23--分解纖維素的細(xì)菌的分離-閱讀頁(yè)
2024-08-23 18:13本頁(yè)面
【正文】 活力的大小，實(shí)際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！ 在 產(chǎn)生明顯的透明圈 的菌落，挑取并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在 300C－ 370C培養(yǎng)，可獲得 純化培養(yǎng) 。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。但由于所取土樣的環(huán)境不同，不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的 ________ 含量進(jìn)行定量測(cè)定。 ?根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。 ? 如果將其中的纖維素粉換成 ________，菌落數(shù)____________________________，即可說(shuō)明選擇培養(yǎng)基的作用。7H2O KH2PO4 5 g 1 g g g MgSO4 稀釋涂布平板 ?平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計(jì)算每克樣品中的細(xì)菌數(shù) ? 【 解析 】 (1)因?yàn)槔w維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習(xí)性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。 (3)因?yàn)橄♂屚坎计桨宸ㄒ獙⒕哼M(jìn)行一系列的梯度稀釋，故該法可根據(jù)稀釋體積計(jì)算每克樣品中的細(xì)菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實(shí)驗(yàn)宜采用稀釋涂布平板法。研究人員用化合物 A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物。 ? (2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，還應(yīng)向培養(yǎng)基中加入 ________。 ? 【 解析 】 若篩選到能利用纖維素 (可產(chǎn)生纖維素酶 )的微生物，培養(yǎng)基中加入的化合物 A，應(yīng)為纖維素。 ? 【 答案 】 ?(1)纖維素 碳源 選擇 ?(2)剛果紅 ?(3)① 第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落 ? ②劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染 ? ③稀釋涂布平板 ? 8.（ 2022天津理綜） 淀粉酶可以通過(guò)微生物發(fā)酵生產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)最，請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用誘變育種方法，獲得產(chǎn)生淀粉酶較多的菌株。 ? ②根據(jù)誘發(fā)突變率低和誘發(fā)突變不定向性的特點(diǎn)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 解析：這是一道以誘變育種、選擇培養(yǎng)和鑒別培養(yǎng)等知識(shí)為載體的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題，綜合性強(qiáng)，難度較大。 ? 答案： ? ①主要實(shí)驗(yàn)步驟： ? 第一步：將培養(yǎng)好的生產(chǎn)菌株分兩組。 ? 第二步：制備含淀粉的固體培養(yǎng)基。 ? 第四步：比較兩組菌株菌落周圍透明圈的大小，選出透明圈變大的菌株。 ? b．由于誘發(fā)突變不定向性，誘變組中極少數(shù)菌落周圍的透明圈與對(duì)照組相比變大或
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