【正文】 如果色帶均勻、狹窄、平整，說明凝膠色譜柱的性能良好。 （ 3）樣品加入與洗脫 ① 調(diào)節(jié)緩沖液面： 打開下端出口，使 柱內(nèi)緩沖液 緩慢下降到與凝膠面平齊 ，關(guān)閉出口。 ②底塞的制作： 打孔 → 挖出凹穴 → 安裝移液管頭部 → 覆蓋尼龍網(wǎng)，再用 100目尼龍紗包好，插到玻璃管的 一 端 。 3. SDS作用機理 : 用 SDS測定蛋白質(zhì)分子量的方法 使用 SDS— 聚丙烯酰胺凝膠電泳 測定蛋白質(zhì)的分子量時，可選用一組 已知分子量的標準蛋白 同時進行電泳，根據(jù)已知分子量的標準蛋白的 電泳區(qū)帶位置 ，可以測定 未知蛋白質(zhì) 的分子量。 能夠抵制外界的酸和堿對溶液 PH值的影響， 維持 PH基本不變。 : : 通常由 1－ 2 種緩沖劑 溶解于水 中配制而成。 市場上有高分子量、次高分子量及低分子量的標準蛋白試劑出售。 注意事項 ：底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否則難以鋪實尼龍網(wǎng)，還會導致液體殘留，蛋白質(zhì)分離不徹底。 ②滴加透析樣品： 吸管吸 1ml樣品加到色譜柱的頂端，滴加樣品時，吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時要重新裝柱。此外，還可以加入大分子的有色物質(zhì)， 例如藍色葡聚糖 — 2022或紅色葡聚糖，觀察色帶移動的情況。 不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 透析過程動畫演示 練習鞏固 隨著人類跨入蛋白質(zhì)組時代，對蛋白質(zhì)的研究和應用越來越深入，首先要做的一步是 A 弄清各種蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu) B 弄清各種蛋白質(zhì)的功能 C 弄清各種蛋白質(zhì)的合成過程 D 獲得高純度的蛋白質(zhì) 用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過程中，關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述，正確的是 A 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程大于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) B 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程小于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) C 相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)行程等于相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) D 二者根本無法比較 : （ 1）凝膠色譜柱的制作： ① 取長 40厘米，內(nèi)徑 ， 兩端需用砂紙磨平。因而掩蓋了 不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別 ， 使電泳遷移率完全取決于分子的大小。 分離蛋白質(zhì) 的原理和 具體過程 （二）緩沖溶液 : 在一定的范圍內(nèi)，凡是能夠抵制 外加少量強 酸或強堿 的影響使原來溶液 PH值基本保持 不變的混 合溶液。調(diào)節(jié) 緩沖劑的使用比例 就可以制得在 不同 PH范圍內(nèi)