凱氏定氮法測(cè)定食品中蛋白質(zhì)-文庫(kù)吧
2025-07-11 20:17 本頁(yè)面
【正文】 方法 時(shí)間 應(yīng)用范圍 優(yōu)缺點(diǎn) 凱氏定氮法 810h 時(shí)間長(zhǎng) 雙縮脲法 2030min 110mg氮 靈敏度低、快速檢測(cè) Folin－酚試 劑法 4060min 5mg氮 靈敏度高、耗時(shí)長(zhǎng)、試劑配制困難 紫外吸收法 考馬斯亮藍(lán)法 510min 515min 50100mg蛋白質(zhì) 0～ 層析柱流出物檢測(cè) 較好，標(biāo)準(zhǔn)曲線有輕微非線性 二、凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)（ 粗蛋白 ） ? 凱氏定氮法 是通過測(cè)出樣品中的總含氮量再乘以相應(yīng)的蛋白質(zhì)系數(shù)而求出蛋白質(zhì)的含量 。 1 樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，其中 碳和氫被氧化為二氧化碳和水 逸 出 2 樣品中的 有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨 與硫酸結(jié)合成硫酸銨 3 加堿蒸餾，使氨蒸出，用 硼酸吸收 后再以標(biāo)準(zhǔn) 鹽酸溶液滴定 消化 蒸餾 吸收、滴定 計(jì)算 第一步：樣品 消化 樣品與濃硫酸加熱消化，硫酸使有機(jī)物脫水并破壞有機(jī)物， C、 H氧化為二氧化碳、水逸出，蛋白質(zhì)分解為氨、與硫酸結(jié)合生成硫酸銨、留在溶液中 對(duì)原子的前處理，使被測(cè)物質(zhì)進(jìn)入溶液中，使不溶變?yōu)榭扇堋⒂袡C(jī)物分解為可溶性無機(jī)物 消化 11 （ 1）消化 總反應(yīng)式： 2NH2（ CH2） 2COOH+13H2SO4 （ NH4） 2SO4+6CO2+12SO2+16H2O 一定要用濃硫
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