23--分解纖維素的細(xì)菌的分離-文庫(kù)吧
2025-07-20 18:13 本頁(yè)面
【正文】 濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中多深？ 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約 10cm左右的土壤中。 選擇培養(yǎng) 增加 纖維素分解菌的 濃度 ，以 確保 能夠從樣品中 分離所需要的微生物 。 ①目的： 說(shuō)明： 分析 “ 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方 ” 可知，該配方中的酵母膏也能夠提供少量的碳源，因此其他微生物也能在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖。只不過(guò)，由于酵母膏的含量極少，因此，只有以纖維素為碳源的微生物才能大量繁殖。 培養(yǎng)基成分分析 培養(yǎng)基組成 提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 纖維素粉 5g 碳源（能源） NaNO3 1g 氮源、無(wú)機(jī)鹽 KCl Na2HPO47H2O KH2PO4 MgSO4 7H2O 無(wú)機(jī)鹽 酵母膏 生長(zhǎng)因子、碳源、氮源 水解酵素 氮素、生長(zhǎng)因子 溶解后，蒸餾水定容至 1000mL 水 提示：自變量為培養(yǎng)基的種類(lèi)，即普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。可用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照 ,或者將纖維素改為葡萄糖。 選擇培養(yǎng) ② 制備選擇培養(yǎng)基： A、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？ 是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無(wú)凝固劑（瓊脂） B、這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？ 有選擇作用，本配方中纖維素作為主要碳源，只有能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。 C、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用 稱(chēng)取土樣 20 g，在 無(wú)菌條件 下加入裝有30 mL培養(yǎng)基的搖瓶中。將搖瓶置于 搖床 上，在 30 ℃ 下振蕩培養(yǎng) 1～ 2 d，至 培養(yǎng)基變混濁 。吸取一定的培養(yǎng)液（約 5 mL），轉(zhuǎn)移至另一瓶新鮮的 選擇培養(yǎng)基 中，以同樣的方法培養(yǎng)到 培養(yǎng)液變渾濁 。 ③操作： 選擇培養(yǎng) 思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題 2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？ 本實(shí)驗(yàn)流程與課題 2的流程的區(qū)別如下。課題 2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠 適應(yīng) 這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到 迅速繁殖 ，而那些 不適應(yīng) 這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被 抑制 ，因此可以起到“濃縮”的作用。 為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？ P29旁欄思考 按照課題 1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋 101～ 107倍。 鑒別纖維素分解菌 的培養(yǎng) 基上 ⑴制備鑒別培養(yǎng)基 : 配方見(jiàn)書(shū)本
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