【正文】 七夕，古今詩人慣詠星月與悲情。吾生雖晚，世態(tài)炎涼卻已看透矣。情也成空，且作 “揮手袖底風 ”罷。是夜，窗外風雨如晦，吾獨坐陋室，聽一曲《塵緣》，合成詩韻一首，覺放諸古今，亦獨有風韻也。乃書于紙上。畢而臥。凄然入夢。乙酉年七月初七。 嘯之記。 緒論 1． 微生物 ：存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍。甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。 2． 微生物的分類 ： 種類 細胞結(jié)構(gòu) 核酸 特點 代表 非細胞型微物 無典型細胞結(jié)構(gòu)構(gòu) DNA或 RNA,兩者不同時存在 無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細胞內(nèi)生長增值 病毒 原核細胞型微生物 無核膜、核仁，僅有核糖體 DNA 和 RNA 古生菌、細菌（細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌） 真核細胞型微生物 細胞核分化程度很高，有核膜核仁，細胞器完整 DNA 和 RNA 真菌 ：少數(shù)具有致病性，能引起人類、植物病害的微生物。 機會致病性微生物 ：在正常情況下不致病，只有在特定情況下導(dǎo)致疾病的微生物。 4， 郭霍法則 ：① 特殊的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見，在健康人中不存在；② 該特殊病原菌 能被分離培養(yǎng)得純種；③ 該純培養(yǎng)物接種至易感動物，能產(chǎn)生同樣病癥；④ 自人工感染的實驗動物體內(nèi)能重新分離得到該病原菌純培養(yǎng)。 郭霍法則的特殊情況 ：㈠ 主動免疫； ㈡ 被動免疫。 第一篇 細菌學(xué) 第 1章 細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 第一節(jié) 細菌的大小與形態(tài) 1. 觀察細菌常采用光學(xué)顯微鏡，一般以微米為單位。 2. 按細菌外形可分為：①、球菌（雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌） ②、桿菌（鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌） ③、螺形菌（弧菌、螺菌、螺桿菌） 第二節(jié) 細菌的結(jié)構(gòu) 1. 基本結(jié)構(gòu)：細胞 壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì) 特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 （ G+）：顯紫色 。 革蘭陰性菌（ G）：顯紅色。 3. 細胞壁 格蘭陽性菌 G+ 格蘭陰性菌 G 肽聚糖 聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋 （三維立體結(jié)構(gòu)） 聚糖骨架、四肽側(cè)鏈 （二維結(jié)構(gòu)） 磷壁酸（ 重要的菌體表面抗原 ） 外膜 （脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白） ｛脂蛋白 LPS（脂質(zhì) A，核心多糖，特異多糖） 脂質(zhì)雙層 脂多糖｝ 脂多糖即 G菌的內(nèi)毒素 。 LPS是 G菌的重要致病物質(zhì)，使白細胞增多，直 至休克死亡；另一方面， LPS也可增強機體非特異性抵抗力，并有 抗腫瘤等有益作用。 ① 脂質(zhì) A：內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分，無種屬特異性，不同細菌的脂質(zhì) A 骨架基本一致，故不同細菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。 ② 核心多糖：有屬特異性，位于脂質(zhì) A 的外層。 ③ 特意多糖：即 G菌的菌體抗原（ O 抗原），是脂多糖的最外層。 ： 維持菌體固有的形態(tài)，并保護細菌抵抗低滲環(huán)境。 G菌的外膜是一種有效的屏障結(jié)構(gòu)，使細菌不易受到機體的體液殺菌物質(zhì)、腸道的膽鹽及消化酶等的作用。 陷型（細菌 L 型）：細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成唄抑制，這種細菌壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細菌細胞壁缺陷型。 原生質(zhì)體： G+菌細胞壁缺失后，原生質(zhì)層僅被一層細胞膜包住 原生質(zhì)球： G菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護 細菌 L 型的誘發(fā)因素 ，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，膽汁，抗體，補體等。 溶菌酶：能裂解肽聚糖中 N乙酰葡萄胺和 N乙酰胞壁酸之間的 B1， 4 糖苷鍵，破壞聚糖骨架，引起細菌裂解。 青霉素：能與細菌競爭合成肽聚糖過程中所需的轉(zhuǎn)肽酶，抑制四肽側(cè)鏈上 D丙氨酸與五肽橋間的聯(lián)結(jié)，使細菌不能合成完 整的肽聚糖，在一般滲透壓環(huán)境中科導(dǎo)致細菌死亡。 細菌 L 型需在 高滲低瓊脂含血清 的培養(yǎng)基中生長。 G+菌細胞壁缺損形成的原生體，在普通培養(yǎng)基中很容易脹裂死亡，必須保存在高滲環(huán)境中。 胞 膜： 細胞膜的主要功能：ⅰ 物質(zhì)轉(zhuǎn)運 ⅱ 呼吸和分泌 ⅲ 生 物合成 ⅳ 參與細菌分裂 胞 質(zhì)： ①核糖體 鏈霉素（與細菌核糖體的 30S 亞基結(jié)合）和紅霉素（與細菌核糖體的 50S 亞基結(jié)合）均能干擾其蛋白質(zhì)合成，從而殺死細菌，但對人體核糖體無害。 ②質(zhì)粒 染色體外的遺傳物質(zhì)，為閉合環(huán)狀的雙鏈 DNA ③胞制顆粒 貯藏有營養(yǎng)物質(zhì)。異染顆粒（也成迂回體，嗜堿性強，用甲基藍染色時著色較深呈紫色）常見于白喉棒狀桿菌。 質(zhì)： 細菌的遺傳物質(zhì)。 ⑴．莢膜：包繞在細胞壁外的一層粘液性物質(zhì)，為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體。 厚度≧ 微米邊界明顯的稱為莢膜或大莢膜；厚度﹤ 微米的為微莢膜。 若粘液物質(zhì)疏松地附著于菌細胞表面，邊界不明顯且易被洗脫者成為粘液層。 大多數(shù)細菌的莢膜為多糖，多糖分子組成和構(gòu)型的多樣化使其結(jié)構(gòu)極為復(fù)雜，成為血清學(xué)分型的基礎(chǔ)。 莢膜對一般堿性染料親和力低，不易著色。 莢膜的功能： Ⅰ抗吞噬作用；Ⅱ粘附作用；Ⅲ抗有害物質(zhì)的損傷作用。 ⑵．鞭毛：包括：單毛菌、雙毛菌、叢毛菌、周毛菌 鞭毛由基礎(chǔ)小體、 鉤狀體、絲狀體三部分組成。 鞭毛的功能： 使細菌能在液體中自由游動，速度迅速。細菌的運動有化學(xué)趨向性，常向營養(yǎng)物質(zhì)處前進，而逃離有害物質(zhì)。 ⑶．菌毛：必須用電子顯微鏡觀察 ① 普通菌毛 ② 性菌毛：僅見于少數(shù) G菌。 ⑷．芽胞：細菌的休眠形式，營養(yǎng)缺乏尤其是 C、 N、 P 元素不足時，細菌生長繁殖減速，啟動芽胞形成的基因。 細菌的芽胞由內(nèi)向外依次是：核心、內(nèi)膜、芽胞壁、皮質(zhì)、外膜、芽胞殼和押寶外衣。 芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組 分的結(jié)構(gòu)，能保存細菌的全部生命必須物質(zhì)，芽胞形成后細菌即失去繁殖能力。 一個細菌只形成一個芽胞，一個芽胞也只能生成一個菌體。 細菌的芽胞對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強大的抵抗力。此外，當芽胞成為繁殖體后，能迅速大量繁殖而致病。 第二章 細菌的生理 第一節(jié) 細菌的理化性質(zhì) 1． 細菌的化學(xué)組成 水、無機鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、核酸 ① .光學(xué)性質(zhì)；② .表面積 。細菌的相對表面積大，有利于同外界進行物質(zhì)交換；③ .帶電現(xiàn)象；④ .半透性：細菌的細胞膜和細胞壁都有半透性，有利于吸收營養(yǎng)和排除代謝產(chǎn)物；⑤ .滲透壓：細菌所處一般環(huán)境相對低滲。 第二節(jié) 細菌的營養(yǎng)和生長繁殖 一、細菌的營養(yǎng)類型 自養(yǎng)菌：化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌 異養(yǎng)菌：腐生菌、寄生菌 所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。 二、細菌的營養(yǎng)物質(zhì) 水 碳源 氮源：作為菌體成分的原料 無機鹽：常用元素（ P,S,K,Na， Mg,）微量元素（ Zn,Cu,Mn,鈷） 各類無機鹽的公用：①、構(gòu)成 有機化合物，成為菌體的成分； ②、作為酶的組成成分，維持酶的活性； ③、參與能量的儲存和轉(zhuǎn)運；④、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓； ⑤、某些元素與細菌的生長繁殖和致病作用密切相關(guān)。 生長因子：生長因子是指，某些細菌細菌生長所必須的但自身又不能合成，必須由外界供給的物質(zhì)。 三、細菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機制 ： ：Ⅰ、依賴于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運系統(tǒng)； Ⅱ、化學(xué)滲透趨勢轉(zhuǎn)運系統(tǒng)； Ⅲ、基團轉(zhuǎn)移 四、影響細菌生長的 環(huán)境因素 營養(yǎng)物質(zhì) 氫離子濃度（ pH） 溫度 氣體：①專性需氧菌：具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，以分子氧為受氫體，僅能在有氧環(huán)境下生長 ②微需氧菌：在低氧壓生長最好 ③兼性厭氧菌：兼有需氧系統(tǒng)和無氧發(fā)酵兩種功能，在有氧或無氧環(huán)境均能生長，但以有氧環(huán)境生長較好 ④專性厭氧菌：缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，利用氧以外的其他物質(zhì)作為受氫體，只能在低氧分壓或無氧環(huán)境中進行發(fā)酵 滲透壓： 五、細菌的生長繁殖 ①、個體的生長繁殖 ②、群體的生長繁殖： 遲緩期； 對數(shù)期； 穩(wěn)定期； 衰亡期 第三節(jié) 細菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換 一、 細菌的能量代謝 細菌能量代謝活動中主要涉及 ATP 形式的化學(xué)能。細菌的有機物分解或無機物氧化過程中釋放的能量通過底物的磷酸化或氧化磷酸化合成ATP。 生物體能量代謝的基本生化反應(yīng)是生物氧化，其方式包括：加氧、脫氫和托電子反應(yīng)，細菌則以脫氫或氫的傳遞更為常見。 發(fā)酵： 以有機物為受氫體的生物氧化。 呼吸： 以無機物為受氫體的生物氧化。以分子氧為受氫體的是有氧呼吸，以其他無機物為受氫 體的是厭氧呼吸。 病原菌合成細胞組分和獲得能量的基質(zhì)主要為糖類，通過糖的氧化或酵解釋放能量，并以高能磷酸鍵的形式（ ATP/ADP）儲存能量。 EMP 途徑，又稱糖酵解。大多數(shù)細菌共有的基本代謝途徑，有些專性厭氧菌產(chǎn)能的唯一途徑。 磷酸戊糖途徑，又稱一磷酸己糖途徑。為生物合成提供前提和還原能。 需氧呼吸，需氧菌和兼性厭氧菌進行需氧反應(yīng)。 厭氧呼吸，專性厭氧菌和兼性厭氧菌都能進行厭氧呼吸。 二、細菌的代謝產(chǎn)物 ㈠、分解代謝產(chǎn)物和細菌的生化反應(yīng) ㈡、合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義 1. 熱原質(zhì)（致熱源），是細菌合成的 一種注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱致源的細菌大都為格蘭陰性菌，熱致源即其細胞壁的脂多糖。 2. 毒素及侵襲性酶：①、外毒素：多數(shù) G+菌和少數(shù) G菌在生長繁殖過程中釋放菌體外的蛋白質(zhì)； ②、內(nèi)毒素： G菌細胞壁的脂多糖； 外毒素毒性強于內(nèi)毒素。 ③、侵襲性酶：某些細菌產(chǎn)生的，能損傷機體組織，促使菌體的侵襲和擴散，是細菌重要的致病物質(zhì)。 3. 色素： 4. 抗生素：某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細胞的物質(zhì) ?？股卮蠖嘤煞啪€菌和真菌產(chǎn)生。 5. 細菌素：某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細菌素僅對與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細菌有殺傷作用。 6. 維生素： 第三節(jié) 細菌的人工培養(yǎng) 一、 培養(yǎng)基 1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 2. 增菌培養(yǎng)基 3. 選擇培養(yǎng)基 4. 鑒別培養(yǎng)基 5. 厭氧培養(yǎng)基 二、 細菌在培養(yǎng)基中的生長情況 ㈠ 液體培養(yǎng)基 ㈡ 固體培養(yǎng)基 菌落： 單個細菌分裂繁殖成肉眼可見的細菌基團。 1. 光滑型菌落 2. 粗糙型菌落 3. 粘液型菌落 ㈢ 半固體培養(yǎng)基 三、 人工培養(yǎng)細菌的用途 1． 醫(yī)學(xué)：①感染性疾病的病原學(xué)診斷 ②細菌學(xué)的研究 ③生物制品的制備 2. 工 農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 3. 基因工程 第 3 章 消毒滅菌與病原微生物實驗室生物安全 第一節(jié) 消毒滅菌的常用術(shù)語 1. 滅菌： 殺滅生物體上所有微生物的方法。 2. 消毒： 殺死物體上或環(huán)境中的病原 微生物，并不一定能殺死細菌芽胞或非病原微生物的方法。 3. 防腐： 防止或抑制皮膚表面細菌生長繁殖的方法。 4. 無菌： 無菌即不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。 無菌操作： 防止細菌進入人體或其他物品的操作技術(shù)。 5. 清潔： 減少微生物數(shù)量的過程。 第二節(jié) 消毒滅菌的方法 一、物理消毒滅菌法 ㈠、熱力滅菌法 ①干熱滅菌法：一般細菌繁殖體在干燥狀態(tài)下， 80100℃經(jīng) 1 小時 可被殺死，芽胞則需要更高溫度才能被殺死。 包括：焚燒、燒灼、干烤、紅外線 ②濕熱滅菌法：最常用，在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好，因為：ⅰ濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固變性；ⅱ濕熱的穿透力比干熱大；ⅲ濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)存在。 包括：巴氏消毒法（加熱至 ℃ 30 分鐘， ℃經(jīng) 1530 秒）、煮沸法、流動蒸汽消毒法、間歇蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。 ㈡、輻射殺菌法： ①