【正文】 Dimensional Electrophoresis， 2DE) 是蛋白質(zhì)組研究的三大關(guān)鍵核心技術(shù)之一 ( 另兩種是質(zhì)譜技術(shù)和蛋白質(zhì)組信息學(xué) ) 。 b. TEMED最后加，注意混勻。 ? 腎病綜合征時(shí)，白蛋白降低， α2 、 β球蛋白升高。 ? 緩沖液 pH和離子強(qiáng)度： pH值距離其等電點(diǎn)愈遠(yuǎn)，其所帶凈電荷量就越大，電泳的速度也就越大 ；但是 pH過(guò)高或過(guò)低引起蛋白變性，緩沖液通常要保持一定的離子強(qiáng)度；強(qiáng)度過(guò)低，則緩沖能力差，不易維持 PH恒定，離子強(qiáng)度過(guò)高，在待分離分子周?chē)纬奢^強(qiáng)的帶相反電荷的離子擴(kuò)散層（即離子氛），降低了蛋白質(zhì)的帶電量，使電泳速度減慢。 蛋白質(zhì)翻譯后修飾在生命體中具有十分重要的作用。 蛋白名稱(chēng) 等電點(diǎn) 分子量 白蛋白 69000 α α1： 20200 α2： 30000 β 90000150000 γ 156000300000 ? 醋酸纖維素（二乙酸纖維素）薄膜具有勻一的泡沫狀結(jié)構(gòu)，滲透性強(qiáng)，對(duì)分子移動(dòng)無(wú)阻力，用它作區(qū)帶電泳的支持物，具有用樣量少，分離清晰，無(wú)吸附作用。聚丙烯酰胺凝膠是由單體的丙烯酰（ Acrylamide,Acr）和甲叉雙丙烯酰胺（ N,Nmethylenebisacrylamide,Bis）在催化劑作用下聚合而成。l 總量 按下表配制聚丙烯酰胺凝膠 ? 用長(zhǎng)滴管汲取配置好的凝膠液，沿玻璃管傾斜緩慢注入到 7ml標(biāo)記平面，避免產(chǎn)生氣泡。 ? 用圖像掃描儀、萊賽密度儀、電荷組合裝置可把用上述方法得到的蛋白圖譜數(shù)字化，再經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)處理，去除縱向和橫向的曳尾以及背景底色，就可以給出所有蛋白斑點(diǎn)的準(zhǔn)確位置和強(qiáng)度， ? 蛋白質(zhì)組研究的重點(diǎn)是對(duì)用雙向凝膠電泳分離出來(lái)的蛋白，進(jìn)行定性和定量的分析。 ? 蛋白質(zhì)組學(xué)已成為當(dāng)今生物領(lǐng)域中極其活躍的學(xué)科。 ? 按下表配制聚丙烯酰胺凝膠，見(jiàn)下頁(yè) 注意事項(xiàng)： a. 按表中的順序加入試劑，并搖勻。 ? 肝硬化：白蛋白、 α α2球蛋白均明顯下降， γ球蛋白極度升高，甚至 A/G比值倒置。 ? 支持介質(zhì)的篩孔 ：篩孔越小，則顆粒在移動(dòng)的過(guò)程中所受到的阻力也就越大。它使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜，功能更為完善，調(diào)節(jié)更為精細(xì)，作用更為專(zhuān)一。目前可用于血清蛋白、脂蛋白、糖蛋白、酶的分離和免疫電泳等方面。 ? 聚丙烯酰胺凝膠的特點(diǎn)：機(jī)械彈度好、彈性大、透明、化學(xué)穩(wěn)定性高及無(wú)電滲等。 ? 立即用 5ml注射器針頭沿玻璃壁內(nèi)側(cè)面緩慢加入 ，加時(shí)貼近凝膠，盡量減少膠面與水相混和。 ? 質(zhì)譜（ Mass Spectrometry）是帶電原子、分子或分子碎片按質(zhì)荷比（或質(zhì)量）的大小順序排列的圖譜。 ? 2D電泳可用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后修飾研