轉(zhuǎn)錄因子dna結(jié)合位點預(yù)測分析dns-氨基酸的雙向聚酰胺薄-預(yù)覽頁
【正文】 ? 流動相有兩種狀態(tài)：液體作為流動相 氣體作為流動相 ? 固定相也有兩種狀態(tài)：固體吸附劑作為固定相 以吸附在固體上的液體作為固定相 按兩相所處的狀態(tài)分為： ? 液相層析和氣相層析 流動相 固定相 液體 （液相層析 ) 氣體 （固相層析） 液 體 液 液層析 氣 液層析 固 體 液 固層析 氣 固層析 層析法分類 名稱 操作形式 適用范圍 柱層析 將固定相裝于柱內(nèi)，使樣品沿一個方向移動而達到分離的目的。 按操作形式不同分類： 吸附層析 ? 原理：任何兩個相都可以形成表面，其中一個相的物質(zhì)或溶解在其中的溶質(zhì)在此表面密集現(xiàn)象稱為吸附，利用吸附劑對不同物質(zhì)具有不同吸附力使混合物得到分的現(xiàn)象就叫吸附層析。紙層析是最廣泛的一種分配層析。 相關(guān)的概念（一）： 分配系數(shù)：當(dāng)一種溶質(zhì)分布在兩個互不相溶的溶劑中時，它在固定相和流動相兩相內(nèi)的濃度之比是個常數(shù)，稱為分配系數(shù) (Kd)。 Rf = 色斑中心至原點中心的距離 溶劑前緣至原點中心的距離 親和層析法 ? 親和層析（ Affinity Chromatography）是利用生物分子間專一性親和力而進行分離的一種層析技術(shù)。 ? 親和層析純化過程簡單、迅速，且分離效率高。 ? 離子交換層析的固定相是離子交換劑，它是由一類不溶于水的惰性高分子聚合物基質(zhì)通過一定的化學(xué)反應(yīng)共價結(jié)合上某種電荷基團形成的。平衡離子是結(jié)合于電荷基團上的相反離子，它能與溶液中其它的離子基團發(fā)生可逆的交換反應(yīng)。 凝膠層析的原理 1. 分子大小不同混合物上柱； 2. 洗脫開始 ， 小分子擴散進人凝膠顆粒內(nèi) ， 大分子被排阻于顆粒之外； 3. 大小分子分開： 4. 大分子行程較短 ， 已洗脫出層析柱 ， 小分子尚在進行中 。 ? 基質(zhì)體積是指凝膠顆粒實際骨架體積。 樣品的量 洗脫體積 原理 ? 聚酰胺薄膜層析是一類特殊的分配層析。 DNS氨基酸 的雙向聚酰胺薄膜層析 本實驗中，聚酰胺上的氨基與氨基酸（ AA）的羰基形成氫鍵，酰胺基團上羰基與 AA中羥基或酚基形成氫鍵。 第一向：苯－冰醋酸溶劑 第二向：甲酸－水 顯色：二甲氨基萘磺酰氯（ DNSCl）可與氨基酸的游離氨基結(jié)合成 DNS氨基酸。 ? 展層時勿將點樣點浸入展層劑中。從顏色不同可直接觀察到血紅蛋白洗脫較快，魚精蛋白洗脫較慢。交聯(lián)度越小，網(wǎng)孔越大，吸水膨脹就越大。 X數(shù)字也代表凝膠的持水量，如 G25表示 1g干膠持水 ， G100表示 1g干膠持水 10ml，依次類推。
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