《氨基酸紙層析》ppt課件-文庫(kù)吧
2025-04-16 04:16 本頁(yè)面
【正文】 ） 紙層析 （ 3） 薄層層析； ? 按分離過(guò)程所主要依據(jù)的物理化學(xué)性質(zhì)分類(lèi)： （ 1） 吸附層析 （ 2） 分配層析 （ 3） 離子交換層析 （ 4） 凝膠層析 （ 5） 親和層析等 。 2022/5/29 7 紙層析法：是以濾紙作為惰性支持物的 分配層析 。 濾紙纖維上羥基具有親水性，因此吸附水作為 固定相 ，通常把有機(jī)溶劑作為 流動(dòng)相 。 將樣品點(diǎn)在濾紙上，進(jìn)行展層，樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進(jìn)行分配。由于它們的分配系數(shù)不同，不同氨基酸隨流動(dòng)相移動(dòng)的速率就不同，于是就將這些氨基酸分離開(kāi)來(lái)，形成距原點(diǎn)不等的層析點(diǎn) 二、實(shí)驗(yàn)原理 : 2022/5/29 8 分配層析法： 利用物質(zhì)在兩種或兩種以上不同的混合溶劑中的分配系數(shù)不同，而達(dá)到分離目的的一種實(shí)驗(yàn)方法。 在一定條件下，一種物質(zhì)在某種溶劑系統(tǒng)中的 分配系數(shù) α 是一個(gè)常數(shù)。 溶質(zhì)在 固定相 的濃度 (Cs) 分配系數(shù) α= 溶質(zhì)在 流動(dòng)相 的濃度（ Cl) 2022/5/29 9 溶劑系統(tǒng)： 正丁醇：甲酸：水 =15： 3： 2 固定相 ： 水和濾紙纖維素有較強(qiáng)的親和力 ，因而其擴(kuò)散作用降低形成 固定相 。 流動(dòng)相 ：有機(jī)溶劑和濾紙親和力弱 ， 所以在濾紙毛細(xì)管中自由流動(dòng) ， 形成 流動(dòng)相 。 由于混合液中各種氨基酸的 α 值不同 ， 所以移動(dòng)速率 （ 即 遷移率 Rf值 ） 就不同 ， 從而達(dá)到分離的目的 。 2022/5/29 10 移動(dòng)速率 (比移值 )： 原點(diǎn)到層析點(diǎn)中心的距離 Rf =
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