《基因工程的原理》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 的獲得 二、重組載體的構(gòu)建 三、重組載體的導(dǎo)入和篩選 探究 2：基因工程的一般程序是怎樣的？ 四、目的基因的表達(dá)和鑒定 目的基因： 基本操作步驟 一、 目的基因的獲得 在基因操作中使用的外源基因。 DNA連接酶與 DNA聚合酶比較有何異同？ 三、基因運(yùn)輸車： _______ 載體必須具備的條件？ 常用的載體有： ________ 溫故知新 原核 特定 回文 特異性位點(diǎn) 磷酸二酯鍵 限制性內(nèi)切酶 DNA連接酶 載體 磷酸二酯鍵 質(zhì)粒 黏性末端 下圖為 DNA分子的切割和連接過程。coli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 二、基因縫紉針： DNA連接酶 G C T T A A A A T T C G 二、基因縫紉針： DNA連接酶 連接酶的部位： 磷酸二酯鍵，不是氫鍵 G C T T A A A A T T C G 磷酸二酯鍵 磷酸二酯鍵 重組DNA 二、基因縫紉針： DNA連接酶 DNA連接酶與 DNA聚合酶比較 DNA聚合酶 DNA連接酶 相同 不同 作用對象 模板 形成磷酸二酯鍵 單個(gè)脫氧核苷酸 DNA片斷 需 要 不需要 （ 1）能夠在宿主細(xì)胞中 復(fù)制并穩(wěn)定地保存 ； （ 2）具有 多個(gè)限制酶切點(diǎn) ，以便與外源基因連接； （ 3）具有某些 標(biāo)記基因 ，便于進(jìn)篩選運(yùn)載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞。 問：該 DNA分子有何特點(diǎn)？限制性內(nèi)切酶 Ⅰ 有幾個(gè)酶切位點(diǎn)？限制性內(nèi)切酶 Ⅱ 有幾個(gè)酶切位點(diǎn)？ 該 DNA為環(huán)狀 1個(gè) 2個(gè) GAATTC CTTAAG GAATTC CTTAAG G AATTC CTTAA G G AATTC CTTAA G G CTTAA AATTC G 雙鏈斷開 不同來源的 DNA片段結(jié)合 種類： E 讓細(xì)菌的毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中表達(dá)，可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。第一節(jié) 基因工程的原理 乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛 (阿根廷 ) 基因工程的概念 基因工程的別名 基因拼接技術(shù)或 DNA重組技術(shù) 操作環(huán)境 操作對象 操作水平 基本過程 結(jié)果 基因工程是指 按照人們的愿望 ，將一種生物的 基因 在 體外剪切 ，并與特殊的運(yùn)載工具進(jìn)行 拼接 ，然后 導(dǎo)入 另一種生物體內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增，并使之 表達(dá) 產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù)。 雙重抗性大腸桿菌 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉 抗蟲棉 普通棉 問題探討： 蘇云金芽孢桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。 作用實(shí)質(zhì)： 特定部位的 磷酸二酯鍵 （ 酶切位點(diǎn) ）斷開 A B 限制酶作用是 A處還是 B處？ A處 T 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 思考： 某 DNA分子被限制性內(nèi)
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