【正文】 本指南主要是評(píng)價(jià)線性關(guān)系，盡可能不受精密度和準(zhǔn)確度的影響。精密 度很差時(shí)，會(huì)妨礙線性關(guān)系的評(píng)價(jià)，因而重復(fù)性的檢查也包括在內(nèi)。 實(shí)驗(yàn)過程中會(huì)用到一些基質(zhì)，盡可能與分析標(biāo)本的類型一致（血清、血漿、尿液等）。 本指南要求實(shí)驗(yàn)室設(shè)定非線性誤差的目標(biāo)，只提供基本概念，沒有特定的要求。 2． 介紹 2． 1 目的 本指南的目的旨在提供一種定量測(cè)量程序線性評(píng)價(jià)的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。首先要確定一種方法的非線性濃度范圍，及在每個(gè)濃度水平上非線性的程度。本指南強(qiáng)調(diào)任何用戶有必要確定自己對(duì)線性程度的要求，或非線性的允許誤差范圍。評(píng)價(jià)線性覆蓋范圍的 Global 檢驗(yàn)（如 LoF檢驗(yàn)）不是特別重要。 Global 檢驗(yàn) 僅僅表明統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非線性存在，不能顯示非線性存在哪里，也不能顯示誤差的大小。線性試驗(yàn)有助于評(píng)價(jià)偏倚的大?。ǖ蔷€性并不是偏倚的全部），偏倚是測(cè)量誤差的一部分。 用戶必須定一個(gè)目標(biāo)，確定自己所要求的測(cè)量誤差、偏倚、隨機(jī)誤差（不精密度）、非特異性（干擾）的大小。 EP6A僅僅是指導(dǎo)用戶的一系列方法評(píng)價(jià)文件中的一種，請(qǐng)參照最近發(fā)布的 EP21文件 臨床實(shí)驗(yàn)方法的總分析誤差。 本文件適用范圍很寬，當(dāng)需建立一種方法的線性范圍時(shí)，我們需要測(cè)試一個(gè)很寬的分析濃度范圍，然后逐漸縮小直到有可接受的線性范 圍。如果用戶在自己的實(shí)驗(yàn)室要驗(yàn)證已知的線性范圍（廠家提供），測(cè)量時(shí)僅覆蓋該范圍即可。操作方法大體相似，不同的僅僅是分析的濃度水平和重復(fù)的次數(shù)。 2． 2 方法選擇 有很多的方法用來評(píng)價(jià)線性范圍。 Kroll和 Emancipator提出一種基于直線回歸方程與多項(xiàng)式方程比較的方法，用殘差（即每一個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)到回歸直線的差值）來定義線性。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是非?？煽浚一趪?yán)格的科學(xué)原理。如果得出線性適合（ 一次多項(xiàng)式 ）則說明測(cè)量方法是線性的。 但這種方法并不簡(jiǎn)單，用戶必須對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（多用表格設(shè)計(jì)）進(jìn)行多次多項(xiàng)式回歸。這種 9 方法 被 Kroll、 Praestgard、 Mechaliszyn和 Styer進(jìn)一步改進(jìn)，并被美國病理學(xué)家學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)室間方法比對(duì)所采用。 Krouwer和 Schlain提出一種通用的方法，即 LPO（ last point off the line），需要多次計(jì)算最小二乘法方程。 Tholen提出一種圖解連同回歸線性失擬誤差與目標(biāo)百分比對(duì)比的評(píng)價(jià)方法，對(duì)連續(xù)線性片斷進(jìn)行簡(jiǎn)單的斜率分析。 2． 3 定義 允許偏差 /誤差 (Allowable difference/allowable error)： 在一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)中 ， 來自各種因素的 ， 用戶能夠承受并能滿足醫(yī)學(xué)要求的分析偏差的大小。通常單次檢測(cè)的允許誤差的范圍用標(biāo)本測(cè)量靶值 177。 允許誤差來表示。 分析物 (Analyte)： 具有某一名稱的定量測(cè)定成分 （ ISO FDIS 17511） 分析結(jié)果（ Analytical result） ： 在本文件中指一個(gè)試驗(yàn)標(biāo)本的最后測(cè)量結(jié)果。大多用濃度或活性表示。 偏倚（ Bias） ：測(cè)量值與公認(rèn)參考值之間的差異。注：一般情況下，偏倚指公認(rèn)的方法（決定性，參考性或指定方法）與比較方法的測(cè)量結(jié)果的差值，用數(shù)值或百分?jǐn)?shù)表示。 自變量 （ Input variable） ： 非獨(dú)立 變量 （ independence variable）， 與因變量 （ output variable） 相對(duì)應(yīng) ， 用 X表示 ， 它的值點(diǎn)在 X軸上。 截距（ Intercept/Y intercept 1） ：表示一個(gè)函數(shù)與數(shù)軸的交叉點(diǎn)，當(dāng)一個(gè)變量為 0時(shí)另一個(gè)變量的值。如 y截距表示當(dāng) x為 0時(shí)的 y值大小。 最小二 乘法 （ Least square regression） ： 一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ， 由所有數(shù)據(jù)點(diǎn)得到的直線或曲線上每個(gè)點(diǎn)到 X軸 （ 即與 Y軸平行 ） 的垂直距離的平方和達(dá)到最小。 線性方程（ Linear squation） ：代表線性關(guān)系的方 程式，典型的線性關(guān)系方程表達(dá)式為： Y=a+bX，X和 Y分別為自變量和應(yīng)變量， b為斜率， a為 Y軸截距。 線性范圍（ Linear range）： 在本指南中，指覆蓋檢測(cè)系統(tǒng)可接受線性關(guān)系的范圍，非線性誤差小于設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。 線性（ Linearity） ：在檢測(cè)樣本時(shí)，可以直接按比例得出分析物含量（一定范圍內(nèi)）的能力。 線性回歸 （ Linear regression） ： 待測(cè)變量（非獨(dú)立）的浮動(dòng)經(jīng)?？梢裕ú糠值兀w因于其他變量（獨(dú)立），回歸的方法量化了獨(dú)立變量和非獨(dú)立變量之間的關(guān)系。線性回歸其 因變量 與各 回歸參數(shù) 之間為 線性關(guān)系 。 測(cè)量誤差 （ Measurement error） ： 測(cè)量結(jié)果減去真值 （ 或公認(rèn)的參考值 ） 的大小。 測(cè)量程序 （ Measurement procedure） ： 一系列操作規(guī)程，根據(jù)給定的方法，用于特定的檢測(cè)。 測(cè)量范圍 （ Measurement range） ： 指測(cè)量?jī)x器的誤差在特定范圍內(nèi)的 一系列 分析物的測(cè)量結(jié)果 ，以前稱為可報(bào)告范圍。 10 應(yīng)變量（ Output variable） ： 獨(dú)立變量 ， 與自變量相對(duì)應(yīng)。 多項(xiàng)式回 歸 （ Polynomial regression） ： 不同 階 別的多次最小二乘法回歸 Y=a+b1X 一次多項(xiàng)式或者擬合直線 Y=a+b1X+b2X2 二次多項(xiàng)式 Y= a+b1X+b2X2+b3X3 三次多項(xiàng)式 重復(fù)性 （ Repeatability） ： (測(cè)量?jī)x器 )在相同的測(cè)量條件下，對(duì)同一樣品多次測(cè)量，測(cè)量?jī)x器重復(fù)給出十分相近示值的能力 ， 重復(fù)性可以用示值的離散特性定量表示。 必須在相 同的測(cè)量程序、相同的儀器設(shè)備、相同的位置、在較短的時(shí)間內(nèi)重復(fù)等。 回歸標(biāo)準(zhǔn)誤 （ Standard deviation of y about a regression/standard error of regression， SDy,x)： 獨(dú)立變量 Y與預(yù)期變量 X相對(duì)應(yīng)的可估計(jì)變量 Y’平均值之間的差量檢測(cè)大小。 檢測(cè)系統(tǒng)（ Testing system） ：包括測(cè)量過程的所有因素，如儀器、樣本、人員、試劑、輔助材料和操作等，也包括樣本類型、測(cè)試溫度、濕度等。 準(zhǔn)確度（ Trueness） ：一組連續(xù)測(cè)量結(jié)果的平均值與 公認(rèn)參考值的接近程度。準(zhǔn)確度一般用測(cè)量偏倚（數(shù)字）來表示，準(zhǔn)確度與偏倚呈相反關(guān)系。 2． 4 實(shí)驗(yàn)方法的概述 本指南所用的多項(xiàng)式回歸最初由 Kroll等提出，有嚴(yán)密的統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，且容易用表格來完成?？梢詤⒖家话愕慕y(tǒng)計(jì)學(xué)文獻(xiàn)、書籍或統(tǒng)計(jì)軟件。 多項(xiàng)式評(píng)價(jià)線性首先假設(shè)數(shù)據(jù)組呈非線性，所有數(shù)據(jù)點(diǎn)能用直線或曲線的數(shù)學(xué)方程來表達(dá)，隨機(jī)誤差在可接受范圍內(nèi)，則不論最適曲線是直線與否，都不影響（線性范圍內(nèi)）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)點(diǎn)之間 其他濃度反應(yīng)狀況，并能得到連續(xù)可靠的結(jié)果 。 收集數(shù)據(jù)時(shí)要求有 5到 9個(gè)不同濃度的標(biāo)本多次測(cè)量，不同的濃度標(biāo)本 之間稀釋關(guān)系已知，不要求各濃度之間呈等距的。 本質(zhì)上，多項(xiàng)式回歸是設(shè)計(jì)用來評(píng)價(jià)曲線的反應(yīng)模型，因而它適合于評(píng)價(jià)非線性。這種方法由兩部分組成，第一部分是檢查非線性模型是否比線性模型更適合于數(shù)據(jù)組；第二部分是評(píng)價(jià)最適非線性模型與線性模型的差值（每個(gè)點(diǎn)）是否小于該方法所允許的偏差。 3． 1 熟悉儀器設(shè)備 評(píng)價(jià)分析程序的實(shí)驗(yàn)室人員必須十分熟悉儀器的操作、質(zhì)量控制和定標(biāo)方法，以及正確的收集樣本等，廠商提供的培訓(xùn)是非常有用的。儀器設(shè)備在實(shí)驗(yàn)室必須安裝和使用一段時(shí)間，實(shí)驗(yàn)室人員能理解和正確操作儀器。 3． 2 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)盡可能在較短的時(shí)間內(nèi)收集，如可能，單個(gè)分析試驗(yàn)最好在一天內(nèi)做完。 11 4． 實(shí)驗(yàn)條件評(píng)價(jià) 建立一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的線性范圍比驗(yàn)證線性范圍來說，所需的實(shí)驗(yàn)條件是不同的，前者需要更多的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本和重復(fù)次數(shù)，后者只需一系列已知濃度或相互間稀釋關(guān)系的標(biāo)本，測(cè)量順序都是隨機(jī)的。 4． 1 標(biāo)本要求 線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)要求有足夠量的標(biāo)本，要能滿足五個(gè)或更多濃度標(biāo)本的稀釋和測(cè)量。當(dāng)驗(yàn)證線性范圍時(shí)，需要 5到 7個(gè)能覆蓋整個(gè)線性范圍（廠家提供）的不同濃度的標(biāo)本，每個(gè)濃度水平測(cè)量?jī)纱巍? 當(dāng)一個(gè)新的測(cè)量方法（或廠家或?qū)嶒?yàn)室改良一個(gè) 實(shí)驗(yàn)方法時(shí)）需要建立新的線性范圍時(shí)，需要 7到 11能覆蓋預(yù)期的測(cè)量范圍的不同濃度的標(biāo)本。生產(chǎn)商希望有更多的測(cè)量點(diǎn)（比預(yù)期的線性范圍寬 20～ 30%），這樣能檢測(cè)到 “拐點(diǎn) ”，就能確定更寬的線性范圍。根據(jù)不精密度的大小，每個(gè)濃度水平測(cè)量 2～ 4次。 五個(gè)測(cè)量點(diǎn)是多元回歸方法評(píng)價(jià)線性范圍時(shí)的最低要求，更多的測(cè)量點(diǎn)能更精確的評(píng)價(jià)線性，得到的線性范圍更寬。 本指南推薦用高值和低值濃度的樣本按比例精確配成等間距的不同濃度樣本，但等間距不是本方法所必需的。只要各標(biāo)本間的相互關(guān)系已知，配成特殊濃度的樣本也是可以接受的。在本評(píng)價(jià)實(shí) 驗(yàn)中，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用移液管精確地吸取高低值濃度標(biāo)本配成的混合物的誤差比單個(gè)的稱量法配制不同濃度的標(biāo)本的誤差要小。在吸取小容量標(biāo)本時(shí)要小心，用正位移液管比較有用。5到 11個(gè)濃度水平的等間距標(biāo)本的配制方法見附錄 A。 如果用到商品化的體外診斷試劑，需將廠家附上。在全自動(dòng)、半自動(dòng)和手工化學(xué)操作系統(tǒng)上，這些試劑可用于定標(biāo)、驗(yàn)證測(cè)量范圍和線性等。 4． 2 基質(zhì)效應(yīng) 用于驗(yàn)證線性范圍的標(biāo)本類型應(yīng)與臨床測(cè)試所用的標(biāo)本類型相類似，所有標(biāo)本應(yīng)不含廠家所標(biāo)定的干擾因素（如溶血、黃疸、脂血等）。如果上述條件不可避免，則應(yīng)在最后的報(bào)告 中注明在評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中所用的標(biāo)本處理方法或基質(zhì)類型。注意：標(biāo)本處理時(shí)加入不同的摻雜物，與人的標(biāo)本相比，會(huì)造成不同的影響。 4． 3 可接受基質(zhì)體系 如果多種基質(zhì)標(biāo)本類型（如尿液、血清、腦脊液、全血等）在實(shí)驗(yàn)中用到，則應(yīng)評(píng)價(jià)每種基質(zhì)類型。請(qǐng)參考最新版本的 NCCLS的 EP14文件 —基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)。以下為可能用到的樣本類型，注意在一些特殊方法時(shí)要選擇合適的基質(zhì)。 病人標(biāo)本 12 理想的樣本類型是病人的標(biāo)本，用接近于預(yù)期的可報(bào)告范圍上限和下限（或測(cè)量低限）的兩個(gè)分析濃度的標(biāo)本配成所有標(biāo)本濃度。由于我們測(cè)定的病人標(biāo)本 的最終濃度代表驗(yàn)證的范圍，因而最后的高和（或）低值濃度需要調(diào)整才能達(dá)到期望的范圍。 用推薦的稀釋液稀釋病人樣本 用于稀釋病人高濃度樣本的液體對(duì)測(cè)量結(jié)果是有影響的，只有廠家推薦的或