【正文】 七夕，古今詩人慣詠星月與悲情。吾生雖晚，世態(tài)炎涼卻已看透矣。情也成空，且作 “揮手袖底風(fēng) ”罷。是夜，窗外風(fēng)雨如晦，吾獨(dú)坐陋室，聽一曲《塵緣》，合成詩韻一首，覺放諸古今，亦獨(dú)有風(fēng)韻也。乃書于紙上。畢而臥。凄然入夢。乙酉年七月初七。 嘯之記。 緒論 1． 微生物 ：存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍。甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。 2． 微生物的分類 ： 種類 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 核酸 特點(diǎn) 代表 非細(xì)胞型微物 無典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)構(gòu) DNA或 RNA,兩者不同時存在 無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長增值 病毒 原核細(xì)胞型微生物 無核膜、核仁，僅有核糖體 DNA 和 RNA 古生菌、細(xì)菌（細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌） 真核細(xì)胞型微生物 細(xì)胞核分化程度很高，有核膜核仁，細(xì)胞器完整 DNA 和 RNA 真菌 ：少數(shù)具有致病性，能引起人類、植物病害的微生物。 機(jī)會致病性微生物 ：在正常情況下不致病，只有在特定情況下導(dǎo)致疾病的微生物。 4， 郭霍法則 ：① 特殊的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見，在健康人中不存在；② 該特殊病原菌 能被分離培養(yǎng)得純種；③ 該純培養(yǎng)物接種至易感動物，能產(chǎn)生同樣病癥；④ 自人工感染的實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)能重新分離得到該病原菌純培養(yǎng)。 郭霍法則的特殊情況 ：㈠ 主動免疫； ㈡ 被動免疫。 第一篇 細(xì)菌學(xué) 第 1章 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 第一節(jié) 細(xì)菌的大小與形態(tài) 1. 觀察細(xì)菌常采用光學(xué)顯微鏡，一般以微米為單位。 2. 按細(xì)菌外形可分為：①、球菌（雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌） ②、桿菌（鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌） ③、螺形菌（弧菌、螺菌、螺桿菌） 第二節(jié) 細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 1. 基本結(jié)構(gòu)：細(xì)胞 壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì) 特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞 （ G+）：顯紫色 。 革蘭陰性菌（ G）：顯紅色。 3. 細(xì)胞壁 格蘭陽性菌 G+ 格蘭陰性菌 G 肽聚糖 聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋 （三維立體結(jié)構(gòu)） 聚糖骨架、四肽側(cè)鏈 （二維結(jié)構(gòu)） 磷壁酸（ 重要的菌體表面抗原 ） 外膜 （脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白） ｛脂蛋白 LPS（脂質(zhì) A，核心多糖，特異多糖） 脂質(zhì)雙層 脂多糖｝ 脂多糖即 G菌的內(nèi)毒素 。 LPS是 G菌的重要致病物質(zhì)，使白細(xì)胞增多，直 至休克死亡；另一方面， LPS也可增強(qiáng)機(jī)體非特異性抵抗力，并有 抗腫瘤等有益作用。 ① 脂質(zhì) A：內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分，無種屬特異性，不同細(xì)菌的脂質(zhì) A 骨架基本一致，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。 ② 核心多糖：有屬特異性，位于脂質(zhì) A 的外層。 ③ 特意多糖：即 G菌的菌體抗原（ O 抗原），是脂多糖的最外層。 ： 維持菌體固有的形態(tài)，并保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境。 G菌的外膜是一種有效的屏障結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌不易受到機(jī)體的體液殺菌物質(zhì)、腸道的膽鹽及消化酶等的作用。 陷型（細(xì)菌 L 型）：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成唄抑制，這種細(xì)菌壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。 原生質(zhì)體： G+菌細(xì)胞壁缺失后，原生質(zhì)層僅被一層細(xì)胞膜包住 原生質(zhì)球： G菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù) 細(xì)菌 L 型的誘發(fā)因素 ，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，膽汁，抗體，補(bǔ)體等。 溶菌酶：能裂解肽聚糖中 N乙酰葡萄胺和 N乙酰胞壁酸之間的 B1， 4 糖苷鍵，破壞聚糖骨架，引起細(xì)菌裂解。 青霉素：能與細(xì)菌競爭合成肽聚糖過程中所需的轉(zhuǎn)肽酶，抑制四肽側(cè)鏈上 D丙氨酸與五肽橋間的聯(lián)結(jié)，使細(xì)菌不能合成完 整的肽聚糖，在一般滲透壓環(huán)境中科導(dǎo)致細(xì)菌死亡。 細(xì)菌 L 型需在 高滲低瓊脂含血清 的培養(yǎng)基中生長。 G+菌細(xì)胞壁缺損形成的原生體，在普通培養(yǎng)基中很容易脹裂死亡，必須保存在高滲環(huán)境中。 胞 膜： 細(xì)胞膜的主要功能：ⅰ 物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn) ⅱ 呼吸和分泌 ⅲ 生 物合成 ⅳ 參與細(xì)菌分裂 胞 質(zhì)： ①核糖體 鏈霉素（與細(xì)菌核糖體的 30S 亞基結(jié)合）和紅霉素（與細(xì)菌核糖體的 50S 亞基結(jié)合）均能干擾其蛋白質(zhì)合成，從而殺死細(xì)菌，但對人體核糖體無害。 ②質(zhì)粒 染色體外的遺傳物質(zhì)，為閉合環(huán)狀的雙鏈 DNA ③胞制顆粒 貯藏有營養(yǎng)物質(zhì)。異染顆粒（也成迂回體，嗜堿性強(qiáng)，用甲基藍(lán)染色時著色較深呈紫色）常見于白喉棒狀桿菌。 質(zhì)： 細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。 ⑴．莢膜：包繞在細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì)，為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體。 厚度≧ 微米邊界明顯的稱為莢膜或大莢膜；厚度﹤ 微米的為微莢膜。 若粘液物質(zhì)疏松地附著于菌細(xì)胞表面，邊界不明顯且易被洗脫者成為粘液層。 大多數(shù)細(xì)菌的莢膜為多糖，多糖分子組成和構(gòu)型的多樣化使其結(jié)構(gòu)極為復(fù)雜，成為血清學(xué)分型的基礎(chǔ)。 莢膜對一般堿性染料親和力低，不易著色。 莢膜的功能： Ⅰ抗吞噬作用；Ⅱ粘附作用；Ⅲ抗有害物質(zhì)的損傷作用。 ⑵．鞭毛：包括：單毛菌、雙毛菌、叢毛菌、周毛菌 鞭毛由基礎(chǔ)小體、 鉤狀體、絲狀體三部分組成。 鞭毛的功能： 使細(xì)菌能在液體中自由游動，速度迅速。細(xì)菌的運(yùn)動有化學(xué)趨向性，常向營養(yǎng)物質(zhì)處前進(jìn)，而逃離有害物質(zhì)。 ⑶．菌毛：必須用電子顯微鏡觀察 ① 普通菌毛 ② 性菌毛：僅見于少數(shù) G菌。 ⑷．芽胞：細(xì)菌的休眠形式，營養(yǎng)缺乏尤其是 C、 N、 P 元素不足時，細(xì)菌生長繁殖減速，啟動芽胞形成的基因。 細(xì)菌的芽胞由內(nèi)向外依次是：核心、內(nèi)膜、芽胞壁、皮質(zhì)、外膜、芽胞殼和押寶外衣。 芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組 分的結(jié)構(gòu)，能保存細(xì)菌的全部生命必須物質(zhì)，芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力。 一個細(xì)菌只形成一個芽胞，一個芽胞也只能生成一個菌體。 細(xì)菌的芽胞對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力。此外，當(dāng)芽胞成為繁殖體后，能迅速大量繁殖而致病。 第二章 細(xì)菌的生理 第一節(jié) 細(xì)菌的理化性質(zhì) 1． 細(xì)菌的化學(xué)組成 水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、核酸 ① .光學(xué)性質(zhì)；② .表面積 。細(xì)菌的相對表面積大，有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換；③ .帶電現(xiàn)象；④ .半透性：細(xì)菌的細(xì)胞膜和細(xì)胞壁都有半透性，有利于吸收營養(yǎng)和排除代謝產(chǎn)物；⑤ .滲透壓：細(xì)菌所處一般環(huán)境相對低滲。 第二節(jié) 細(xì)菌的營養(yǎng)和生長繁殖 一、細(xì)菌的營養(yǎng)類型 自養(yǎng)菌：化能自養(yǎng)菌、光能自養(yǎng)菌 異養(yǎng)菌：腐生菌、寄生菌 所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。 二、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì) 水 碳源 氮源：作為菌體成分的原料 無機(jī)鹽：常用元素（ P,S,K,Na， Mg,）微量元素（ Zn,Cu,Mn,鈷） 各類無機(jī)鹽的公用：①、構(gòu)成 有機(jī)化合物，成為菌體的成分； ②、作為酶的組成成分，維持酶的活性； ③、參與能量的儲存和轉(zhuǎn)運(yùn)；④、調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓； ⑤、某些元素與細(xì)菌的生長繁殖和致病作用密切相關(guān)。 生長因子：生長因子是指，某些細(xì)菌細(xì)菌生長所必須的但自身又不能合成，必須由外界供給的物質(zhì)。 三、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制 ： ：Ⅰ、依賴于周漿間隙結(jié)合蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)； Ⅱ、化學(xué)滲透趨勢轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)； Ⅲ、基團(tuán)轉(zhuǎn)移 四、影響細(xì)菌生長的 環(huán)境因素 營養(yǎng)物質(zhì) 氫離子濃度（ pH） 溫度 氣體：①專性需氧菌：具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，以分子氧為受氫體，僅能在有氧環(huán)境下生長 ②微需氧菌：在低氧壓生長最好 ③兼性厭氧菌：兼有需氧系統(tǒng)和無氧發(fā)酵兩種功能，在有氧或無氧環(huán)境均能生長，但以有氧環(huán)境生長較好 ④專性厭氧菌：缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，利用氧以外的其他物質(zhì)作為受氫體，只能在低氧分壓或無氧環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵 滲透壓： 五、細(xì)菌的生長繁殖 ①、個體的生長繁殖 ②、群體的生長繁殖： 遲緩期； 對數(shù)期； 穩(wěn)定期； 衰亡期 第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換 一、 細(xì)菌的能量代謝 細(xì)菌能量代謝活動中主要涉及 ATP 形式的化學(xué)能。細(xì)菌的有機(jī)物分解或無機(jī)物氧化過程中釋放的能量通過底物的磷酸化或氧化磷酸化合成ATP。 生物體能量代謝的基本生化反應(yīng)是生物氧化，其方式包括：加氧、脫氫和托電子反應(yīng)，細(xì)菌則以脫氫或氫的傳遞更為常見。 發(fā)酵： 以有機(jī)物為受氫體的生物氧化。 呼吸： 以無機(jī)物為受氫體的生物氧化。以分子氧為受氫體的是有氧呼吸，以其他無機(jī)物為受氫 體的是厭氧呼吸。 病原菌合成細(xì)胞組分和獲得能量的基質(zhì)主要為糖類，通過糖的氧化或酵解釋放能量，并以高能磷酸鍵的形式（ ATP/ADP）儲存能量。 EMP 途徑，又稱糖酵解。大多數(shù)細(xì)菌共有的基本代謝途徑，有些專性厭氧菌產(chǎn)能的唯一途徑。 磷酸戊糖途徑，又稱一磷酸己糖途徑。為生物合成提供前提和還原能。 需氧呼吸，需氧菌和兼性厭氧菌進(jìn)行需氧反應(yīng)。 厭氧呼吸，專性厭氧菌和兼性厭氧菌都能進(jìn)行厭氧呼吸。 二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物 ㈠、分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng) ㈡、合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義 1. 熱原質(zhì)（致熱源），是細(xì)菌合成的 一種注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱致源的細(xì)菌大都為格蘭陰性菌，熱致源即其細(xì)胞壁的脂多糖。 2. 毒素及侵襲性酶：①、外毒素：多數(shù) G+菌和少數(shù) G菌在生長繁殖過程中釋放菌體外的蛋白質(zhì)； ②、內(nèi)毒素： G菌細(xì)胞壁的脂多糖； 外毒素毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。 ③、侵襲性酶：某些細(xì)菌產(chǎn)生的，能損傷機(jī)體組織，促使菌體的侵襲和擴(kuò)散，是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。 3. 色素： 4. 抗生素：某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì) 。抗生素大多由放線菌和真菌產(chǎn)生。 5. 細(xì)菌素：某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細(xì)菌素僅對與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。 6. 維生素： 第三節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng) 一、 培養(yǎng)基 1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 2. 增菌培養(yǎng)基 3. 選擇培養(yǎng)基 4. 鑒別培養(yǎng)基 5. 厭氧培養(yǎng)基 二、 細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況 ㈠ 液體培養(yǎng)基 ㈡ 固體培養(yǎng)基 菌落： 單個細(xì)菌分裂繁殖成肉眼可見的細(xì)菌基團(tuán)。 1. 光滑型菌落 2. 粗糙型菌落 3. 粘液型菌落 ㈢ 半固體培養(yǎng)基 三、 人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途 1． 醫(yī)學(xué)：①感染性疾病的病原學(xué)診斷 ②細(xì)菌學(xué)的研究 ③生物制品的制備 2. 工 農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 3. 基因工程 第 3 章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全 第一節(jié) 消毒滅菌的常用術(shù)語 1. 滅菌： 殺滅生物體上所有微生物的方法。 2. 消毒： 殺死物體上或環(huán)境中的病原 微生物，并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。 3. 防腐： 防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。 4. 無菌： 無菌即不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。 無菌操作： 防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。 5. 清潔： 減少微生物數(shù)量的過程。 第二節(jié) 消毒滅菌的方法 一、物理消毒滅菌法 ㈠、熱力滅菌法 ①干熱滅菌法：一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下， 80100℃經(jīng) 1 小時 可被殺死，芽胞則需要更高溫度才能被殺死。 包括：焚燒、燒灼、干烤、紅外線 ②濕熱滅菌法：最常用，在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好，因?yàn)椋孩駸嶂屑?xì)菌菌體蛋白較易凝固變性；ⅱ濕熱的穿透力比干熱大；ⅲ濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)存在。 包括：巴氏消毒法（加熱至 ℃ 30 分鐘， ℃經(jīng) 1530 秒）、煮沸法、流動蒸汽消毒法、間歇蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。 ㈡、輻射殺菌法： ①