【正文】 特征，掌握與植物病害有關(guān)的重要屬的基本形態(tài)特征、分類依據(jù)及其所致病害的癥狀特點。26 / 66，為分類鑒定打下初步基礎(chǔ)。學(xué)會病原物標(biāo)本臨時玻片的制作方法。二、內(nèi)容、材料和方法　　(一)根腫菌綱(Plasmodiophoromycetes) 　　1 根腫菌屬(Plasmodiophora)　　觀察白菜根腫病()的液浸標(biāo)本，注意根腫的特點，然后鏡檢白菜根腫病菌制備片(001)，注意在寄主細(xì)胞內(nèi)能否見到成堆的休眠孢子 ?受病細(xì)胞的大小與正常細(xì)胞有無區(qū)別?是薄壁細(xì)胞受害，還是輸導(dǎo)組織受害 ? 　　2 粉痂屬(Spongospora) 　　觀察馬鈴薯粉痂病()標(biāo)本，鏡檢該病的制備片 (002)，注意馬鈴薯塊莖皮層上形成的瘡痂狀小瘤及寄主細(xì)胞內(nèi)由休眠孢子聚集成多孔的海綿狀圓球?！　?二)壺菌綱(Chytridiomycetes)　　壺菌營養(yǎng)體形態(tài)變化較大，較高等的開始有原始的絲狀體，無性繁殖產(chǎn)生后端具有單根尾鞭的游動孢子；有性繁殖最主要的方式是兩個同型的游動配子交配形成合子，重要的只有節(jié)壺菌屬(Physoderma)中的玉蜀黍節(jié)壺菌 ()引起玉米褐斑病?！　∮^察玉米褐斑病標(biāo)本，注意發(fā)病部位，病斑大小，顏色，是否隆起，用解剖針挑破病斑可見到大量黃褐色的粉末，即病菌的休眠孢子，制片鏡檢休眠孢子的形態(tài)，或鏡檢玉米褐斑病菌制備片(003)注意休眠孢子胞壁厚薄、顏色，是否有蓋?！　?三)卵菌綱(Oomycetes)　　卵菌的特征是營養(yǎng)體為真正的菌絲體；無性繁殖產(chǎn)生具有一根尾鞭和一根茸鞭的游動孢子，有性繁殖通過異型的雄器和藏卵器交配產(chǎn)生卵孢子，根據(jù)藏卵器內(nèi)卵孢子數(shù)目的多少及其他特性，卵菌綱分為水霉目和霜霉目兩個目?！　? 水霉目(Saprolegniales)　　水霉目真菌的主要特征是藏卵器中形成一個以上的卵孢子；游動孢子有兩游現(xiàn)象，游動孢子囊(菌絲頂端原生質(zhì)高度濃縮，基部有分隔與菌絲分開 )不脫落，與菌絲無顯著差異，該目與植物病害關(guān)系較大的有以下兩屬?！　?)水霉屬(Saprolegnia)　　鏡檢培養(yǎng)皿中用線麻籽或大米粒誘發(fā)培養(yǎng)的水霉菌，注意菌絲和游動孢子27 / 66囊的形態(tài)，菌絲和游動孢子囊區(qū)別是否明顯?次生游動孢子囊是否從初生游動孢28 / 66子囊的空殼內(nèi)生出(層生)?藏卵器內(nèi)卵孢子數(shù)是一個，還是多個；能否看到藏卵29 / 66器和雄器交配?能否看到游動孢子釋放的現(xiàn)象?！　?2)綿霉屬(Achlya)　　鏡檢培養(yǎng)皿中用線麻籽或大米粒誘發(fā)培養(yǎng)的綿霉菌，注意和水霉屬真菌的區(qū)別，能否看到單個或成串產(chǎn)生的厚壁孢子的情況以及游動孢子釋放后聚集在孢子囊附近的情形。　　2 霜霉目(Peronosporales)　　霜霉目真菌與水霉目真菌的主要區(qū)別是藏卵器中只形成一個卵孢子；游動孢子沒有兩游現(xiàn)象，孢子囊一般是產(chǎn)生在特殊分化的孢囊梗上：孢子囊較易從孢囊梗上脫落?！　「鶕?jù)孢囊梗的形態(tài)特點，霜霉目分為腐霉菌科(Pythiaceae)、白銹菌科(Albuginaceae)和霜霉菌科(Peronosporaceae)(見附錄)，該目與植病關(guān)系密切的有以下幾個屬?！　?)腐霉屬(Pythium)　　觀察蔬菜幼苗猝倒病標(biāo)本，注意受害部位和癥狀特點。將瓜果腐霉()斜面菌種的菌落少許移置在清水中，在18—20℃下培養(yǎng) 24—36 小時，然后用解剖針從水中挑取少量菌絲制片鏡檢。觀察菌絲有沒有隔膜?游動孢子囊形狀?與菌絲差別是否明顯?能否看到孢子囊萌發(fā)的情景?泄管和泡囊的形態(tài)如何? 　　2)疫霉屬(Phytophthora) 　　取馬鈴薯晚疫病()標(biāo)本，觀察受害部位。注意癥狀特點，特別要注意葉片上病斑的位置，大小、狀態(tài)、顏色，邊緣是否清楚，是否產(chǎn)生灰白色的霉層(特別是葉背面)?挑取馬鈴薯晚疫病菌斜面培養(yǎng)菌制片(或取制備片 008)鏡檢游動孢囊梗、游動孢子囊和游動孢子，注意孢囊梗分枝的特點及游動孢子囊的形態(tài)?！　?3)單軸霉屬(Plasmopara)　　觀察葡萄霜霉病()標(biāo)本，注意為害部位及癥狀特點，挑取葡萄霉病病葉病斑上的霉層制片(或取制備片 015)鏡檢孢子囊梗的形態(tài)，注意分枝特點及分枝末端的特征。30 / 66　　(4)霜霉屬(Peronospora)　　觀察十字花科霜霉病()和大豆霜霉病()標(biāo)本，注意為害部位的癥狀和特點，然后挑取少許霉層制片(或取制備片 027 或 018)鏡檢孢囊梗和孢子囊，注意孢子囊的梗分枝特點?！　?5)假霜霉屬(Pseudoperonospora)　　觀察黃瓜霜霉病()標(biāo)本，注意為害部位和病狀特點，挑取霉層制片或取制備片 013)鏡檢孢囊梗和孢子囊，注意孢囊梗的分枝特點，與霜霉屬形態(tài)有何異同。　　(6)盤梗霉屬(Bremia)　　觀察萵苣霜霜霉病()標(biāo)本，注意癥狀特點，挑取病葉上的霉層制片(或取制備片 016)，鏡檢孢子囊梗的形態(tài)，注意分枝末端是否膨大呈盤狀?邊緣是否有小梗?孢子囊的形態(tài)及著生位置如何?　　7)白銹菌屬(Albugo)　　取十字花科白銹病()，注意受害部位，癥狀特點，切取白銹病病葉制片鏡檢(或鏡檢制備片 009—無性，010—有性)，注意孢子囊梗著生的位置，形態(tài)和排列特點，孢子囊的形態(tài)，注意觀察藏卵器內(nèi)卵孢子的數(shù)目，藏卵器壁與卵孢子壁是否愈合，另取該菌無性世代制備片 009，觀察孢子囊梗的形態(tài)，特別要注意分枝特點。三、作業(yè)　　1．繪馬鈴薯晚疫病菌()和十字花科白銹病菌()孢囊梗和孢子囊形態(tài)圖。　　2．繪葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)和黃瓜霜霉病菌() 形態(tài)圖。　　3．鏡檢鑒定大蔥霜霉病、向日葵霜霉病，波菜霜霉病的病原菌，鑒定到屬。四、思考題　　1．試比較說明水霉、腐霉、疫霉和霜霉，從低級向高級演化的情況?！　?．霜霉為害植物時，為什么多發(fā)生在葉部?為什么多在病斑背面形成霉層?為什么常在低溫多濕的條件下受害嚴(yán)重.31 / 66實訓(xùn)三　接合菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀察一、實訓(xùn)目標(biāo)　　熟悉與植病關(guān)系密切的接合菌的形態(tài)及其所致病害的癥狀特點，同時觀察真菌的異宗配合現(xiàn)象。二、內(nèi)容、材料和方法　　毛霉目(Mucorales) 真菌大多是腐生菌，引起植物花、果實、塊根和塊莖的腐爛?！　? 根足霉屬(Rhizopus)　　根霉屬(Rhizopus)　　菌絲發(fā)達(dá)，有分枝，分布在基物表面或其內(nèi)，有匍匐絲和假根。孢囊梗 23 根叢生，在假根相反方向從菌絲上產(chǎn)生，一般不分枝，頂生孢子囊，產(chǎn)生大量孢囊孢子，有囊軸，鑼錘形，孢囊孢子單胞，表面有飾紋，接合孢子色深，表面有瘤狀突起。　　取甘薯軟腐病()標(biāo)本，觀察癥狀特點，注意受害甘薯表面是否有白色毛狀物生出?在白色毛狀物中是否有黑點?挑取培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的根足霉(帶少許培養(yǎng)基 )制片(或取制備片 022)，鏡檢小黑點是什么器官?注意匍匐枝和假根的形態(tài)，孢囊梗著生的位置，能否見到囊軸?什么形狀?　　毛霉屬(Mucor)　　無匍匐絲與假根，孢囊梗單生，直立，其它形態(tài)同根霉，挑取培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的毛霉制片(或取制備片 020)，鏡檢孢囊梗，孢子囊和孢囊孢子，注意和根霉的區(qū)別?！　◇敲箤?Choanephora)　　形成的大小兩種類型的孢子囊，條件不適時，產(chǎn)生大型孢子囊，大型孢子囊產(chǎn)生在頂端彎曲的孢囊梗上，其內(nèi)產(chǎn)生多數(shù)孢囊孢子，孢子頂端有數(shù)根細(xì)毛。通常形成小型孢子囊，小型孢子囊聚生在孢子囊梗頂端膨大的頭狀體的小梗上，其中形成一個孢子，故也稱這種小型孢子囊為分生孢子。該菌為害花和果實，引起花腐和果腐，取制備片 024，鏡檢笄霉的孢囊梗和孢子囊形態(tài)，注意觀察該屬與根霉、毛霉的區(qū)別?！　±珙^霉屬(Absidia)　　產(chǎn)生匍匐絲和假根，孢囊梗自假根間的弓形匍匐絲上長出，配囊柄上長出附屬絲包圍32 / 66接合孢子。取制備片 023 鏡檢犁頭霉的假根，匍匐絲及配囊柄上長出附屬絲包圍接合孢子的形態(tài)，注意孢囊梗著生的位置和根霉有何不同。三、作業(yè)繪根足霉形態(tài)圖四、思考題　　1．接合菌和鞭毛菌在形態(tài)上有哪些異同點?　　2．毛霉和根霉有什么不同?　　3．試談異宗配合的概念。實訓(xùn)四子囊菌亞門真菌及其所致病害癥狀觀　　 一、實訓(xùn)目標(biāo)　　通過本次實驗了解子囊菌的形態(tài)特征及分類概況，熟悉該菌所致病害的癥狀特點，以便為子囊菌的分類和病害鑒定打下基礎(chǔ)。二、內(nèi)容、材料和方法　(一)半子囊菌綱(Hemiasycetes)　　半子囊菌綱包括許多低等的子囊菌，比較原始，營養(yǎng)體是單細(xì)胞或不發(fā)達(dá)的菌絲體：子囊散生，不形成子囊果：也不產(chǎn)生真正的分生孢子，與植病關(guān)系較大的只有外囊菌目(Taphrinales)中的外囊菌屬(Taphrina)，該屬真菌都是專性寄生菌，引起葉片、枝梢和果實畸形。　　觀察桃縮葉病()、李囊果病()標(biāo)本，注意植物組織膨腫變形狀態(tài)，病部表面是否有灰白色霉層?為何物?取小塊病葉或病果皮切片鏡檢( 或取挑縮葉病制備片 101)，鏡檢裸生的子囊及其內(nèi)的子囊孢子?！　?二) 不整囊菌綱(Plectomycetes)　　(三) 核菌綱(Pyrenomycetes)　　　　1 白粉菌目 Erysiphales　　白粉菌都是專性寄生菌，菌絲、無性和有性繁殖體多表生，以吸器伸入寄主表皮細(xì)胞吸取養(yǎng)分，子囊果為閉囊殼，其上生有各種形狀的附屬絲，根據(jù)附屬絲的性狀和閉囊殼內(nèi)33 / 66子囊的數(shù)目進(jìn)行分類，常見的有以下七屬。34 / 66　　(1)白粉屬(Erysiphe)35 / 66　　觀察瓜類白粉病()標(biāo)本，注意病狀特點，病部是否有白色粉狀物和小黑36 / 66點，挑取小黑點制片(或取制備片 105)，鏡檢閉囊殼的形態(tài)，注意附屬絲的性狀和長短，然后用解剖針輕壓蓋片，擠壓閉囊殼使之慢慢破裂，注意觀察其內(nèi)子囊的數(shù)目及形態(tài)，能否看到子囊孢子?！　?2)布氏白粉屬(Blumeria)　　該屬是從白粉屬(Erysiphe)劃出來的一個新屬，主要特征是閉囊殼上的菌絲狀附屬絲很短，閉囊殼內(nèi)有多個子囊，分生孢子?；颗虼蟪式蛐?。觀察小麥白粉病()標(biāo)本，注意病狀特點，病部是否有白色粉狀物和小黑點，挑取小黑點制片(或取制備片 106)，鏡檢閉囊殼的形態(tài)，注意附屬絲的長短，然后用解剖針輕壓蓋片，擠壓閉囊殼使之慢慢破裂，注意觀察其內(nèi)子囊的數(shù)目及形態(tài)，能否看到子囊孢子?！　?3)單絲殼屬(Sphaerotheca)　　觀察薔薇白粉病()標(biāo)本，注意癥狀特點，制片(或取制備片 13111)鏡檢閉囊殼及附屬絲，注意附屬絲是否為菌絲狀，閉囊殼內(nèi)子囊的數(shù)目等特點?！　?4)叉絲殼屬(Microsphaera)　　取核桃白粉病()和丁香白粉病()標(biāo)本，觀察癥狀特點。自丁香白粉病葉上挑取小黑點制片( 或取核桃白粉病菌制備片 141 或取丁香白粉病菌制備片 109)鏡檢閉囊殼和附屬絲，注意附屬絲頂端有數(shù)回二叉狀分枝，閉囊殼內(nèi)子囊多數(shù)的特點?！　?5)叉絲單囊殼屬(Podosphaera)　　取蘋果白粉() 和山楂白粉病() 標(biāo)本，觀察病害的癥狀特點，自山楂白粉病葉上挑取小黑點制片鏡檢閉囊殼和附屬絲，注意附屬絲剛直，頂端一次或數(shù)次整齊的叉狀分枝，閉囊殼內(nèi)產(chǎn)生一個子囊特點?！　?6)球針殼囊 (Phyllactinia)　　取桑里白粉病()和梨白粉病標(biāo)本觀察癥狀特點，并制片(或取制備片)鏡檢附屬絲的形態(tài)，注意附屬絲生在閉囊殼的赤道部位，剛直，基部膨大呈球形，閉囊殼內(nèi)子囊多個?！　?7)鉤絲殼屬 (Uncinula)37 / 66　　取榆樹白粉病()和葡萄白粉病()標(biāo)本觀察癥狀特點，并制片鏡檢38 / 66閉囊殼及附屬絲，注意閉囊殼內(nèi)子囊多數(shù)，附屬絲頂端卷曲呈鉤狀或螺旋狀。39 / 66　　2 球殼目(Sphaeriales)40 / 66　　球殼目真菌的子囊果為真正的子囊殼，有真正的孔口，孔口乳突狀或長筒狀，子囊有41 / 66圓形、棍棒形、紡錘形，一般排列成子實層，子囊間大都有側(cè)絲，也有的早期消解或沒有，42 / 66球殼菌一般都有很發(fā)達(dá)的分生孢子階段。43 / 66　　有些分類系統(tǒng)將形成子囊殼的真菌，分為許多目，但究竟分為幾個目意見很不一致。44 / 66考慮到有些分目的特征難于掌握，界線并不很清楚，還有屬于末定的中間類型，所以不如45 / 66化繁為簡都?xì)w納入球殼目。球殼目真菌大多是腐生的，其中也有不少是寄生的，以下各屬46 / 66都可引起重要的植物病害。47 / 66　　(1)長喙殼屬(Ceratocystis)　　取甘薯黑疤病()標(biāo)本，觀察癥狀特點，注意病斑是否凹陷?其上是否有毛刺狀物? 毛刺狀物為何物? 挑取毛刺狀物少許制片(或取其制備片 118)鏡檢，觀察子囊殼是否呈燒瓶狀? 啄的長度約為子囊殼直徑的幾倍?孔口上是否有口須?能否看見子囊孢子?形態(tài)如何? 為什么看不見子囊 ?　　(2)小叢殼屬 (Glomerella)　　取蘋果炭疽病()、菜豆炭疽病() 標(biāo)本，觀察癥狀特點，注意癥斑是否凹陷，其上是否有小黑點長出，小黑點為何物?有性階段在我國自然情況下很少發(fā)現(xiàn)，取蘋果炭疽病菌制備片鏡檢，觀察子囊的形態(tài)，著生部位，殼外是否有毛狀菌絲?能否見到子囊和子囊孢子?！　?3)黑腐皮殼屬(Valsa)　　取蘋果腐爛病()標(biāo)本注意觀察發(fā)病部位，病斑形態(tài)顏色氣味，小黑點大小及疏密程度等特點，取帶小黑點的小塊病皮組織切片(或取蘋果腐爛病菌的制備片 121)鏡檢子囊殼的形狀，顏色，著生部位及子囊殼和子囊孢子的形態(tài)?！　?4)綠核菌屬 (擬黑粉菌屬，Ustilagi