高中生物 專題2 第5課時(shí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)同步課時(shí)作業(yè) 新人教版選修1-文庫(kù)吧
2024-11-15 06:18 本頁(yè)面
【正文】 在條件改變時(shí)產(chǎn)生新的營(yíng)養(yǎng)體，能直接發(fā)育成新個(gè)體。 (4)消毒與滅菌的常用方法 方法 條件 作用對(duì)象 消 毒 ____ ____ 100℃ ，煮沸 5～ 6 min 殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢 ____ ____ ____ 70～ 75℃ 煮 30 min 或 80℃ 煮 15 min 不耐高溫的液體 ____ ____ ____ 70%的酒精 對(duì)雙手消毒 50%的石炭酸、來(lái)蘇水 對(duì)空氣消毒 一定濃度的乳酸、食醋 通過(guò)熏蒸對(duì)空氣進(jìn)行 消毒 紫外 線法 紫外線照射 30 min 物體表面或空氣中的微生物 滅 菌 ____ ____ 在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒 對(duì)接種環(huán)、接種針或其他金屬工具滅菌，也可以對(duì)試管口、瓶口滅菌 ____ ____ 在干熱滅菌箱內(nèi)， 160～ 170℃ 條件下，加熱 1～ 2 h 耐高溫且需保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用具等 ____ ____ ____ 在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)， 121℃ ， 100 kPa，滅菌 15～ 30 min ____ ____ ____ 30 W 照射 30 min 小型接種室、接種箱等 二、實(shí)驗(yàn)操作 (一 )配制培養(yǎng)基 1．配制原則 (1)____________(根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等 )，如培養(yǎng)基可由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成；生產(chǎn)用培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)，而分類鑒定用培養(yǎng)基內(nèi)必須加入已知化學(xué)成分的物質(zhì)。 (2)____________，注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。 (3)____________，各種微生物適宜生長(zhǎng)的 pH 范圍不同，細(xì)菌 ～ 、 放線菌 ～、真菌 ～ 。 注意 ① 不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求不同，因此，首先根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。 ② 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿足微生物營(yíng)養(yǎng)需要，過(guò)高對(duì)微生物的生長(zhǎng)有抑制作用，另外，培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度比直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比 (C/N)的影響較大。例如，在谷氨酸生產(chǎn)中，當(dāng)培養(yǎng)基中的碳源與氮源的比為 4∶ 1時(shí)，菌體大量繁殖，而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳源與氮源的比為 3∶ 1 時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸合成量大增。 2．配制方法 (以制備牛肉膏蛋白胨固體 培養(yǎng)基為例 ) (1)培養(yǎng)異養(yǎng)菌的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成 培養(yǎng)基組分 提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 牛肉膏 g 碳源、磷酸鹽和維生素 蛋白胨 g 氮源和維生素 NaCl g 無(wú)機(jī)鹽 H2O 定容至 1 000 mL 氫元素、氧元素 (2)實(shí)驗(yàn)流程 提醒 合格的培養(yǎng)基必須滅菌效果好。培養(yǎng)基配制好后，要放在恒溫箱中保溫 1～ 2 d，若無(wú)菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明制備的培養(yǎng)基是合格的。 (二 )純化大腸桿菌 純化大腸桿菌就是為了獲得大腸桿菌的純 種菌落，這需在培養(yǎng)時(shí)，盡量使菌落中的菌體來(lái)自于一個(gè)大腸桿菌的分裂，即這個(gè)菌落的細(xì)菌群體由一個(gè)大腸桿菌繁殖而來(lái)，這就需接種時(shí)盡量接種單個(gè)的大腸桿菌。 1．微生物接種的方法 微生物接種的方法最常用的是 __________和 ______________兩種。 (1)____________通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 ① 將 ________放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。 ② 在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開(kāi)盛有菌液的試管的 ______。 ③ 將試管口通過(guò)酒精燈 的 ________。 ④ 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中， ________一環(huán)菌液。 ⑤ 將試管口通過(guò)酒精燈的火焰，并迅速塞上棉塞。 ⑥ ________將培養(yǎng)皿皿蓋打開(kāi)一條縫隙， ________將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入________，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。 ⑦ 灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端 開(kāi)始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將 ____________的劃線與 ________相連。 ⑧ 將 ____________，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (2)________________則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將 不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。 ① 系列稀釋操作 a．取盛有 9 mL 水的 6 支試管滅菌，并按 101～ 106的順序編號(hào)。 b．用 ________吸取 1 mL培養(yǎng)的菌液，注入 101倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。 c．從 101倍稀
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