轉(zhuǎn)錄因子dna結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測分析dns-氨基酸的雙向聚酰胺薄(存儲版)
【正文】 他物質(zhì)聚集到自己表面的物質(zhì)稱吸附劑，包括硅皮、氧化鋁、活性炭、淀粉、纖維素及陶土，而聚集于聚集于吸附劑表面的物質(zhì)稱被吸附劑。分配系數(shù)是層析中分離純化物質(zhì)的主要依據(jù) Kd=Cs/Cm 其中 Cs: 固定相中的濃度， Cm: 流動相中的濃度 分配層析技術(shù) 相關(guān)的概念（二）： ? 遷移率：在一定條件下，在相同的時(shí)間內(nèi)某一組分在固定相移動的距離與流動相本身移動的距離之比值。對分離含量極少又不穩(wěn)定的活性物質(zhì)尤為有效。平衡離子帶正電的離子交換劑能與帶正電的離子基團(tuán)發(fā)生交換作用，稱為陽離子交換劑；平衡離子帶負(fù)電的離子交換劑與帶負(fù)電的離子基團(tuán)發(fā)生交換作用，稱為陰離子交換劑。 ? 柱床體積就是指凝膠柱所能容納的總體積。由于有些 AA結(jié)構(gòu)相似，如只采用一種溶劑系統(tǒng)進(jìn)行單向?qū)游觯y達(dá)到完全分離的目的。 ? 展層后必須經(jīng)電吹風(fēng)將膜吹干。 ? G類葡聚糖凝膠常用 GX代表， X數(shù)字既代表交聯(lián)度，也代表特水量?？捎貌０魯嚢枋贡砻嫫秸?； 3. 平衡：反復(fù)加蒸餾水 ,平衡 10分鐘 .使蒸餾水維持在 34cm高度； 4. 加樣：待蒸餾水流至柱平面時(shí)（不可使柱平面干掉），馬上靠近柱平面小心滴加4滴樣品（注意盡量不要使床面攪動），待樣品浸入到凝膠中后馬上加入 3－ 4滴蒸餾水 (動作輕柔 )，反復(fù)兩次，然后加大量蒸餾水洗脫； 5. 收集樣品：樣品一旦加入后馬上用量筒收集流出液，注意向柱床上不斷加水，記錄紅色流出一半時(shí)的毫升數(shù)（血紅蛋白的 Ve，也即 Vo），繼續(xù)收集，記錄黃色流出一半時(shí)體積（魚精蛋白 Ve）； 實(shí)驗(yàn)操作 第三部分， DNA親和層析分離目標(biāo)轉(zhuǎn)錄因子蛋白 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 1. 查閱相關(guān)資料，了解 DNA親和層析技術(shù)的原理和種類； 2. 查詢某種轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)序列； 3. 請?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用 DNA親和層析技術(shù)分離某種轉(zhuǎn)錄因子； 4. 對于分離得到的轉(zhuǎn)錄因子，有什么方法驗(yàn)證。交聯(lián)度越大，網(wǎng)孔越小，吸水膨脹就越小。 操作注意事項(xiàng)： ? 嚴(yán)格控制點(diǎn)樣位置以及點(diǎn)樣直徑。易溶于展層劑的所受的動力作用大，展層速度快，反之，速度慢。 ? 內(nèi)水體積是指凝膠顆粒中孔穴的體積，凝膠層析中固定相體積就是指內(nèi)水體積。電荷基團(tuán)與高分子聚合物共價(jià)結(jié)合，形成一個(gè)帶電的可進(jìn)行離子交換的基團(tuán)。 ? 親和層析可用于純化生物大分子、稀釋液的濃縮、不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏、從純化的分子中出去殘余的污染物、用免疫吸附劑吸附純化對此尚無互補(bǔ)配體的生物大分子，分離核酸是親和層析應(yīng)用的重要方面。 ? 分配系數(shù)主要與下列因素有關(guān)： ① 被分離物質(zhì)本身的性質(zhì)； ② 固定相和流動相的性質(zhì)； ③ 層析柱的溫度。 薄層層析 將適當(dāng)粘度的固定相均勻涂鋪在薄板上，點(diǎn)樣后用
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