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正文內(nèi)容

血紅蛋白的提取和分離(第1課時(shí))(文件)

 

【正文】 離步驟 (二)操作過(guò)程 本課題可選用豬、牛、羊或其他脊椎 動(dòng)物的血液來(lái)分離血紅蛋白 。 鹽水洗滌:用五倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為%的氯化鈉溶液洗滌。 ②試管中溶液層次: 第 1層(最上層):甲苯層( 無(wú)色透明 );第 2層( 中上層 ):脂溶性物質(zhì)沉淀層( 白色薄層固體); 第 3層(中下層):血紅蛋白的水溶液層( 紅色透明液體 );第 4層(最下層):雜質(zhì)沉淀層( 暗紅色 )。 透析過(guò)程動(dòng)畫(huà)演示 練習(xí)鞏固 隨著人類跨入蛋白質(zhì)組時(shí)代,對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用越來(lái)越深入,首先要做的一步是 A 弄清各種蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) B 弄清各種蛋白質(zhì)的功能 C 弄清各種蛋白質(zhì)的合成過(guò)程 D 獲得高純度的蛋白質(zhì) 用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過(guò)程中,關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述,正確的是 A 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程大于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) B 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程小于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) C 相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程等于相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) D 二者根本無(wú)法比較 : ( 1)凝膠色譜柱的制作: ① 取長(zhǎng) 40厘米,內(nèi)徑 , 兩端需用砂紙磨平。④組裝: 將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個(gè)整體 。 75表示凝膠的得水值,即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。注意: 凝膠裝填時(shí)盡量緊密,以降低凝膠顆粒之間的空隙。 不能發(fā)生洗脫液流干,露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 ④洗脫: 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度,連接緩沖液洗脫瓶,打開(kāi)下端出口進(jìn)行洗脫。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。 ACD 凝膠色譜柱取長(zhǎng)為 40 cm,內(nèi)徑為 1. 6 cm,有關(guān)說(shuō)法中,正確的是 (多選 ) A.一般凝膠色譜柱直徑的大小不影響分離的效果 B.凝膠色譜柱過(guò)高超過(guò) 1 m,不影響分離的效果 C.凝膠色譜柱過(guò)矮,則影響混合物的分離度 D.凝膠色譜柱直徑過(guò)大會(huì)耗用過(guò)多洗脫液,樣品的稀釋度過(guò)大 (三) SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳(選做) : 鑒定血紅蛋白純度。此外,還可以加入大分子的有色物質(zhì), 例如藍(lán)色葡聚糖 — 2022或紅色葡聚糖,觀察色帶移動(dòng)的情況。 你能觀察到蛋白質(zhì)的分離過(guò)程中紅色區(qū)帶的移動(dòng)嗎?請(qǐng)描述紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況,并據(jù)此判斷分離效果? 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步,包括: 樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定 。這使血紅蛋白的分離過(guò)程非常直觀,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。 你能描述血紅蛋白分離的完整過(guò)程嗎? 思考下面的問(wèn)題: 讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的
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