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基因工程原理楊紅final-全文預覽

2024-10-04 20:44 上一頁面

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【正文】 因,其 cDNA文庫應為:500500/3500=143個克隆; —— 豐度為 14拷貝 /細胞的基因,其 cDNA文庫應為:500500/14=35750個克??; N: cDNA基因組文庫必需的克隆數(shù)目 P:文庫中目的基因出現(xiàn)的概率( 99%) f: mRNA豐度與總 mRNA比值 ? 實際 cDNA基因文庫大小: N=ln( 1P) / ln( 1f) 例如,豐度 3500時, N是 650個。 沉淀細胞 ——裂解細胞 ——離心去殘渣 ——上清液除蛋白 ——沉淀 RNA。 1. cDNA文庫的概念 ——某種生物基因組轉錄的部分或全部 mRNA經(jīng)反轉錄產(chǎn)生的各種 cDNA片段分別與克隆載體重組,貯存在一種受體菌群體中,這個群體叫 cDNA文庫 。 基因組文庫的克隆數(shù)目 = 基因組 DNA總長 DNA插入片段的平均長 例如:某生物基因組的 總長 3 106kb,酶切后 DNA平均長 15kb,則其基因組文庫的克隆子數(shù)為: 3 106kb/ 15kb=2 105個 一、原核生物基因組文庫的構建 ? 1976年, Clark等提出估算克隆子數(shù)的公式。 第二節(jié) 基因組文庫 基因組文庫( DNA文庫) :某種生物的基因組 DNA通過克隆載體儲存在一個受體菌的群體之中,這個群體即為這種生物的 DNA文庫?;蚬こ淘? Principle of Gene Engineering 楊紅 第一章 第一節(jié) 基因工程原理 Liaoning Normal University LNNU 第四章 第四章 目的基因的分離與修飾 第一節(jié)基因的基本結構特征 第二節(jié) 基因組文庫 第三節(jié) 目的基因的分離與制備 第四節(jié) 基因突變與修飾 第一章 第一節(jié) 基因工程原理 一個能轉錄、翻譯的結構基因依次包括: 轉錄啟動區(qū) 核糖體識別區(qū) 編碼區(qū) 轉錄終止區(qū) 起始密碼子 ATG 開放閱讀框 終止密碼子( TAG、TAA、 TGA) 第一節(jié) 基因的基本結構特征 一、原核生物基因的組成 基因區(qū) 啟動區(qū) SD區(qū) 轉錄終止子和終止因子 原核生物基因啟動區(qū)的結構 乳糖操縱子模型 二、真核生物基因的組成 基因區(qū) 轉錄啟動區(qū) 轉錄區(qū) 三、其它基因組的基因組成 編碼區(qū) 啟動子 終止子 質粒基因 病毒(噬菌體)基因:多順反子、重疊基因、內(nèi)含子 線粒體基因:多順反子 葉綠體基因:多順反子 四、基因的排列 重疊基因 :是指兩個或兩個以上的基因共有一段 DNA序列,或是指一段 DNA序列成為兩個或兩個以上基因的組成部分。尤指在 B細胞分化過程中抗體基因的重排及 T細胞抗原受體基因的重排,是基因差別表達的一種調控方式。 1. 基因組文庫的大小 ——是指文庫中的克隆子數(shù)
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