綜合性設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)-3-全文預(yù)覽
【正文】 ，白蛋白下降較急性肝炎顯著。 4. 染色：通電完畢，鑷子取出，浸于氨基黑的染色液中 5分鐘，立即放入盛有漂洗液的培養(yǎng)皿中，反復(fù)漂洗數(shù)次，直至背景漂凈，濾紙吸干，不要太干。 醋酸纖維素薄膜的特性 實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng) 1. 膜的預(yù)處理：將薄膜切成 8cm，無(wú)光澤面向下，漂浮于巴比妥緩沖液面上，膜條自然浸濕下沉。 電泳的影響因素 血清蛋白醋酸纖維膜電泳 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 掌握醋酸纖維膜電泳的基本原理及其臨床意義 ? 熟悉電泳儀器的使用和操作 + 白蛋白 (A) α1 α2 β γ 血清蛋白的 pI大多在 ，在 ，并且蛋白質(zhì)的分子量、立體構(gòu)象、等電點(diǎn)以及形狀也有差異，在電場(chǎng)中遷移速度不同，可以在醋酸纖維薄膜上分離成 A、 α α β和 γ五條區(qū)帶。 ? 電滲：在電場(chǎng)中液體對(duì)固體支持物的相對(duì)移動(dòng)；當(dāng)電滲方向與電泳方向一致時(shí)，會(huì)加快顆粒泳動(dòng)速度，反之，當(dāng)兩者方向相反時(shí)，會(huì)減慢顆粒泳動(dòng)速度。 分子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。 甘露糖化修飾預(yù)測(cè) ： N位糖基化修飾預(yù)測(cè)： O位糖基化修飾預(yù)測(cè)： 豆蔻?；稽c(diǎn)預(yù)測(cè)： 乙?；稽c(diǎn)預(yù)測(cè)： 磷酸化位點(diǎn)預(yù)測(cè)： 以 NGAL蛋白為例的磷酸化修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果 電泳的含義 帶電的膠粒或大分子在外加電場(chǎng)中，向帶相反電荷的電極作定向移動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳。綜合性設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 3 ? 蛋白質(zhì)翻譯后修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè) ? 醋酸纖維薄膜電泳 聚丙烯酰胺等電聚焦電泳分離血紅蛋白和細(xì)胞色素 C ? 目標(biāo)蛋白的 2D電泳分離分析及其生物質(zhì)譜鑒定 此實(shí)驗(yàn)共包括如下三個(gè)部分 1. 第一部分，蛋白質(zhì)翻譯后修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè) 2. 第二部分，醋酸纖維薄膜電泳和等電聚焦電泳 3. 第三部分，目標(biāo)蛋白的 2D電泳分離分析及其生物質(zhì)譜鑒定 第一部分，蛋白質(zhì)翻譯后修飾位點(diǎn)預(yù)測(cè) ? 泛素化對(duì)于細(xì)胞分化與凋亡 、 DNA修復(fù) 、 免疫應(yīng)答和應(yīng)激反應(yīng)等生理過(guò)程起著重要作用； ? 磷酸化涉及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 、 神經(jīng)活動(dòng) 、 肌肉收縮以及細(xì)胞的增殖 、 發(fā)育和分化等生理病理過(guò)程； ? 糖基化在許多生物過(guò)程中如免疫保護(hù) 、 病毒的復(fù)制 、 細(xì)胞生長(zhǎng) 、 炎癥的產(chǎn)生等起著重要的作用； ? 脂基化對(duì)于生物體內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程起著非常關(guān)鍵的作用； ? 組蛋白上的甲基化和乙?；c轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)有關(guān) 。常見(jiàn)的蛋白質(zhì)翻譯后修飾過(guò)程有泛素化、磷酸化、糖基化、脂基化、甲基化和乙酰化等。 E q f qE gh n π 6 = = ? 待分離大分子的性質(zhì) ：所帶的電荷、分子大小和形狀。當(dāng)需要增大電場(chǎng)強(qiáng)度以縮短電泳時(shí)間時(shí)，需附有冷卻裝置。一般所用離子強(qiáng)度為 ～ 。 ? 醋酸纖維素薄膜經(jīng) 1,4－二氧
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