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2025-08-25 09:31 本頁(yè)面


【正文】 具有的專一性親和力的層析技術(shù)。 層析法分類 層析法分類 按兩相所處的狀態(tài)分類: ? 流動(dòng)相有兩種狀態(tài):液體作為流動(dòng)相 氣體作為流動(dòng)相 ? 固定相也有兩種狀態(tài):固體吸附劑作為固定相 以吸附在固體上的液體作為固定相 按兩相所處的狀態(tài)分為: ? 液相層析和氣相層析 流動(dòng)相 固定相 液體 (液相層析 ) 氣體 (固相層析) 液 體 液 液層析 氣 液層析 固 體 液 固層析 氣 固層析 層析法分類 名稱 操作形式 適用范圍 柱層析 將固定相裝于柱內(nèi),使樣品沿一個(gè)方向移動(dòng)而達(dá)到分離的目的。 柱層析是常用的層析形式,適用于大量樣品分析、分離。生物化學(xué)中常用的凝膠層析、離子交換層析、親和層析、高效液相色譜等都通常采用柱層析形式。 薄層層析 將適當(dāng)粘度的固定相均勻涂鋪在薄板上,點(diǎn)樣后用流動(dòng)相展開,使各組份分離 薄層層析主要適用于小分子物質(zhì)的快速檢測(cè)分析和少量分離制備,通常為一次性使用。 按操作形式不同分類: 吸附層析 ? 原理:任何兩個(gè)相都可以形成表面,其中一個(gè)相的物質(zhì)或溶解在其中的溶質(zhì)在此表面密集現(xiàn)象稱為吸附,利用吸附劑對(duì)不同物質(zhì)具有不同吸附力使混合物得到分的現(xiàn)象就叫吸附層析。 ? 凡能將其他物質(zhì)聚集到自己表面的物質(zhì)稱吸附劑,包括硅皮、氧化鋁、活性炭、淀粉、纖維素及陶土,而聚集于聚集于吸附劑表面的物質(zhì)稱被吸附劑。 ? 吸附劑與被吸附劑之間的作用除了物理作用外,還有化學(xué)作用,如 DNS氨基酸雙向聚酰胺薄膜層析時(shí)中被分離的物質(zhì)之所以能吸附在聚酰胺薄膜上就是由于二者之間形成氫鍵。 分配層析技術(shù) (液 液層析法) ? 原理:利用混合物在兩種不相混溶的液相(固定相和流動(dòng)相)之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離各組分的目的。紙層析是最廣泛的一種分配層析。 ? 特點(diǎn):液 液層析法適合于分離同系物或同分異構(gòu)體 分配層析技術(shù) ? 分配系數(shù)小的溶質(zhì)在流動(dòng)相中分配的數(shù)量多,移動(dòng)快;分配系數(shù)大的溶質(zhì)在固定相中分配的數(shù)量多,移動(dòng)慢。因此可彼此分開。 ? 分配系數(shù)主要與下列因素有關(guān): ① 被分離物質(zhì)本身的性質(zhì); ② 固定相和流動(dòng)相的性質(zhì); ③ 層析柱的溫度。 相關(guān)的概念(一): 分配系數(shù):當(dāng)一種溶質(zhì)分布在兩個(gè)互不相溶的溶劑中時(shí),它在固定相和流動(dòng)相兩相內(nèi)的濃度之比是個(gè)常數(shù),稱為分配系數(shù) (Kd)。分配系數(shù)是層析中分離純化物質(zhì)的主要依據(jù) Kd=Cs/Cm 其中 Cs: 固定相中的濃度, Cm: 流動(dòng)相中的
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