【正文】 提出一種基于直線回歸方程與多項(xiàng)式方程比較的方法，用殘差（即每一個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)到回歸直線的差值）來定義線性。 本文件適用范圍很寬，當(dāng)需建立一種方法的線性范圍時(shí)，我們需要測試一個(gè)很寬的分析濃度范圍，然后逐漸縮小直到有可接受的線性范 圍。 Global 檢驗(yàn) 僅僅表明統(tǒng)計(jì)學(xué)上的非線性存在，不能顯示非線性存在哪里，也不能顯示誤差的大小。 2． 介紹 2． 1 目的 本指南的目的旨在提供一種定量測量程序線性評價(jià)的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。 本指南主要是評價(jià)線性關(guān)系，盡可能不受精密度和準(zhǔn)確度的影響。標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)是防止所有的病原體，比僅防止血源性病原體更廣泛。 Measurement error/error of measurement(測量誤差 )代替 total error(總誤差 )，指測量值與真值的差值。 為使 ISO與 NCCLS在一些術(shù)語上保持一致 ， 下列術(shù)語用在 EP6A文件中 ： Trueness(準(zhǔn)確度 )指多次測量的平均值和分析物的真實(shí)值的接近程度。協(xié)調(diào)一致是一個(gè)在認(rèn)知、理解、解釋差異各方面逐步達(dá)到全球一致的過程。 這種方法可以： 1）在每個(gè)水平上判斷非線性度 ， 2）在評價(jià)非線性時(shí)可以控制不可接受的精密度， 3）提供一種可測試的統(tǒng)計(jì)模型 ， 4）在很多軟件上可以進(jìn)行編程。它們都有兩種統(tǒng)計(jì)模型（線性與非線性），都是評價(jià)那種是最可能的模型。這些方差的比值即為 LOF檢驗(yàn)的基礎(chǔ)。 本版本說明： 與以前版本相比 EP6A最大的改變是統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的改進(jìn)。然而，響應(yīng)物的劑量效應(yīng)曲線可以通過合適的轉(zhuǎn)換變成數(shù)學(xué)上的線性關(guān)系，而且對于一種分析方法來說，只有兩點(diǎn)之間呈線性關(guān)系時(shí)，才能進(jìn)行計(jì)算結(jié)果。 4 目 錄 摘要………………………………………………………………………………………………… i 委員會成員……………………………………………………………………………………… iii 前言……………………………………………………………………………………………… vii 1 范圍 2 介紹 2． 1 目的 2． 2 選擇方法 2． 3 定義 2． 4 實(shí)驗(yàn)方法的概述 3 時(shí)間要求 3． 1 儀器熟悉階段 3． 2 實(shí)驗(yàn)階段 4 實(shí)驗(yàn)條件的評價(jià) 4． 1 樣本要求 4． 2 基質(zhì)效應(yīng) 4． 3 可接受的基質(zhì)體系 4． 4 樣本中添加物的選擇 4． 5 分析順序 4． 6 分析范圍 4． 7 樣本準(zhǔn)備 和濃度計(jì)算 4． 8 數(shù)據(jù)收集 4． 9 臨床上幾個(gè)重要的濃度水平 5 線性范圍 驗(yàn)證 —數(shù)據(jù)評估 5． 1 初步的數(shù)據(jù)檢查 5． 2 離群值檢查 5． 3 線性范圍的確定 5． 4 考慮隨機(jī)誤差 6 線性 范圍 發(fā)布 6． 1 圖表方法 6． 2 發(fā)布 線性范圍 的確認(rèn) 5 6． 3 允許誤差與設(shè)定目標(biāo) 6． 4 其它誤差的影響 6． 5 假設(shè) 6． 6 發(fā)布線性聲明的指導(dǎo)方針 文 獻(xiàn) 附錄 A 樣本稀釋方法 附錄 B t值表 附錄 C 舉例 相關(guān)工作組和評論摘要 相關(guān)工作組和委員評論摘要 質(zhì)量系統(tǒng)方法 相關(guān) NCCLS出版物 6 前 言 當(dāng)某分析物濃度或活性的測量值與真值成數(shù)學(xué)上的直線關(guān)系時(shí)，我們認(rèn)為這種定量測定方法是線性的。強(qiáng)烈鼓勵讀者以任何形式、在任何時(shí)間對任何 NCCLS文件 提 出 評 論 。因而，遵守這些自愿 一致性 標(biāo)準(zhǔn)（或指南）不能減輕使用者對遵守應(yīng)用規(guī)定的責(zé)任。 批準(zhǔn) ： 批準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)或指南已在臨床檢驗(yàn)界得到一致同意。 建議 ： NCCLS文件作為建議標(biāo)準(zhǔn)或指南處在被臨床檢驗(yàn)界評審的第一階段。使用者可以使用成文文件或修改指南以適應(yīng)特定的需要。 出版物 NCCLS文件以標(biāo)準(zhǔn)、指南、委員會報(bào)告出版。 NCCLS所依據(jù)的原則是，對病人高質(zhì)量服務(wù)所需的臨床實(shí)驗(yàn)室檢測，自愿一致的標(biāo)準(zhǔn)是必不可少的。 1 EP6A ISBN 1562384988 Volume 23 Number 16 ISSN 02733099 Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach。 NCCLS通過各臨床實(shí)驗(yàn)室、檢驗(yàn)團(tuán)體學(xué)會、工廠和政府機(jī)構(gòu)的參與而代表臨床檢驗(yàn)界。 標(biāo)準(zhǔn) ： 通過一致化過程形成的文件，并對材料、方法、或?qū)嵺`以不能修改方式明確規(guī)定其特定的基本要求。 報(bào)告 ： 沒有經(jīng)過一致化審定過程的文件，由理事會頒布。此文件需要接受廣泛徹底的技術(shù)審核，包括對范圍、方法、用途和逐字逐行對技術(shù)和行文內(nèi)容的全面評審。應(yīng)審定并評價(jià)最終文件的用途，以保證獲得一致同意（即對以前版本的意見已圓滿解決），并確定對其它標(biāo)準(zhǔn)的需要。 評 論 實(shí)驗(yàn)室使用者 的評論對一致化過程是很重要的。 評 論 寄 往 NCCLS 行 政 辦 公 室 ： 940 West Valley Road, Suite 1400,Wayne,Pennsylvania19087,USA。對于分析和臨床實(shí)驗(yàn)方法來說，線性特征是非常重要的。 確保分析方法呈線性在臨床上也是很重要的。 第一版 EP6P僅用 線性失擬誤差 檢驗(yàn)（ LoF檢驗(yàn)）來判斷線性關(guān)系。這種方法的缺點(diǎn)是精密度好的檢測系統(tǒng)有很小的樣本方差，在 LOF檢驗(yàn)的比率中，均值方差很小時(shí)，得出在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著，即呈非線性。然而， EP6A作為一種多項(xiàng)式回歸方法，是一種非線性選擇的特殊參數(shù)模型，特別能夠很好地鑒別非線性。 在以前的版本中也提到過，評價(jià)線性關(guān)系時(shí)，首先必須在圖上點(diǎn)上數(shù)據(jù)。 NCCLS認(rèn)識到醫(yī)學(xué)術(shù)語在美國、歐洲和其他地方表達(dá)不一致，這些不同也表現(xiàn)在 7 NCCLS、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ ISO）和歐洲標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ CEN）的文件中。 Repeatability(重復(fù)性 )代替批內(nèi)精密度 ， 可以恰當(dāng)?shù)赜脕砻枋鲈谝欢l件下連續(xù)測量同份分析物的接近程度。 所有的術(shù)語和定義為了能得到更廣泛的應(yīng)用，在下一次的版本中將再一次修正。標(biāo)準(zhǔn)防護(hù) 和全身防護(hù)指南見美國 CDC文件 和 NCCLS M29保護(hù)實(shí)驗(yàn)室員工避免職業(yè)性感染。精密 度很差時(shí)，會妨礙線性關(guān)系的評價(jià)，因而重復(fù)性的檢查也包括在內(nèi)。首先要確定一種方法的非線性濃度范圍，及在每個(gè)濃度水平上非線性的程度。線性試驗(yàn)有助于評價(jià)偏倚的大小（但非線性并不是偏倚的全部），偏倚是測量誤差的一部分。如果用戶在自己的實(shí)驗(yàn)室要驗(yàn)證已知的線性范圍（廠家提供），測量時(shí)僅覆蓋該范圍即可。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是非?？煽?，且基于嚴(yán)格的科學(xué)原理。 Krouwer和 Schlain提出一種通用的方法，即 LPO（ last point off the line），需要多次計(jì)算最小二乘法方程。 允許誤差來表示。注：一般情況下，偏倚指公認(rèn)的方法（決定性，參考性或指定方法）與比較方法的測量結(jié)果的差值，用數(shù)值或百分?jǐn)?shù)表示。 最小二 乘法 （ Least square regression） ： 一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ， 由所有數(shù)據(jù)點(diǎn)得到的直線或曲線上每個(gè)點(diǎn)到 X軸 （ 即與 Y軸平行 ） 的垂直距離的平方和達(dá)到最小。 線性回歸 （ Linear regression） ： 待測變量（非獨(dú)立）的浮動經(jīng)常可以（部分地）歸因于其他變量（獨(dú)立），回歸的方法量化了獨(dú)立變量和非獨(dú)立變量之間的關(guān)系。 測量范圍 （ Measurement range） ： 指測量儀器的誤差在特定范圍內(nèi)的 一系列 分析物的測量結(jié)果 ，以前稱為可報(bào)告范圍。 回歸標(biāo)準(zhǔn)誤 （ Standard deviation of y about a regression/standard error of regression， SDy,x)： 獨(dú)立變量 Y與預(yù)期變量 X相對應(yīng)的可估計(jì)變量 Y’平均值之間的差量檢測大小。 2． 4 實(shí)驗(yàn)方法的概述 本指南所用的多項(xiàng)式回歸最初由 Kroll等提出，有嚴(yán)密的統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)律，且容易用表格來完成。 本質(zhì)上，多項(xiàng)式回歸是設(shè)計(jì)用來評價(jià)曲線的反應(yīng)模型，因而它適合于評價(jià)非線性。 3． 2 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)盡可能在較短的時(shí)間內(nèi)收集，如可能，單個(gè)分析試驗(yàn)最好在一天內(nèi)做完。 當(dāng)一個(gè)新的測量方法（或廠家或?qū)嶒?yàn)室改良一個(gè) 實(shí)驗(yàn)方法時(shí)）需要建立新的線性范圍時(shí)，需要 7到 11能覆蓋預(yù)期的測量范圍的不同濃度的標(biāo)本。 本指南推薦用高值和低值濃度的樣本按比例精確配成等間距的不同濃度樣本，但等間距不是本方法所必需的。5到 11個(gè)濃度水平的等間距標(biāo)本的配制方法見附錄 A。如果上述條件不可避免，則應(yīng)在最后的報(bào)告 中注明在評價(jià)實(shí)驗(yàn)中所用的標(biāo)本處理方法或基質(zhì)類型。以下為可能用到的樣本類型，注意在一些特殊方法時(shí)要選擇合適的基質(zhì)。對于有些分析系統(tǒng)來說，允許用病人的標(biāo)本稀釋法來評價(jià)線性，可用經(jīng)認(rèn)可的稀釋液來對超過分析范圍的病人標(biāo)本進(jìn)行稀釋，這時(shí)需提供材料證明該稀釋液是可用于該分析系統(tǒng)的。當(dāng)存在干擾物時(shí)，在報(bào)告中需提及其來源、純度、預(yù)期影響等。注意這些處理可能改變分析物或基質(zhì)的物理或化學(xué)特性。 用鹽水或其它稀釋劑而不是推薦稀釋液 如用到這些稀釋液，注意基質(zhì)效應(yīng)可能會影響到檢測結(jié)果。 水溶液 當(dāng)用水溶液時(shí)，對分析方法的響應(yīng)曲線的影響未測試，基質(zhì)效應(yīng)可能影響到響應(yīng)曲線和結(jié)果的解釋。 制成分析樣本的添加物的選擇 選擇添加物時(shí)要仔細(xì)考慮，使用其它物種來源的原料也會引起一些影響。 4． 5 分析順序 14 分析順序應(yīng)是隨機(jī)的，但如果存在明顯攜帶污染或漂移，則可妥協(xié)。對于等間距濃度來說，每管可以用整數(shù)（如 1， 2， 3， 4， 5等）來分配號碼，也就是說，每一管的的濃度分析前可以未知。 以下以五個(gè)濃度等間距的配制（參考附錄 A： 5到 11個(gè)等間距濃度的分配方法）舉例。注意在操作過程中，要有最準(zhǔn)確和精確 的加樣技術(shù)。 V1+C5 樣本管 1和 5每管需 ； 樣本管 2：加 1管溶液和 5管溶液； 樣本管 3：加 1管溶液和 5管溶液； 樣本管 4：加 1管溶液和 5管溶液，第 4管溶液 的濃度計(jì)算為： (40*+120*)/