【正文】 目 錄第一部分 微生物病理基礎(chǔ)知識 ................................................................................11－1 鞭毛菌亞門及其所致病害的特點 ................................................................11－2 接合菌亞門及其所致病害的特點 ................................................................31－3 子囊菌亞門及其所致病害的特點 ................................................................41－4 擔(dān)子菌亞門及其所致病害的特點 .................................................................71－5 半知菌亞門及其所致病害的特點 ...................................................................8第二部分 微生物病理實驗基本操作 ..........................................................................92－1 植物病理徒手制片技術(shù) .............................................................................92－2 培養(yǎng)基的配制和滅菌 ...................................................................................112－3 植物病原菌的分離和培養(yǎng) .......................................................................152－4 真菌孢子的萌發(fā) ...........................................................................................182－5 植物病原物的接種 .......................................................................................202－6 植物病原生物繪圖技術(shù) .................................................................................21第三部分微生物病理技能訓(xùn)練 ..................................................................................23實訓(xùn)一 植物病原細菌觀察 ...................................................................................23實訓(xùn)二鞭毛菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀察 ..................................................25實訓(xùn)三　 接合菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀察 ..............................................29實訓(xùn)四子囊菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀 ......................................................30實訓(xùn)五 擔(dān)子菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀察 ...............................................35實訓(xùn)六 半知菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀察 .................................................381 / 66微生物病理技能訓(xùn)練教程第一部分 微生物病理基礎(chǔ)知識1－1 鞭毛菌亞門及其所致病害的特點鞭毛菌亞門的主要特點(1)鞭毛菌亞門真菌的共同特征是無性產(chǎn)生具 12 根鞭毛的游動孢子，因此通常稱作鞭毛菌。(2)鞭毛菌有性產(chǎn)生休眠孢子囊和卵孢子。(3)鞭毛菌營養(yǎng)體從原質(zhì)團到無隔菌絲體，屬低等真菌。(4)鞭毛菌大多具有水生習(xí)性，因此只有在高濕、多雨、低洼積水和通風(fēng)透光不好的條件下，侵染植物導(dǎo)致病害。(5)鞭毛菌繁殖時，有的整個營養(yǎng)體全部轉(zhuǎn)變?yōu)榉敝丑w，稱為整體產(chǎn)果，如壺菌；有的只是營養(yǎng)體的一部分轉(zhuǎn)變?yōu)闋I養(yǎng)體，稱為分體產(chǎn)果。(6)游動孢子囊形態(tài)多樣，均可釋放游動孢子。(7)游動孢子具 12 根鞭毛。鞭毛有茸鞭和尾鞭兩種。每個游動孢子具單鞭或雙鞭兩種類型。(8)鞭毛(Flagellum)的結(jié)構(gòu)是 9+2 型。既鞭桿是由 9 根纖絲組成一個圓筒型體，圓筒型體中心還有 2 根纖絲。纖絲之間填充有膠質(zhì)鞘。共 31 條亞纖絲。鞭毛菌亞門的致病特點(1)常見癥狀：腐爛、斑點、猝倒、流膠。(2)果實上腐爛使果變褐色、呈軟腐狀，病部長出白色綿毛狀或灰白色霜狀霉層。(3)莖基和根部被害使皮層變褐色腐爛。(4)葉上斑點，若由疫霉引起，病斑較大，暗褐色圓形水漬病斑；若由霜霉引起，病斑較小，黃色至褐色，邊緣不明顯，病斑受葉脈限制呈多角形，后期在病斑上長出白色至灰白色霜狀霉層。(5)病菌以卵孢子越冬，由孢子囊和游動孢子引起初侵染和再侵染，借雨水和氣流傳播。(6)潛伏期短，可多次再侵染，一般在低溫多雨潮濕多霧、晝夜溫差大的氣候條件下，病害容易發(fā)生。2 / 66與園藝植物有關(guān)的鞭毛菌(1)根腫菌屬（Plasmodiophora）由根腫菌屬的病菌引起的，在病組織內(nèi)這些呈魚卵狀排列的是病菌的休眠孢子囊。休眠孢子囊在寄主細胞內(nèi)分散呈魚卵塊狀，萌發(fā)時產(chǎn)生前端有 2 根鞭毛長短不一的游動孢子。休眠孢子囊對不適宜的環(huán)境適應(yīng)性強，能在土中存活多年，是病菌的初侵染源。（2）腐霉屬（Pythium）①腐霉是低等的鞭毛菌，無性繁殖在菌絲頂端形成孢子囊，孢子囊近球形或不規(guī)則形，成熟后一般不脫落，萌發(fā)時產(chǎn)生游動孢子。②有性繁殖在藏卵器內(nèi)形成一個卵孢子。③如引起黃瓜、茄子等幼苗瘁倒病的病菌，都屬于腐霉屬。(3)疫霉屬（Phytophthora）①孢子囊在孢囊梗上，孢囊梗無限生長。②孢子囊卵圓形，成熟時脫落，萌發(fā)時產(chǎn)生游動孢子，或直接萌發(fā)長出芽管。③有性生殖在藏卵器內(nèi)形成一個卵孢子。(4)霜霉科（Peronosporaaceae） ①高等的鞭毛菌，都是植物體上的活體寄生菌，菌絲蔓延在寄生的細胞間，以吸器伸入寄主的細胞內(nèi)吸收養(yǎng)分。②孢囊梗有限生長，呈樹枝狀分枝。③孢子囊在孢囊梗上形成，孢子囊卵圓形，頂端乳頭狀突起，萌發(fā)產(chǎn)生游動孢子，或直接長出芽管。④有性生殖形成卵孢子。(5)白銹菌屬(Albugo)①活體寄生物，菌絲在寄主細胞間蔓延，以吸器伸入寄主細胞內(nèi)吸收營養(yǎng)。②孢囊梗 不分枝，短棍棒狀，密集在寄主表下，排列成柵欄狀，每一孢囊梗 頂端串生孢子囊。③孢子囊橢圓形，成熟后寄主表皮散出如白銹粉。④卵孢子壁厚，表面有瘤狀突起。1－2 接合菌亞門及其所致病害的特點接合菌亞門的主要特點（1）菌絲體無隔多核，細胞壁由甲殼質(zhì)組成。3 / 66（2）無性生殖形成孢子囊，產(chǎn)生不能游動的孢囊孢子。（3）有性生殖形成接合孢子。接合菌亞門的致病特點其多為腐生菌，廣泛分布于土壤和糞肥中，少數(shù)為弱寄生菌，可引起果實貯藏期腐爛。已知接合菌亞門分 2 個綱、7 個目、約 600 個種。與園藝植物病害有關(guān)的是接合菌綱、毛霉目、根霉屬。與園藝植物有關(guān)的接合菌根霉菌（Rhizopus）（1）菌絲發(fā)達，分布在基物上和基物內(nèi)，有匍匐絲和假根。（2）孢囊梗從匍匐絲上長出，頂端形成孢子囊，內(nèi)生孢囊孢子，孢子囊壁破散出孢囊孢子。（3）有性生殖形成接合孢子（不常見）。（4）黑根霉引起貯藏甘薯軟腐病。1－3 子囊菌亞門及其所致病害的特點 子囊菌亞門的主要特點（1）營養(yǎng)體全世界發(fā)現(xiàn) 32,000 種，占真菌的 1/3，都是高等真菌，寄生，形態(tài)千差萬別，但共同點是形成子囊。子囊(Ascus)，子囊孢子(Ascospore)。簡單的僅為單細胞，但大多數(shù)有發(fā)達的菌絲體，菌絲有隔，每個細胞有一個、二個、多個核，壁以幾丁質(zhì)為主，營養(yǎng)體可以形成厚垣孢子。有的菌絲可以直接形成粉孢子，芽孢子。很多可以形成營養(yǎng)菌絲的組織體。（2）子囊菌的無性繁殖產(chǎn)生分生孢子或孢子器，非常發(fā)達，形狀多樣，圓形，卵形，棒形，絲狀，鐮刀形(新月形)，蠟?zāi)c形，有單孢，雙孢，多孢。有的有色，有的無色。分生孢子梗：可以分枝或不分枝，散生，叢生，束生，(孢梗束 Coremium)，有的分生孢子梗著生在簡單的分生孢子痤上(Sporodochium)，有的形成在分生孢子盤上(Acervulus)，有的形成分生孢子器上(Pyidium)。分生孢子作用：在一個生長季可以反復(fù)發(fā)生，是再侵染的來源，“可以遠距離傳播”，有的高等子囊菌在一生中僅發(fā)生無性，無有性。（3）子囊菌的有性繁殖4 / 66①子囊：子囊形狀有圓形，橢圓形或棒狀。子囊壁有的單層壁，有的雙層壁,有的囊壁成熟后溶解，有的不溶，有的子囊頂有孔口，有的無孔口。子囊有的單個散生，有的多個并列，有的叢生。子囊之間的有的有側(cè)絲。②子囊孢子（Ascospore）：形態(tài)多種多樣，圓形，橢圓形，絲狀，單胞，雙胞，多胞，無色或有色。在子囊內(nèi)排列的有散生，單列，雙列，并列，螺旋形排列。③子囊果（Ascocarp）：在子囊外部具一菌組織包被的殼，這種類型的子實體稱子囊果。子囊果的類型A、 閉囊殼—完全封閉呈球形。B、子囊殼—球形或瓶狀，頂端有孔口。C、子囊盤—盤狀或杯狀，頂端開口大。D、子囊座—子囊著生在子座的空腔內(nèi)。 與園藝植物有關(guān)的子囊菌(1)外囊菌屬（Taphrina）無子囊果，子囊平行排列在寄主表面呈柵狀。無性繁殖是子囊孢子在子囊內(nèi)芽殖產(chǎn)生芽孢子，芽孢子還可繼續(xù)芽殖。常見病狀：畸形，葉片皺縮、果實膨大等。(2)白粉菌目 (Eryshiphales)① 白粉菌目的真菌一般稱作白粉菌，引致各種植物白粉病(Powdery mildew)。② 菌絲白色，大都表生，產(chǎn)生吸器吸取植物營養(yǎng)。③ 主要寄生在葉片上，有的發(fā)生在新梢或芽上。在病部形成白粉或小黑點。④ 無性世代：非常發(fā)達，由菌絲形成分生孢子梗和分生孢子。分生孢子鏈生或單生，不斷產(chǎn)生。形成白粉。⑤ 有性世代：寄生后期在菌絲的上部形成閉囊殼(小黑點)，有附屬絲，便于傳播。閉囊殼內(nèi)有一個或多個子囊，子囊內(nèi)有 28 個子囊孢子，子囊孢子單孢無色。⑥ 寄生專化性：專性寄生，有生理小種，寄主有 8435 種。有的白粉菌只有一種寄主，而一種寄主可寄生多種白粉菌。如：桑樹有桑表白粉，桑里白粉。柞樹有七種白粉病。⑦白粉病發(fā)生的條件：對溫度要求不嚴格，干旱地區(qū)、潮濕地區(qū)都可發(fā)生，白粉菌的孢子在水中反而不易發(fā)芽或破裂，在潮濕的空氣中易發(fā)芽，該孢子滲透壓很高，3668 個大氣壓，因此很易吸收周圍的空氣中的水分。⑧白粉菌分屬依據(jù)：閉囊殼附屬絲的形狀和殼內(nèi)子囊的數(shù)目。5 / 66白粉菌（閉殼菌）：菌絲以吸器吸收營養(yǎng)；子囊著生在閉囊殼內(nèi)，外部有附著絲；菌絲分化成分生孢子梗，頂端串生分生孢子，呈白粉狀故名白粉菌。(3)核菌①主要特點A、這類真菌種類多，形態(tài)變化大，子囊著生在具有孔口的子囊殼內(nèi)。B、子囊殼散生或聚生在寄主的組織中，子囊內(nèi)具 8 個子囊孢子。C、病害流行是分生孢子多次再侵染。D、病害癥狀：引起樹皮腐爛、潰瘍、瘤腫和枝枯；侵害果實引起腐爛和輪紋等癥狀。②主要種類A、小叢殼屬 Glomerella子囊殼小，球形，半埋生在子座內(nèi)；子囊棍棒狀，無側(cè)絲；子囊孢子單孢無色，長橢圓形，稍彎曲。有性世代在自然界很少發(fā)生，無性世代為炭疽菌屬(Colletotrichum)。如棉花炭疽病 G.gossypii，蘋果梨炭疽病 。B、黑腐皮殼屬 （Valsa）子囊殼埋生子座基部，有長頸伸出子座；子囊孢子臘腸狀，單胞無色或暗色。無性世代是殼囊孢屬(Cytospora)。只能為害樹皮，不能為害綠色部分。蘋果樹腐爛病。C、囊孢殼屬（Physalospora）無子座。子囊殼黑色，埋生于寄主組織內(nèi)。子囊較大，棍棒狀，子囊孢子單胞，無色，長度一般大于 。D、間座殼屬（Diaporthe）子囊殼埋生在子座基部，梨形或球形，黑色，頂端有短喙狀突起。子囊圓柱形，有頂環(huán)。子囊孢子線形多胞。無性世代不發(fā)生。如引起茄褐紋病。（4）腔菌①主要特點A、子囊著生在子座的空腔內(nèi)，子囊間無側(cè)絲，子囊具雙層壁 。B、無性生殖發(fā)達，可形成各種形態(tài)的分生孢子，對植物危害主要是分生孢子侵染。C、病害癥狀：斑點、瘡痂和腐爛。②主要種類A、痂囊腔菌屬 Elsinoe6 / 66子囊在子囊腔中不規(guī)則散生，每個子囊腔只有一個球形子囊，子囊孢子長圓筒形，3隔 4 胞、無色。為害植物主要是無性世代，在分生孢子盤上產(chǎn)生分生孢子。(痂圓孢屬Sphaceloma)我國有性世代未發(fā)現(xiàn)，主要無性。代表：葡萄黑痘病。球座菌屬 GuignardiaB、球座菌屬 Guignardia本屬與上屬形態(tài)基本一致，本屬子囊孢子單胞（假雙孢）。無性世代很發(fā)達，包括在葉點菌屬和莖點菌屬。葡萄黑腐病菌