維生素與測(cè)定ppt課件-wenkub
2023-05-27 13:00:58 本頁(yè)面
【正文】 點(diǎn) ： ①它們都是以其本體的形式或可被機(jī)體利用的前體形式存在于天然食物中； ②大多數(shù)維生素不能在體內(nèi)合成，也不能大量?jī)?chǔ)存于組織，所以必須經(jīng)常由食物供給； ③它們不是構(gòu)成各種組織的原料，也不提供能量； ④雖然每日生理需要量 (僅以 mg或 ug計(jì) )很少，然而在調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝過(guò)程中卻起著十分重要的作用。 有些化合物，其活性類似維生素，曾被列入維生素類，通常稱之為“類維生素”，如生物類黃酮、輔酶 Q、肌醇、硫辛酸、對(duì)氨基苯甲酸、乳清酸和牛磺酸等。 脂溶性維生素的測(cè)定 脂溶性維生素的理化性質(zhì)： 溶解性：不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、苯、乙醚等有機(jī)溶劑。 ?動(dòng)物體內(nèi)具有視黃醇生物活性功能的維生素 A類包括視黃醇、視黃醛、視黃酸等物質(zhì)， 4氧視黃酸、 4羥視黃酸等不具有視黃醇生物活性功能。 維生素 A 的功能： ?維持正常視覺(jué) ?維持上皮的正常生長(zhǎng)與分化 ?促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育 ?抑癌作用 ?維持機(jī)體正常免疫功能 供給量與來(lái)源： ?1989年 RDA中成人每人每天攝入維生素 800ug視黃醇當(dāng)量。 該藍(lán)色物質(zhì)不穩(wěn)定，需在一定時(shí)間內(nèi)（ 6秒）用分光光度計(jì)于 620nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。 ： 適用于維生素 A含量不高的樣品，可減少脂溶性物質(zhì)的干擾，但全部試驗(yàn)過(guò)程費(fèi)時(shí)，且易導(dǎo)致維生素 A損失。） ?研磨： 精確稱 2～ 5g樣品，放入盛有 3～ 5倍樣品重量的無(wú)水硫酸鈉研缽中，研磨至樣品中水分完全被吸收，并均質(zhì)化。裝乙醚的試劑瓶也應(yīng)事先放入冷水浴中 ) ?濃縮： 取澄清提取乙醚液 2～ 5mL，放入比色管中，在70～ 80℃ 水浴上抽氣蒸干。 于 620nm波長(zhǎng)處，以三氯甲烷調(diào)節(jié)吸光度至零點(diǎn)，將其標(biāo)準(zhǔn)比色系列按順序移入光路前，迅速加入 9mL三氯化銻－三氯甲烷溶液。 另一比色管中加入 1mL三氯甲烷，其余比色管中分別加入 1mL樣品溶液及 1滴乙酸酐。 最小檢出量分別為 VA： ； α－ E： ； γ－ E： ； δ－ E： 。加 5mL 10%抗壞血酸 ， 苯并 [e]芘標(biāo)準(zhǔn) 液 ，混勻。 提取 將皂化后的樣品移入分液漏斗中，用 50mL水分2～ 3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。 洗滌 用約 50mL水洗 分液漏斗中的乙醚層，用 pH試紙檢驗(yàn)直至水層不顯堿性 (最初水洗輕搖，逐次振搖強(qiáng)度可增加 )。上清液供色譜分析。 分析柱： ultrasphere ODS 5μm， 25cm。 紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)： 300nm。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 維生素 A和維生素 E標(biāo)準(zhǔn)濃度的標(biāo)定方法 取維生素 A和各維生素 E標(biāo)準(zhǔn)液若干微升，分別稀釋至 ，并分別按給定波長(zhǎng)測(cè)定各維生素的吸光值。 以維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比為縱坐標(biāo)，維生素濃度為橫坐標(biāo)繪制維生素標(biāo)準(zhǔn)曲線，或計(jì)算直線回歸方程。 定量：根據(jù)色譜圖求出某種維生素峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值，以此值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其含量。如 α、 β、γ胡蘿卜素，其中 β胡蘿卜素效價(jià)最高， 每 mg β胡蘿卜素約相當(dāng)于 167ug維生素 A。 測(cè)定方法： 薄層色譜、紙色譜、 HPLC 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中采用紙色譜法進(jìn)行測(cè)定（ GB/T 12389— 1990） 1. 測(cè)定原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡蘿卜素及其他植物色素；以石油醚為展開(kāi)劑進(jìn)行紙層析，將胡蘿卜素與與其他色素分離；剪下含胡蘿卜素的區(qū)帶，洗脫后于450nm波長(zhǎng)下定量測(cè)定。 ?重復(fù)提取 2～ 3次，直至提取液無(wú)色為止。 石油醚提取液通過(guò)盛有 10g無(wú)水硫酸鈉的小漏斗，漏入球形瓶， 用少量石油醚分?jǐn)?shù)次洗凈分液漏斗和無(wú)水硫酸鈉層內(nèi)的色素，洗滌液并入球形瓶?jī)?nèi)。 洗脫： 待胡蘿卜素與其他色素完全分開(kāi)后，取出濾紙，自然揮發(fā)干石油醚，剪下位于展開(kāi)劑前沿的胡蘿卜素層析帶，立即放入盛有 5mL石油醚的具塞試管中，用力振搖，使胡蘿卜素完全溶入溶劑中。 （ 8）結(jié)果計(jì)算 1 0 0 011 0 012 ????mVVCX三、維生素 E的測(cè)定 維生素 E又稱生育酚，屬于酚類化合物。 2 操作方法 （ 1）樣品處理 稱樣 皂化瓶 維生素 C 無(wú)水乙醇 KOH溶液 水 分液漏斗 乙醚
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