因。 DNA連接酶與 DNA聚合酶比較有何異同? 三、基因運輸車: _______ 載體必須具備的條件? 常用的載體有: ________ 溫故知新 原核 特定 回文 特異性位點 磷酸二酯鍵 限制性內切酶 DNA連接酶 載體 磷酸二酯鍵 質粒 黏性末端 下圖為 DNA分子的切割和連接過程。coli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 二、基因縫紉針: DNA連接酶 G C T T A A A A T T C G 二、基因縫紉針: DNA連接酶 連接酶的部位: 磷酸二酯鍵,不是氫鍵 G C T T A A A A T T C G 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 重組DNA 二、基因縫紉針: DNA連接酶 DNA連接酶與 DNA聚合酶比較 DNA聚合酶 DNA連接酶 相同 不同 作用對象 模板 形成磷酸二酯鍵 單個脫氧核苷酸 DNA片斷 需 要 不需要 ( 1)能夠在宿主細胞中 復制并穩(wěn)定地保存 ; ( 2)具有 多個限制酶切點 ,以便與外源基因連接; ( 3)具有某些 標記基因 ,便于進篩選運載體是否進入受體細胞。 問:該 DNA分子有何特點?限制性內切酶 Ⅰ 有幾個酶切位點?限制性內切酶 Ⅱ 有幾個酶切位點? 該 DNA為環(huán)狀 1個 2個 GAATTC CTTAAG GAATTC CTTAAG G AATTC CTTAA G G AATTC CTTAA G G CTTAA AATTC G 雙鏈斷開 不同來源的 DNA片段結合 種類: E 讓細菌的毒蛋白基因在棉花細胞中表達,可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。第一節(jié) 基因工程的原理 乳汁中含有人生長激素的轉基因牛 (阿根廷 ) 基因工程的概念 基因工程的別名 基因拼接技術或 DNA重組技術 操作環(huán)境 操作對象 操作水平 基本過程 結果 基因工程是指 按照人們的愿望 ,將一種生物的 基因 在 體外剪切 ,并與特殊的運載工具進行 拼接 ,然后 導入 另一種生物體內進行擴增,并使之 表達 產生所需蛋白質的技術。 雙重抗性大腸桿菌 轉基因抗蟲棉 抗蟲棉 普通棉 問題探討: 蘇云金芽孢桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。 作用實質: 特定部位的 磷酸二酯鍵 ( 酶切位點 )斷開 A B 限制酶作用是 A處還是 B處? A處 T 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 思考: 某 DNA分子被限制性內