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《基因工程相關(guān)技術(shù)》ppt課件-全文預(yù)覽

2024-10-04 18:27 上一頁面

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【正文】 in,以使最后殘留的痕量培養(yǎng)液流盡 50 40 30 20 50 40 30 20 50 40 30 20 50 40 30 20 離心 Your pany slogan LOGO 5. 以 10ml用冰預(yù)冷的 CaCl2重懸每份沉淀,放于冰上 , 4℃ 4000轉(zhuǎn) /分離心 10min,回收細(xì)菌細(xì)胞; 6 .每 50ml初始培養(yǎng)物用 2ml冰預(yù)冷的 CaCl2 (內(nèi)含15%甘油 )重懸每份沉定,此時,可以迅速將細(xì)胞分裝成小份,液氮中冰凍, 70℃ 貯存?zhèn)溆谩? ?( 4)加樣時樣品不能超出凹形樣品槽。 Your pany slogan LOGO 本章內(nèi)容 ?核酸的瓊脂糖凝膠電泳 ?聚丙烯酰胺凝膠電泳 ?瓊脂糖凝膠 DNA片段的回收 ?感受態(tài)大腸桿菌的制備 Your pany slogan LOGO 聚丙烯酰胺 凝膠電泳 Your pany slogan LOGO PAGE原理 Acr(單體丙烯酰胺 ) Bis(交聯(lián)劑 ) TEMED(加速劑 ) AP(催化劑過硫酸銨 ) 以此凝膠為支持物的電泳稱PAGE。注意太多的 DNA上樣量可能導(dǎo)致 DNA帶型模糊,而太小的DNA上樣量則導(dǎo)致帶信號弱甚至缺失。特別是電壓太大可能導(dǎo)致小片段跑出膠而出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象 Your pany slogan LOGO DNA樣品的純度和狀態(tài) ?注意樣品中含鹽量太高和含雜質(zhì)蛋白均可以產(chǎn)生條帶模糊和條帶缺失的現(xiàn)象。 電 泳 緩 沖液配制 Your pany slogan LOGO 正確選擇凝膠濃度 ?濃度通常在 ~ 2%之間,低濃度的用來進(jìn)行大片段核酸的電泳,高濃度的用來進(jìn)行小片段分析。第五章 : 基因工程基本技術(shù) 主 講教師 : 楊應(yīng)斌 答疑 電話 : 13667665876 Email: 基因工程 概論 Your pany slogan LOGO 酶切 目的基因 載體 M 瓊 脂糖凝 膠 回收技 術(shù) 目的基因 線性載體 連接反應(yīng) 感受態(tài)大 腸桿菌 轉(zhuǎn)
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