轉(zhuǎn)錄因子dna結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)分析dns-氨基酸的雙向聚酰胺薄(完整版)
【正文】 析柱時(shí)，根據(jù)它們分子大小不同而進(jìn)行分離的技術(shù)。缺點(diǎn)是針對(duì)某一分離對(duì)象，制備專一的配基和尋求層析的穩(wěn)定條件限制了其使用。常用 Rf來(lái)表示。 ? 吸附劑與被吸附劑之間的作用除了物理作用外，還有化學(xué)作用，如 DNS氨基酸雙向聚酰胺薄膜層析時(shí)中被分離的物質(zhì)之所以能吸附在聚酰胺薄膜上就是由于二者之間形成氫鍵。 ? 凝膠層析（分子篩）利用凝膠顆粒形成具有三維空間多孔性網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，不帶電荷，可起濾過(guò)或 “ 篩 ” 的作用。 ? 流動(dòng)相：在層析過(guò)程中，推動(dòng)固定相上待分離的物質(zhì)朝著一個(gè)方向移動(dòng)的液體、氣體或超臨界體等，都稱為流動(dòng)相。 第二部分， DNS氨基酸 的雙向聚酰胺薄膜層析 凝膠層析分離血紅蛋白 與魚精蛋白 背 景 ? 層析法也稱色譜法，是 1906年俄國(guó)植物學(xué)家 Michael Tswett發(fā)現(xiàn)并命名的。他將植物葉子的色素通過(guò)裝填有吸附劑的柱子，各種色素以不同的速率流動(dòng)后形成不同的色帶而被分開，由此得名為“色譜法”（ Chromatography) 。在柱層析中一般稱為洗脫劑，薄層層析時(shí)稱為展層劑。 ? 親和層析是利用生物分子間所具有的專一性親和力的層析技術(shù)。 分配層析技術(shù) （液 液層析法） ? 原理：利用混合物在兩種不相混溶的液相（固定相和流動(dòng)相）之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離各組分的目的。 ? 物質(zhì)在一定溶劑中的分配系數(shù)是一定的， Rf值也是恒定的，因此可以根據(jù) Rf值來(lái)鑒定被分離的物質(zhì)。 親和層析示意圖 離子交換層析 ? 離子交換層析是依據(jù)各種離子或離子化合物與離子交換劑的結(jié)合力不同而進(jìn)行分離純化。 ? 原理：凝膠顆粒內(nèi)部具有多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，被分離的混合物流過(guò)層析柱時(shí)，比凝膠孔徑大的分子不能進(jìn)入凝膠孔內(nèi)，在凝膠顆粒之間的空隙向下移動(dòng)，并最先被洗脫出來(lái)；比網(wǎng)孔小的分子能不同程度的自由出入凝膠孔內(nèi)外，在柱內(nèi)經(jīng)過(guò)的路程較長(zhǎng)移動(dòng)速度較慢，最后被洗脫出來(lái)。我們?cè)O(shè)柱床體積為 Vt，外水體積為 Vo，內(nèi)水體積為 Vi，基質(zhì)體積為 Vg，則有： Vt＝ Vo＋ Vi＋ Vg 由于 Vg相對(duì)很小，可以忽略不計(jì)，則有： Vt＝ Vo＋ Vi 凝膠層析柱各種體積示意圖（陰影部分） 外水體積（ V0） 內(nèi)水體積（ Vi） 基質(zhì)體積（ Vg） 柱床體積 （ Vt） ? 當(dāng)分子的 Kd＝ 0時(shí)， Ve＝ Vo即該分子被完全排阻于凝膠顆粒之外，全部分布于流動(dòng)相里，固定相里分布為零（ A)； ? 當(dāng)分子的 Kd＝ 1時(shí)， Ve＝ Vo+Vi即該分子完全不被排阻，均勻的分布在流動(dòng)相和固定相里，兩相比值為 1(C)； ? 當(dāng) 0 Kd 1時(shí)， Ve = Vo + Kd*Vi即表明分子受到部分排阻 (B)。這種層析方法稱為雙向?qū)游觥? Ⅰ Ⅱ 頡 亮 苯 丙 賴 甘 絲 天 脯 谷 DNS氨基酸的雙向?qū)游鲱A(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)原理 由于 Hb（紅色，分子量 64500） 與二硝苯 魚精蛋
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