【正文】 第八章 食品安全檢測技術(shù) 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 實驗室儀器檢測技術(shù) 第三節(jié) 快速檢測技術(shù) ? 食品安全的檢測對象： 農(nóng)藥、獸藥、生物毒素、食品添加劑、非食用添加劑、違禁成分、持久性有機污染物、加工產(chǎn)物、致病菌 …. ? 食品安全檢測技術(shù)分類 ： 儀器分析 ，化學(xué)分析，生化分析（ 免疫分析、生物芯片、 PCR） 定性、定量、在線監(jiān)測 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 實驗室儀器檢測技術(shù) 樣品采集 提取凈化 索氏提取、液－液、固－液、 微波、超聲、柱層析等 儀器分析 根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì) 選擇不同方法 儀器方法的檢測流程 儀器檢測技術(shù) 痕量無機物定量 無機元素形態(tài)分析 氣相色譜或液相色譜 — 電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用 電感耦合等離子體質(zhì)譜 (ICPMS） 原子發(fā)射光譜 （ AES） 原子吸收光譜 （ AAS） 毛細(xì)管電泳 — 質(zhì)譜 （ CEMS） 氣相色譜 — 串聯(lián)質(zhì)譜 (GCMS/MS) 色譜—質(zhì)譜聯(lián)用 高效液相色譜 — 串聯(lián)質(zhì)譜 （ LCMS/MS） 高效液相色譜 — 質(zhì)譜 （ LCMS） 氣相色譜 — 質(zhì)譜 （ GCMS） 色譜 液相色譜 氣相色譜 色譜分析法的歷史 ? 俄國植物學(xué)家 Tswett于 1901年發(fā)現(xiàn)：利用吸附原理分離植物色素。 ? 1906年 Tswett 創(chuàng)立 chromatography”—“色譜法 ” 新名詞； ? 1907年在德國生物會議上第一次向世界公開展示顯現(xiàn)彩色環(huán)帶的柱管； ? 1930年 。 ?1935年 Adams and Holmes 發(fā)明了苯酚 甲醛型離子交換樹脂， 進(jìn)一步發(fā)明了離子色譜 ?1938年 Izmailov 發(fā)明薄層色譜 ?1941年 Martin amp。 Synge 發(fā)明了液 液分配色譜 ?1944年 Consden,Gordon amp。 Martin 發(fā)明紙色譜 ?1952年 Martin amp。 Synge 發(fā)明氣 液色譜 ?1953年 Janak發(fā)明氣 固色譜 ?1954年 Ray發(fā)明熱導(dǎo)檢測器 ?1955年世界第一臺商品化氣相色譜儀 ?1957年 Martin amp。 Golay 發(fā)明毛細(xì)管色譜 ?1959年 Porath amp。 Flodin 發(fā)明凝膠色譜 ?1960年液相色譜技術(shù)完善 色譜分析法的歷史 色譜法的特點 ? 高選擇性 ? 分離單組份定性定量 ? 高效能 ? 高靈敏度 ? 檢出限量低至 1011 ，適于微量和痕量分析。 一、氣相色譜分析 ? 系統(tǒng)構(gòu)成： 氣路系統(tǒng)，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測系統(tǒng) ? 工作原理： 樣品高溫瞬間汽化 色譜柱分離 檢測 ? 適用： 易揮發(fā)的小分子有機物 難揮發(fā)性成分經(jīng)衍生化檢測 氣相色譜 分離系統(tǒng) ? 色譜柱：填充柱，毛細(xì)管柱 ? 色譜柱選擇： 按樣品極性 弱極性樣品，可選 OV1， SE30， OV101， SE52， SE54 中極性樣品，可選 OV17， OV1701， XE60，OV225， OV210 極性樣品，可選 PEG20M,FFAP,OV275,DEGS 氣相色譜 檢測系統(tǒng) ? 氫火焰離子化檢測器（ FID）：破壞型，含碳的有機物 ? 電子捕獲檢測器（ ECD ）：非破壞型，選擇性 電負(fù)性強的化合物 ? 火焰光度檢測器（ FPD ）：破壞型，選擇性 含硫磷的化合物 ? 熱導(dǎo)池檢測器（ TCD ）：非破壞型，選擇性 永久性氣體 ? 反式脂肪酸的檢測（衍生， FID) ? 苯，氯苯，氯酚類（直接進(jìn)樣， FID） ? 有機氯農(nóng)藥（ ECD) ? 有機磷農(nóng)藥（ FPD) 氣相色譜在食品安全檢測中的應(yīng)用 ?氣相色譜分離與質(zhì)譜定性定量結(jié)合，質(zhì)譜相當(dāng)于氣相色譜的檢測器。 1. 對食品中殘留物進(jìn)行分析 MS是一個通用型檢測器，對大多數(shù)有機化合物都有比較好的響應(yīng)，根據(jù)特征離子強度定量。適合大批量農(nóng)殘檢測。 2. 對未知物分析 準(zhǔn)確測定未知組分的相對分子質(zhì)量。 二、氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用分析 ? 食品中 42種農(nóng)藥的氣相色譜 質(zhì)譜選擇離子測定 ? 樣品處理方法 液液萃取 固相萃取聯(lián)用： 樣品中農(nóng)藥經(jīng)二氯甲烷提取后， Envi Carb柱和 Sep Pak NH2柱雙柱凈化，凈化后直接進(jìn)樣分析 ? 色譜條件 色譜柱 : HP 5MS ( 30 m mm ) 。 載氣 : 高純氦氣 , 流量 1 ml/min。 柱溫 : 70℃ , 保持 2 min,以25℃ /min升至 150℃ ,再以 3℃ /min升至 200℃ ,再以 8℃ /min升至 260℃ ,保持 10 min。進(jìn)樣口溫度 : 250℃ 。進(jìn)樣方式 :不分流進(jìn)樣 , min后打開分流閥和隔墊吹掃。 ? 質(zhì)譜條件 離子源 (EI)溫度 : 230℃ ,電子轟擊能量 70 ev,GC MS接口溫度 : 280℃ 。 氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用 分析實例 ? 分析特征量 42種農(nóng)藥的線性范圍 :～ 樣品的加標(biāo)回收率： 89%94%, RSD 10% 方法的最低檢出限： ～ mg/kg ( S/N = 3) ? 檢測農(nóng)藥種類 有機磷、擬除蟲菊酯、有機氯、氨基甲酸酯和除草劑 ? 檢測的樣品種類 肉類，蛋類，乳品，蔬菜和水果 氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用 分析實例 三、高效液相色譜法 高效液相色譜儀的應(yīng)用 分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。 ? 蘇丹紅 ? 三聚氰胺 ? 合成色素 ? 生物毒素 ? 敵敵畏 ? 雙酚 A 四、液質(zhì)聯(lián)用 HLPCMS ? 以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在液相色譜部分分離，經(jīng)質(zhì)譜離子化，質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。 ? 色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢結(jié)合，應(yīng)用廣泛。 ? 適用于高沸點、大分子、 強極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分析。 ? 適于復(fù)雜基質(zhì)樣品 ,特別是食品、生物樣品中的農(nóng)獸藥殘留的定性定量分析。 ? 利于多組分分析。 HLPCMS應(yīng)用 ? 樣品前處理 液液萃取 固相萃?。? 樣品經(jīng)過乙腈和二氯甲烷提取后，過 C18固相萃取柱凈化 ? 色譜條件 色譜柱 : Agilent SB C18 , 211 mm 10 mm, 。 柱溫 : 50 ℃ 。 進(jìn)樣量 : 20μL。 流動相 A: %甲酸 10 mmol/L乙酸銨 。 流動相 B: 乙腈 。 流速 : mL /min。 梯度洗脫條件 : 0～ 4 min, A由 99%變化至 50% , 4～ 15 min, A 由 50%變化至 40%, 15～ 20 min, A由 40%變化至20% , 20～ 25min, A 由 20%變化至 1%, 25～ 30 min, A保持1% , 30～ 35 min, A 由 1%變化至 99%后運行 8 min ? 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用對復(fù)雜食品基質(zhì)中 407種多農(nóng)藥殘留量的測定 高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用 分析實例 ? 質(zhì)譜條件 電離源模式 : 電噴霧離子化 電離源極性 : 正模式 霧化氣 : 氮氣 霧化氣壓力 : 105 離子噴霧電壓 : 4000 V