【正文】 品執(zhí)行國家行業(yè)標準。②不同儲存溫度下脂質體懸浮液及凍干脂質體外觀（顏色、懸浮液是否分層、顆粒形態(tài)）、粒徑、包封率、粘度、zate電位、pH值及過氧化值的變化。（2）采用硫代巴比妥酸法測定磷脂的過氧化值。凍干脂質體的制備將制得的脂質體進行冷凍干燥，確定凍干條件。 對選定的制備方法以包封率、粒徑、分散性為指標對脂質體配方進行優(yōu)化，首先選定水化溫度、水化時間、膽固醇與磷脂的比、中短鏈脂肪酸與膜材的比、水相與油相的比五個因素進行單因素實驗。③ 逆向蒸發(fā)法按一定比例稱取大豆磷脂、膽固醇、中短鏈脂肪酸適量，將其置于茄形燒瓶中。② 改良乙醇注入法 按一定比例稱取中短鏈脂肪酸、磷脂、膽固醇適量，溶于適量的乙醇中，加熱使其溶解。脂質體懸浮液的制備（1）中短鏈脂肪酸脂質體制備方法的確定在預實驗的基礎上，采用相同配方條件，分別用薄膜分散法、改良乙醇注入法、逆相蒸發(fā)法、凍融法制備脂質體懸浮液。檢測器溫度為280℃ ，進樣口溫度為250℃,進樣量為1μL。在裝有脂肪酸混合樣的梨形瓶中，加入硫酸甲醇溶劑，在沸水浴上冷凝回流酯化1h，移入分液漏斗中，加入蒸餾水，用石油醚萃取脂肪酸甲酯三次。 項目水平將達到國內(nèi)領先水平。二、技術方案論述項目技術關鍵點或創(chuàng)新點論述，項目完成時達到的技術水平項目創(chuàng)新點：① 首次以中短鏈脂肪酸為原料，制備納米脂質體，科學有效的利用了脂質體靶向性、長效性、保護性等特點。另外，因為脂質體具有生物膜的特性和功能，使它不僅作為一種新劑型應用與疾病的治療和診斷中，而且在生物物理、生物化學、免疫學研究、免疫診斷及化妝品等許多領域中都有應用。因此在冷凍干燥時應加入適量的冷凍防護劑，抑制粒子的聚合，使干燥后產(chǎn)品有更好的分散性。項目技術的先進性表現(xiàn)在有效解決以下幾個問題：第一、通過正交試驗，將幾種表面活性劑進行復配，而不是用單一的表面活性劑，從而改變了各種表面活性劑的乳化效果，使得脂質體懸浮液粒度分布更均勻，并且使被包封的中短鏈脂肪酸增加，從而有效地提高了包封率。純的MCT不含有必需脂肪酸，應用后引起血栓性靜脈炎、面部潮紅、惡心、腦電圖改變、腦病、乳酸酸中毒，甚至動物死亡。中鏈脂肪酸可以作為快速補充能量的物質被直接利用供能，同時可減少體脂和蛋白質的消耗。在雞飼料中添加一定比例的中鏈脂肪酸，可提高雞的采食量、提高產(chǎn)蛋率、增加蛋重、降低破殼率。，控制腸炎沙門氏菌等病原微生物。大鼠小腸部分切除后，對短腸大鼠腸外給予短鏈脂肪酸，可阻止腸粘膜萎縮。英國的Patz等通過實驗發(fā)現(xiàn)采用三種短鏈脂肪酸（乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽）溶液灌腸治療難治性遠端潰瘍性結腸炎能收到良好的療效。丁酸氧化主要在遠端結腸進行。且由于術后給予短鏈脂肪酸，增加了切除邊緣的腸粘膜微循環(huán)血量，還可降低滲漏的危險。Na+的吸收又刺激了SCFA的吸收。有人曾對山羊奶的中短鏈脂肪酸進行研究表明中短鏈脂肪酸具有獨特的醫(yī)用價值，可抑制膽固醇沉積，預防和治療吸收不良綜合癥、腸功能紊亂、冠心病、早產(chǎn)兒營養(yǎng)不良癥、膀胱的纖維變性、膽結石等疾病。 中短鏈脂肪酸是指碳數(shù)為4－12的飽和脂肪酸，它們對血清膽固醇沒有影響。近年來，對脂質體的研究領域逐漸擴大和不斷深入，發(fā)表了脂質體的作用特點及應用、作為抗癌藥物載體的研究概況、兩性霉素B脂質體對小鼠白色念珠菌感染的治療觀察、一種新型聚合膜脂質體、脂質體的冷凍與干燥、載脂蛋白/卵磷脂脂質體對培養(yǎng)的平滑肌細胞內(nèi)膽固醇的清除作用、脂質體的物理化學穩(wěn)定性研究進展、新型的皮膚給藥系統(tǒng)——脂質體、脂質體作為藥物載體的作用、應用和發(fā)展前景等一系列綜述。 項目所處技術領域技術發(fā)展現(xiàn)狀 1935 年，Bangham博士曾申請專利將藥物置于卵磷脂/膽固醇中乳化以便緩慢釋放，但是由于當時檢測微觀結構落后，他并沒有發(fā)現(xiàn)這一結構，直到 1965 年他才觀察到這一特點，并將其命名為脂質體。近年來，脂質體在基礎理論及應用上有重要意義，它能改變許多生物活性物質如抗腫瘤藥、抗炎藥、免疫調(diào)節(jié)劑、基因類藥物等的體內(nèi)轉運過程，現(xiàn)已廣泛用于基因藥物、抗腫瘤藥、蛋白質和多肽等藥物的載體系統(tǒng)。脂質體是一種以細胞膜基本成分磷脂為材料的新型的藥物輸送系統(tǒng)，因其具有良好的生物相容性和安全性，并且制備技術日益成熟，在抗癌藥物，抗病毒藥物以及生物工程藥物，如蛋白，多肽等的有效輸送方面具有其他給藥系統(tǒng)難以比擬的優(yōu)越性。根據(jù)國家的產(chǎn)業(yè)政策，我國已將生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)作為經(jīng)濟中的重點建設行業(yè)和高新技術中的支柱產(chǎn)業(yè)來發(fā)展, 對一些科技發(fā)達或發(fā)展較快的行業(yè)給與了高度的重視。“十五計劃綱要”指出，要大力發(fā)展醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)，并將醫(yī)藥現(xiàn)代化列為應“有所為”的高科技產(chǎn)業(yè)化范疇；國家“十五”期間，將重點發(fā)展中藥、生物工程藥物和優(yōu)勢化學原料藥，其中中藥被列為醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展的首要任務。建立和進一步加強在藥物控釋緩釋技術，靶向給藥技術和臨床研究領域的領先地位。脂質體具有緩釋、控釋、提高藥物穩(wěn)定性，增強療效降低毒副作用等方面的優(yōu)越性，同時在生物體內(nèi)及貯存過程中較穩(wěn)定。同時由于中短鏈脂肪酸特有的生理特性，將其制成脂質體符合國家產(chǎn)業(yè)政策、當前和今后一個時期有較大的市場需求，有廣闊的發(fā)展前景，有利于開拓國內(nèi)外市場。 我國80年代開始進行脂質體的研究工作。如沈陽藥科大學在脂質體抗腫瘤藥物的研究方面取得了多項成果，包括油酸多相脂質體、復方氟脲嘧啶多項脂質體、喜樹堿多項脂質體等，還在人參多糖和雙多糖脂質體、熱敏磁性脂質體、阿霉素熱敏脂質體、氟尿嘧啶熱敏脂質體和甲氨蝶呤熱敏脂質體、順鉑熱敏脂質體方面進行了很多研究。而中鏈脂肪酸具有極好的消化吸收性以及生理學特性，在食品、醫(yī)藥、化妝品等領域中顯出較廣闊的應用前景。非離子化酸HSCFA的吸收可促進Na+H交換，刺激Na+的吸收。 SCFA可促進結腸血供，有報道指出，結腸造口術后，直腸灌注短鏈脂肪酸每日兩次共14天，病人的結腸粘膜血流量增加。 SCFA作為首選的代謝性燃料，可提供結腸粘膜總能量需要的70％，其中丁酸是大鼠結腸細胞首選能源物質。 1989年Haring對難治性遠端潰瘍性結腸炎病人直腸灌注SCFA后發(fā)現(xiàn)其組織學明顯改善。此外短鏈脂肪酸不僅對結腸粘膜有營養(yǎng)作用，對小腸粘膜也有營養(yǎng)作用。傅紅等以人結腸癌Caco2細胞為模型，發(fā)現(xiàn)醋酸鹽、丙酸鹽及丁酸鹽3種短鏈脂肪酸均可影響人結腸癌細胞的表現(xiàn)，顯著延長腫瘤細胞倍增時間，增強癌細胞分化標志物組蛋白酶的表達，并明顯抑制癌細胞的轉移丁酸能在毫摩爾濃度下發(fā)揮抑制腫瘤細胞增殖、誘導分化和凋亡的作用，并且還能抑制腫瘤新生血管形成，在動物實驗中也尚未發(fā)現(xiàn)可知的藥物毒性。 中鏈脂肪酸的研究現(xiàn)狀由于中鏈脂肪酸極好的消化吸收及生理學特征，在食品、醫(yī)藥、化妝品等領域中顯出了較廣闊的應用前景。初生仔豬從出生到斷奶期間有15－20％死亡，弱小仔豬的死亡率高達50％，導致初生仔豬死亡率高的一個重要因素是仔豬的營養(yǎng)狀況不良，體內(nèi)的能量儲備有限，不能滿足機體需要。也用以長途運輸雛雞飲水，可起到供能的作用。解決了脂質體在制備過程中顆粒較大且不均勻、包封率較低的問題；將脂質體懸浮液經(jīng)過真空冷凍干燥技術制成凍干脂質體解決了懸浮液不穩(wěn)定的缺點；抑制了凍干產(chǎn)品在冷凍干燥過程中的聚合。第三、樣品經(jīng)冷凍干燥變成固態(tài)后，具有更好的化學和物理穩(wěn)定性，但由于其再增溶作用，粒子由于處于一個低含水量、高粒子濃度、高滲透壓的環(huán)境中，易發(fā)生聚合。目前，脂質體研究已經(jīng)在各個制藥領域廣泛開展，該類藥物新劑型已經(jīng)被廣泛的應用于抗癌藥物、抗菌藥物、抗寄生蟲藥物、激素類藥物、酶、解毒劑、免疫激活劑以及抗結核藥物的研究中。本項目“中短鏈脂肪酸脂質體的研究”目前已完成小試階段，準