轉錄因子dna結合位點預測分析dns-氨基酸的雙向聚酰胺薄(完整版)
【正文】 析柱時，根據它們分子大小不同而進行分離的技術。缺點是針對某一分離對象，制備專一的配基和尋求層析的穩(wěn)定條件限制了其使用。常用 Rf來表示。 ? 吸附劑與被吸附劑之間的作用除了物理作用外，還有化學作用，如 DNS氨基酸雙向聚酰胺薄膜層析時中被分離的物質之所以能吸附在聚酰胺薄膜上就是由于二者之間形成氫鍵。 ? 凝膠層析（分子篩）利用凝膠顆粒形成具有三維空間多孔性網絡結構的物質，不帶電荷，可起濾過或 “ 篩 ” 的作用。 ? 流動相：在層析過程中，推動固定相上待分離的物質朝著一個方向移動的液體、氣體或超臨界體等，都稱為流動相。 第二部分， DNS氨基酸 的雙向聚酰胺薄膜層析 凝膠層析分離血紅蛋白 與魚精蛋白 背 景 ? 層析法也稱色譜法，是 1906年俄國植物學家 Michael Tswett發(fā)現并命名的。他將植物葉子的色素通過裝填有吸附劑的柱子，各種色素以不同的速率流動后形成不同的色帶而被分開，由此得名為“色譜法”（ Chromatography) 。在柱層析中一般稱為洗脫劑，薄層層析時稱為展層劑。 ? 親和層析是利用生物分子間所具有的專一性親和力的層析技術。 分配層析技術 （液 液層析法） ? 原理：利用混合物在兩種不相混溶的液相（固定相和流動相）之間的分配系數的不同而達到分離各組分的目的。 ? 物質在一定溶劑中的分配系數是一定的， Rf值也是恒定的，因此可以根據 Rf值來鑒定被分離的物質。 親和層析示意圖 離子交換層析 ? 離子交換層析是依據各種離子或離子化合物與離子交換劑的結合力不同而進行分離純化。 ? 原理：凝膠顆粒內部具有多孔性網狀結構，被分離的混合物流過層析柱時，比凝膠孔徑大的分子不能進入凝膠孔內，在凝膠顆粒之間的空隙向下移動，并最先被洗脫出來；比網孔小的分子能不同程度的自由出入凝膠孔內外，在柱內經過的路程較長移動速度較慢，最后被洗脫出來。我們設柱床體積為 Vt，外水體積為 Vo，內水體積為 Vi，基質體積為 Vg，則有： Vt＝ Vo＋ Vi＋ Vg 由于 Vg相對很小，可以忽略不計，則有： Vt＝ Vo＋ Vi 凝膠層析柱各種體積示意圖（陰影部分） 外水體積（ V0） 內水體積（ Vi） 基質體積（ Vg） 柱床體積 （ Vt） ? 當分子的 Kd＝ 0時， Ve＝ Vo即該分子被完全排阻于凝膠顆粒之外，全部分布于流動相里，固定相里分布為零（ A)； ? 當分子的 Kd＝ 1時， Ve＝ Vo+Vi即該分子完全不被排阻，均勻的分布在流動相和固定相里，兩相比值為 1(C)； ? 當 0 Kd 1時， Ve = Vo + Kd*Vi即表明分子受到部分排阻 (B)。這種層析方法稱為雙向層析。 Ⅰ Ⅱ 頡 亮 苯 丙 賴 甘 絲 天 脯 谷 DNS氨基酸的雙向層析預期實驗結果 實驗原理 由于 Hb（紅色，分子量 64500） 與二硝苯 魚精蛋
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