維生素與測定ppt課件-wenkub
2023-05-27 13:00:58 本頁面
【正文】 點 ： ①它們都是以其本體的形式或可被機體利用的前體形式存在于天然食物中； ②大多數(shù)維生素不能在體內(nèi)合成，也不能大量儲存于組織，所以必須經(jīng)常由食物供給； ③它們不是構(gòu)成各種組織的原料，也不提供能量； ④雖然每日生理需要量 (僅以 mg或 ug計 )很少，然而在調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝過程中卻起著十分重要的作用。 有些化合物，其活性類似維生素，曾被列入維生素類，通常稱之為“類維生素”，如生物類黃酮、輔酶 Q、肌醇、硫辛酸、對氨基苯甲酸、乳清酸和?；撬岬取? 脂溶性維生素的測定 脂溶性維生素的理化性質(zhì)： 溶解性：不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、苯、乙醚等有機溶劑。 ?動物體內(nèi)具有視黃醇生物活性功能的維生素 A類包括視黃醇、視黃醛、視黃酸等物質(zhì)， 4氧視黃酸、 4羥視黃酸等不具有視黃醇生物活性功能。 維生素 A 的功能： ?維持正常視覺 ?維持上皮的正常生長與分化 ?促進(jìn)生長發(fā)育 ?抑癌作用 ?維持機體正常免疫功能 供給量與來源： ?1989年 RDA中成人每人每天攝入維生素 800ug視黃醇當(dāng)量。 該藍(lán)色物質(zhì)不穩(wěn)定，需在一定時間內(nèi)（ 6秒）用分光光度計于 620nm波長處測定其吸光度。 ： 適用于維生素 A含量不高的樣品，可減少脂溶性物質(zhì)的干擾，但全部試驗過程費時，且易導(dǎo)致維生素 A損失。） ?研磨： 精確稱 2～ 5g樣品，放入盛有 3～ 5倍樣品重量的無水硫酸鈉研缽中，研磨至樣品中水分完全被吸收，并均質(zhì)化。裝乙醚的試劑瓶也應(yīng)事先放入冷水浴中 ) ?濃縮： 取澄清提取乙醚液 2～ 5mL，放入比色管中，在70～ 80℃ 水浴上抽氣蒸干。 于 620nm波長處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)吸光度至零點，將其標(biāo)準(zhǔn)比色系列按順序移入光路前，迅速加入 9mL三氯化銻－三氯甲烷溶液。 另一比色管中加入 1mL三氯甲烷，其余比色管中分別加入 1mL樣品溶液及 1滴乙酸酐。 最小檢出量分別為 VA： ； α－ E： ； γ－ E： ； δ－ E： 。加 5mL 10%抗壞血酸 ， 苯并 [e]芘標(biāo)準(zhǔn) 液 ，混勻。 提取 將皂化后的樣品移入分液漏斗中，用 50mL水分2～ 3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。 洗滌 用約 50mL水洗 分液漏斗中的乙醚層，用 pH試紙檢驗直至水層不顯堿性 (最初水洗輕搖，逐次振搖強度可增加 )。上清液供色譜分析。 分析柱： ultrasphere ODS 5μm， 25cm。 紫外檢測器波長： 300nm。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 維生素 A和維生素 E標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)定方法 取維生素 A和各維生素 E標(biāo)準(zhǔn)液若干微升，分別稀釋至 ，并分別按給定波長測定各維生素的吸光值。 以維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比為縱坐標(biāo)，維生素濃度為橫坐標(biāo)繪制維生素標(biāo)準(zhǔn)曲線，或計算直線回歸方程。 定量：根據(jù)色譜圖求出某種維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，以此值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其含量。如 α、 β、γ胡蘿卜素，其中 β胡蘿卜素效價最高， 每 mg β胡蘿卜素約相當(dāng)于 167ug維生素 A。 測定方法： 薄層色譜、紙色譜、 HPLC 國家標(biāo)準(zhǔn)中采用紙色譜法進(jìn)行測定（ GB/T 12389— 1990） 1. 測定原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡蘿卜素及其他植物色素；以石油醚為展開劑進(jìn)行紙層析，將胡蘿卜素與與其他色素分離；剪下含胡蘿卜素的區(qū)帶，洗脫后于450nm波長下定量測定。 ?重復(fù)提取 2～ 3次，直至提取液無色為止。 石油醚提取液通過盛有 10g無水硫酸鈉的小漏斗，漏入球形瓶， 用少量石油醚分?jǐn)?shù)次洗凈分液漏斗和無水硫酸鈉層內(nèi)的色素，洗滌液并入球形瓶內(nèi)。 洗脫： 待胡蘿卜素與其他色素完全分開后，取出濾紙，自然揮發(fā)干石油醚，剪下位于展開劑前沿的胡蘿卜素層析帶，立即放入盛有 5mL石油醚的具塞試管中，用力振搖，使胡蘿卜素完全溶入溶劑中。 （ 8）結(jié)果計算 1 0 0 011 0 012 ????mVVCX三、維生素 E的測定 維生素 E又稱生育酚，屬于酚類化合物。 2 操作方法 （ 1）樣品處理 稱樣 皂化瓶 維生素 C 無水乙醇 KOH溶液 水 分液漏斗 乙醚
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