【正文】 有效的抑制原蟲(chóng)引起的疾病，尤其雞球蟲(chóng)病的發(fā)生。初生仔豬從出生到斷奶期間有15－20％死亡，弱小仔豬的死亡率高達(dá)50％，導(dǎo)致初生仔豬死亡率高的一個(gè)重要因素是仔豬的營(yíng)養(yǎng)狀況不良，體內(nèi)的能量?jī)?chǔ)備有限，不能滿足機(jī)體需要。中鏈脂肪酸可以作為快速補(bǔ)充能量的物質(zhì)被直接利用供能，同時(shí)可減少體脂和蛋白質(zhì)的消耗。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)中鏈脂肪酸對(duì)仔豬成活率可提高10％以上，對(duì)日增重可提高3％以上，對(duì)降低仔豬的死亡率提高仔豬日增重有較大的作用。MCFA用于初生弱仔豬，有提高血糖的功效，但對(duì)較強(qiáng)壯的豬則沒(méi)有作用。也用以長(zhǎng)途運(yùn)輸雛雞飲水，可起到供能的作用。純的MCT不含有必需脂肪酸，應(yīng)用后引起血栓性靜脈炎、面部潮紅、惡心、腦電圖改變、腦病、乳酸酸中毒，甚至動(dòng)物死亡。一般減少劑量，減慢輸液速度或可避免副作用發(fā)生。 項(xiàng)目技術(shù)先進(jìn)性，對(duì)相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)進(jìn)步的推動(dòng)作用本項(xiàng)目在研究過(guò)程中，以中短鏈脂肪酸為原料，分別用薄膜分散法、改良乙醇注入法、逆相蒸發(fā)法、凍融法制備脂質(zhì)體懸浮液，得出制備脂質(zhì)體的最佳工藝和配方；然后將制得的脂質(zhì)體進(jìn)行冷凍干燥，確定凍干條件，分別添加并比較幾種凍干保護(hù)劑（山梨醇、葡萄糖、甘露糖、海藻糖），通過(guò)穩(wěn)定性、包封率等指標(biāo)確定制備中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝。解決了脂質(zhì)體在制備過(guò)程中顆粒較大且不均勻、包封率較低的問(wèn)題；將脂質(zhì)體懸浮液經(jīng)過(guò)真空冷凍干燥技術(shù)制成凍干脂質(zhì)體解決了懸浮液不穩(wěn)定的缺點(diǎn)；抑制了凍干產(chǎn)品在冷凍干燥過(guò)程中的聚合。項(xiàng)目技術(shù)的先進(jìn)性表現(xiàn)在有效解決以下幾個(gè)問(wèn)題：第一、通過(guò)正交試驗(yàn)，將幾種表面活性劑進(jìn)行復(fù)配，而不是用單一的表面活性劑，從而改變了各種表面活性劑的乳化效果，使得脂質(zhì)體懸浮液粒度分布更均勻，并且使被包封的中短鏈脂肪酸增加，從而有效地提高了包封率。第二、制備的脂質(zhì)體溶液屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，通常在短時(shí)間內(nèi)會(huì)出現(xiàn)粒徑增大、團(tuán)聚、水解等現(xiàn)象，若將其干燥成固體可有效提高脂質(zhì)體的化學(xué)穩(wěn)定性，保持原有粒徑，避免水解。常用的干燥方法有冷凍干燥和噴霧干燥，由于在噴霧干燥過(guò)程中的高溫、高剪切力和脂質(zhì)的部分融化，易造成粒子團(tuán)聚，所以盡管?chē)婌F干燥較冷凍干燥法更經(jīng)濟(jì)，但較少用于脂質(zhì)體的干燥，所以采用真空冷凍干燥方法將脂質(zhì)體懸浮液進(jìn)行干燥，從而提高了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。第三、樣品經(jīng)冷凍干燥變成固態(tài)后，具有更好的化學(xué)和物理穩(wěn)定性，但由于其再增溶作用，粒子由于處于一個(gè)低含水量、高粒子濃度、高滲透壓的環(huán)境中，易發(fā)生聚合。因此在冷凍干燥時(shí)應(yīng)加入適量的冷凍防護(hù)劑，抑制粒子的聚合，使干燥后產(chǎn)品有更好的分散性。常用的冷凍防護(hù)劑有山梨醇、葡萄糖、甘露糖、海藻糖等。 項(xiàng)目目前進(jìn)展情況。目前，脂質(zhì)體研究已經(jīng)在各個(gè)制藥領(lǐng)域廣泛開(kāi)展，該類(lèi)藥物新劑型已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于抗癌藥物、抗菌藥物、抗寄生蟲(chóng)藥物、激素類(lèi)藥物、酶、解毒劑、免疫激活劑以及抗結(jié)核藥物的研究中。另外，因?yàn)橹|(zhì)體具有生物膜的特性和功能，使它不僅作為一種新劑型應(yīng)用與疾病的治療和診斷中，而且在生物物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)研究、免疫診斷及化妝品等許多領(lǐng)域中都有應(yīng)用。隨著脂質(zhì)體技術(shù)的不斷發(fā)展，各種各樣新型的脂質(zhì)體已經(jīng)被研制出來(lái)，如 pH 敏脂質(zhì)體、免疫脂質(zhì)體、磁性脂質(zhì)體、光敏脂質(zhì)體、超聲波敏脂質(zhì)體等。目前，這種藥物新劑型在獸藥領(lǐng)域內(nèi)也得到了一定的發(fā)展。本項(xiàng)目“中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的研究”目前已完成小試階段，準(zhǔn)備進(jìn)行中試放大研究。二、技術(shù)方案論述項(xiàng)目技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)或創(chuàng)新點(diǎn)論述，項(xiàng)目完成時(shí)達(dá)到的技術(shù)水平項(xiàng)目創(chuàng)新點(diǎn)：① 首次以中短鏈脂肪酸為原料，制備納米脂質(zhì)體，科學(xué)有效的利用了脂質(zhì)體靶向性、長(zhǎng)效性、保護(hù)性等特點(diǎn)。② 通過(guò)真空冷凍干燥法制備了固體中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體，改變了脂質(zhì)體懸浮液的不穩(wěn)定性，便于儲(chǔ)存運(yùn)輸。③ 本項(xiàng)目對(duì)中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的流變學(xué)特性進(jìn)行了研究，并揭示中短鏈脂肪酸含量與其粘度的關(guān)系本項(xiàng)目達(dá)到的技術(shù)水平：開(kāi)發(fā)出具有一定生理功能，商業(yè)價(jià)值高的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的凍干產(chǎn)品，開(kāi)發(fā)出適合不同用途的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體產(chǎn)品,可作為脂肪吸收障礙的患者及發(fā)育不好的嬰幼兒等的能源物質(zhì)，或作為體育運(yùn)動(dòng)者的能量補(bǔ)充源。若將其添加于飼料中，可降低初生仔豬死亡率，提高日增重，減少畜禽腸道疾病的產(chǎn)生，從而提高農(nóng)民的收入。 項(xiàng)目水平將達(dá)到國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平。 項(xiàng)目技術(shù)方案論述：生產(chǎn)技術(shù)、工藝流程、主要技術(shù)參數(shù)生產(chǎn)技術(shù)：（1）摸索氣相色譜法測(cè)定中短鏈脂肪酸的條件，并對(duì)原料中短鏈脂肪酸進(jìn)行測(cè)定；（2）通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得出制備脂質(zhì)體的最佳工藝，制備出穩(wěn)定性好的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體；（3）研究中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體流變學(xué)特性，并揭示中短鏈脂肪酸含量與其粘度的關(guān)系；（4）通過(guò)中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體粒徑、Zate 電位、包封率等性質(zhì)的測(cè)定考察所制備脂質(zhì)體的穩(wěn)定性；（5）開(kāi)發(fā)中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體凍干產(chǎn)品。工藝流程：采用氣相色譜對(duì)原料中短鏈脂肪酸的組成及含量進(jìn)行分析。 目前鮮見(jiàn)關(guān)于氣相色譜法同時(shí)測(cè)定中、短鏈脂肪酸含量和組成的報(bào)道，為了對(duì)原料的組有一個(gè)全面的了解，我們摸索了氣相色譜法測(cè)定中短鏈脂肪酸的組成及含量的方法 ① 脂肪酸的甲酯化：采用硫酸甲醇法對(duì)原料中短鏈脂肪酸進(jìn)行甲酯化。在裝有脂肪酸混合樣的梨形瓶中，加入硫酸甲醇溶劑，在沸水浴上冷凝回流酯化1h，移入分液漏斗中，加入蒸餾水，用石油醚萃取脂肪酸甲酯三次。合并石油醚于另一分液漏斗中，用蒸餾水洗滌至中性，低溫冷凍除去水分，將石油醚轉(zhuǎn)入另一梨形瓶中，去除溶劑，加入二氯甲烷溶液，供色譜分析檢測(cè)。 ② 氣相色譜檢測(cè)： 采用Agilent6890N氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測(cè)器。選用30(id) HPINNOWAX毛細(xì)管柱進(jìn)行分析，初始溫度為120℃ 保持1min，然后以10℃/min的速度升溫至250℃ 并維持5min。檢測(cè)器溫度為280℃ ，進(jìn)樣口溫度為250℃,進(jìn)樣量為1μL。載氣為氦氣， ③ 根據(jù)出現(xiàn)色譜峰的保留時(shí)間，定性判斷脂肪酸種類(lèi)及組成，用面積歸一法進(jìn)行脂肪酸定量分析，所得結(jié)果為每千克總脂肪酸中所含的各種脂肪酸的量。 中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體包封率的檢測(cè) ①懸浮液包封率的測(cè)定采用透析法分離游離藥物, 收集透析液，并將透析液經(jīng)行前處理，然后用氣相色譜法測(cè)定其中游離的中短鏈脂肪酸的含量。%=（總加入量－游離脂肪酸的量）/總加入量100%②凍干脂質(zhì)體包封率的測(cè)定 先將凍干脂質(zhì)體重新分散于磷酸緩沖液中，然后測(cè)定其包封率。脂質(zhì)體懸浮液的制備（1）中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體制備方法的確定在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用相同配方條件，分別用薄膜分散法、改良乙醇注入法、逆相蒸發(fā)法、凍融法制備脂質(zhì)體懸浮液。① 薄膜分散法 按一定比例稱(chēng)取大豆磷脂、膽固醇、中短鏈脂肪酸適量，將其置于茄形燒瓶中。加入二氯甲烷使其溶解，在45℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使之均勻成膜；，直至形成牛奶狀液體，即得脂質(zhì)體。停止洗膜后，超聲處理，置冰箱內(nèi)保存。② 改良乙醇注入法 按一定比例稱(chēng)取中短鏈脂肪酸、磷脂、膽固醇適量，溶于適量的乙醇中，加熱使其溶解。在攪拌條件下，將恒溫至一定溫度的磷酸鹽溶液快速注入到類(lèi)脂溶液中。注射完畢后，繼續(xù)攪拌直至無(wú)乙醇味為止。即得到中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體膠體溶液。③ 逆向蒸發(fā)法按一定比例稱(chēng)取大豆磷脂、膽固醇、中短鏈脂肪酸適量，將其置于茄形燒瓶中。加入二氯甲烷使其溶解，在加入磷酸緩沖液并在超聲波清洗機(jī)中進(jìn)行超聲使之成為牛奶狀液體；再在45℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑；再加入磷酸緩沖液直至成為牛奶狀液體，停止洗膜，置冰箱保存。④ 凍融