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《細胞培養(yǎng)基礎知識》ppt課件-文庫吧

2025-04-18 03:43 本頁面


【正文】 板震蕩器 ? 液氮 罐 ? 自動雙重純水蒸餾器 , 純水儀 ? 耗材:培養(yǎng)瓶 , 吸管 , 電動吸引器 , 培養(yǎng)板 , 凍存管 ?壓力蒸汽消毒器:濕熱消毒,用途廣 ?電熱干燥箱:干熱消毒( 160 ℃ , 2小時)。主要用干玻璃 ?器皿消毒 ?濾器:過濾除菌:大多數(shù)培養(yǎng)用液,如人工合成培養(yǎng)基、血清、 ?酶液等均采用濾過法除菌 ?超凈工作臺:為細胞操作提供無菌環(huán)境 ?紫外燈 :紫外線消毒。 主要用于培養(yǎng)室空氣、操作臺、塑料 ?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板等表面消毒 超凈臺 ?超凈工作臺的工作原理是利用鼓風機驅(qū)動空氣遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒,使空氣得到凈化。凈化空氣徐 徐通過工作臺面,使工作臺內(nèi)構成無菌環(huán)境。 三洋滅菌器 濾器 CO2培養(yǎng)箱 ?CO2培養(yǎng)箱設定的條件為 37 ℃ , 5% CO2 。 ?使用 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)細胞時應注意的問題: ①用螺旋口瓶培養(yǎng)細胞時,需將瓶蓋微松,以保證通氣。 ②保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈。定期消毒 (90 ℃ ,14 h)。 ③箱內(nèi)火菌蒸餾水 3000毫升蒸餾水槽中以保持箱內(nèi)濕度,避兔培養(yǎng)液蒸發(fā)。 自動雙重純水蒸餾器 純水儀 微孔板震蕩器 酶標儀 培 養(yǎng) 板 培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)皿 移液管,移液槍 ? 常用玻璃器皿清洗 ? 浸泡(自來水)、刷洗(洗衣粉)、酸泡( 24小時)、 ? 流水沖洗、蒸溜水浸泡和沖洗、 50℃ 烘干 清潔液的配制 2 細胞培養(yǎng)用液的配制 水:新鮮配置的三蒸水或去離子水 平衡鹽溶液:無 Ca2+、 Mg2+的緩沖液 PBS: NaCl g KCl g g KH2PO4 加水至 1000 ml ? 消化液 : ? 胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵 ,除去細胞間粘蛋白及糖蛋白 , 影響細胞骨架 , 從而使細胞分離 。 ? 胰蛋白酶液濃度 越高 , 作用越強 , 但超過一定限度會損傷細胞 。 ? 胰蛋白酶是一種黃白色 粉末 , 用無 Ca2+、 Mg2+的PBS緩沖液配制常用的胰蛋白酶液濃度是 % 。 用濾器過濾除菌 。 ? 胰蛋白酶液消化時間: 210分鐘 。 ? 用含血清培養(yǎng)液終止其對細胞的消化作用 培養(yǎng)基 ? 培養(yǎng)基(培養(yǎng)液)是維持體外細胞生存和生長的溶液,分天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。 ? 天然培養(yǎng)基 : ? 天然培養(yǎng)基有血清、血漿、和組織提取液(如雞胚和牛胚浸液)。 ? 優(yōu)點:營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果好 ? 缺點:來源受限。 ? 成分復雜, 影響對某些實驗產(chǎn)物的提取和實驗結(jié)果的分析 。 ?
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