《維生素與測定》ppt課件-文庫吧
2025-04-27 13:00 本頁面
【正文】 處理。 維生素 A標(biāo)準(zhǔn)溶液 3 操作步驟 維生素 A極易被光破壞，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在微弱光線下進(jìn)行，或用棕色玻璃儀器。 全國癲癇病醫(yī)院 癲癇病醫(yī)院排名 癲癇病的早期癥狀 鄭州軍海癲癇病醫(yī)院 癲癇病人的壽命 癲癇醫(yī)院排行榜 ： 根據(jù)樣品性質(zhì)，可采用皂化法或研磨法。 ： 適用于維生素 A含量不高的樣品，可減少脂溶性物質(zhì)的干擾，但全部試驗(yàn)過程費(fèi)時(shí)，且易導(dǎo)致維生素 A損失。 ?皂化：根據(jù)樣品中維生素 A含量的不同，稱取 ～ 5g樣品于三角瓶中，加入 10mL 1:1氫氧化鉀及 20～ 40mL乙醇，于電熱板上回流 30min至 皂化完全 為止。 ?提?。? ?洗滌： ?濃縮： 水層 皂化瓶內(nèi)混合物 分液漏斗 1號(hào) 水洗 乙醚洗 振搖，靜置，分層 水層 醚層 分液漏斗 2號(hào) 振搖，靜置，分層 醚層 水層 分液漏斗 3號(hào) 振搖，靜置，分層 醚層 分液漏斗 1號(hào) 提取 振搖，靜置，分層 分液漏斗 1號(hào) 水洗 醚層 水層 KOH溶液洗 振搖，靜置，分層 醚層 KOH溶液層 水洗 振搖，靜置，分層 醚層 水層 振搖，靜置，分層 水洗 醚層 水層 凈化 分液漏斗醚層 乙醚洗滌 水浴蒸餾 減壓抽干 氯仿定容（ 5mL) 無水硫酸鈉 濃縮 研磨法 ：適用于每克樣品維生素 A含量大于 5～ 10μg樣品的測定，如肝的分析。（步驟簡單，省時(shí)，結(jié)果準(zhǔn)確。） ?研磨： 精確稱 2～ 5g樣品，放入盛有 3～ 5倍樣品重量的無水硫酸鈉研缽中，研磨至樣品中水分完全被吸收，并均質(zhì)化。 ?提?。?小心地將全部均質(zhì)化樣品移入帶蓋的三角瓶內(nèi)，準(zhǔn)確加入 50～ 100mL乙醚。緊壓蓋子，用力振搖 2min，使樣品中維生素 A溶于乙醚中。使其自行澄清 (大約需 1～ 2h)，或離心澄清 (因乙醚易揮發(fā)，氣溫高時(shí)應(yīng)在冷水浴中操作。裝乙醚的試劑瓶也應(yīng)事先放入冷水浴中 ) ?濃縮： 取澄清提取乙醚液 2～ 5mL，放入比色管中，在70～ 80℃ 水浴上抽氣蒸干。立即加入 1mL三氯甲烷溶解殘?jiān)? 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 準(zhǔn)確取一定量的維生素 A標(biāo)準(zhǔn)液于 4～ 5個(gè)容量瓶中，以三氯甲烷配制標(biāo)準(zhǔn)系列。 取相同數(shù)量比色管順次取 1mL三氯甲烷和標(biāo)準(zhǔn)系列使用液 1mL，各管加入乙酸酐 1滴，制成標(biāo)準(zhǔn)比色系列。 于 620nm波長處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)吸光度至零點(diǎn)，將其標(biāo)準(zhǔn)比色系列按順序移入光路前，迅速加入 9mL三氯化銻－三氯甲烷溶液。于 6s內(nèi) 測定吸光度。 以吸光度為縱坐標(biāo)，以維生素 A含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。 樣品測定 于一比色管中加入 10mL三氯甲烷，加入 1滴乙酸酐為空白液。 另一比色管中加入 1mL三氯甲烷，其余比色管中分別加入 1mL樣品溶液及 1滴乙酸酐。 其余步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。 4 結(jié)果計(jì)算 1000100??? VmCX（二） HPLC法（ GB/T 12388） 樣品中的維生素 A及維生素 E經(jīng)皂化提取處理后，將其從不可皂化部分提取至有機(jī)溶劑中。用高效液相色譜法 C18反相柱將維生素 A和維生素 E分離，經(jīng)紫外檢測器檢測，并用內(nèi)標(biāo)法定量測定。 最小檢出量分別為 VA： ； α－ E： ； γ－ E： ； δ－ E： 。 2 試劑 無水乙醚、無水乙醇、三氯甲烷等試劑需預(yù)先處理。 維生素 A標(biāo)準(zhǔn)溶液、維生素 E標(biāo)準(zhǔn)溶液 內(nèi)標(biāo)物溶液： 10μ g苯并 [e]芘 /mL 3 儀器和設(shè)備 高壓液相色譜儀帶紫外分光檢測器。 樣品處理 皂化 稱取 1～ 10g樣品 (含維生素 A約 3μg，維生素 E各異構(gòu)體約為 40μg)于皂化瓶中，加 30mL無水乙醇，進(jìn)行攪拌，直到顆粒物分散均勻?yàn)橹埂＜?5mL 10%抗壞血酸 ， 苯并 [e]芘標(biāo)準(zhǔn) 液 ，混勻。加 10mL1:1氫氧化鉀 ，混勻。于沸水浴上回流30min使 皂化 完全。皂化后立即放入冰水中冷卻。 提取 將皂化后的樣品移入分液漏斗中，用 50mL水分2～ 3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。用約
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