高中生物同步課件：53 血紅蛋白的提取和分離（6）（人教版選修1）(文件)
【正文】 在支架上。 ④ 洗滌平衡： 裝填完畢后，立即用緩沖液洗脫瓶，在50cm高的操作壓下，用 300ml的 20mmol/l的 磷酸緩沖液（ pH為 ） 充分洗滌平衡 12小時(shí) 。 ② 滴加透析樣品 ： 吸管吸 1ml樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時(shí)，吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)加樣，同時(shí)注意不要破壞凝膠面。 （在分離過程中，如果紅色區(qū)帶均勻一致的移動(dòng)，說明色譜柱制作成功） 。 ④洗脫： 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口進(jìn)行洗脫。 不能發(fā)生洗脫液流干， 露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 注意： 凝膠裝填時(shí)盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。 ②透析目的： 除去樣品中分子量較小的雜質(zhì) 。 (3)分離血紅蛋白溶液： ① 過程： 將攪拌好混合液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，以 2020r/min的速度離心 10 min。 低速短時(shí)間 離心（速度越高和時(shí)間越長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果） 吸取血漿：上層透明的黃色血漿。 二、實(shí)驗(yàn)操作 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 ： （一）蛋白質(zhì)提取
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