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《氨基酸紙層析》ppt課件-文庫吧

2025-04-16 04:16 本頁面


【正文】 ) 紙層析 ( 3) 薄層層析; ? 按分離過程所主要依據(jù)的物理化學性質(zhì)分類: ( 1) 吸附層析 ( 2) 分配層析 ( 3) 離子交換層析 ( 4) 凝膠層析 ( 5) 親和層析等 。 2022/5/29 7 紙層析法:是以濾紙作為惰性支持物的 分配層析 。 濾紙纖維上羥基具有親水性,因此吸附水作為 固定相 ,通常把有機溶劑作為 流動相 。 將樣品點在濾紙上,進行展層,樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進行分配。由于它們的分配系數(shù)不同,不同氨基酸隨流動相移動的速率就不同,于是就將這些氨基酸分離開來,形成距原點不等的層析點 二、實驗原理 : 2022/5/29 8 分配層析法: 利用物質(zhì)在兩種或兩種以上不同的混合溶劑中的分配系數(shù)不同,而達到分離目的的一種實驗方法。 在一定條件下,一種物質(zhì)在某種溶劑系統(tǒng)中的 分配系數(shù) α 是一個常數(shù)。 溶質(zhì)在 固定相 的濃度 (Cs) 分配系數(shù) α= 溶質(zhì)在 流動相 的濃度( Cl) 2022/5/29 9 溶劑系統(tǒng): 正丁醇:甲酸:水 =15: 3: 2 固定相 : 水和濾紙纖維素有較強的親和力 ,因而其擴散作用降低形成 固定相 。 流動相 :有機溶劑和濾紙親和力弱 , 所以在濾紙毛細管中自由流動 , 形成 流動相 。 由于混合液中各種氨基酸的 α 值不同 , 所以移動速率 ( 即 遷移率 Rf值 ) 就不同 , 從而達到分離的目的 。 2022/5/29 10 移動速率 (比移值 ): 原點到層析點中心的距離 Rf =
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