【正文】 據(jù)分析對象、樣品濃度、沸點范圍以及樣品對熱的穩(wěn)定性方面綜合考慮。 ? 柱頭進(jìn)樣法： 用于對熱不穩(wěn)定樣品，如生化樣品的分析等。 2022/2/17 67 六、 程序升速毛細(xì)管氣相色譜法 ? 程序升速（ carrier gas flow programming）是一種逐漸增加柱中載氣流速的方法，可以減少分析時間，提高較易保留成分的檢測靈敏度。 2022/2/17 68 ? ② 與程序升溫相比較 ， 程序升速的基線穩(wěn)定性較好 ， 柱壽命也較長 。 ? ③ 可以在較低柱溫下 ， 分析熱不穩(wěn)定化合物 ， 這對分離是有利有 。 2022/2/17 69 ? ⑤ 不需要特殊的設(shè)備 ， 只需調(diào)整柱入口壓力 。 ? 載氣流速程序能分步變化或連接變化，低載氣流速是用于高揮發(fā)性成分，接著增加流速用于流出較強保留的成分。假如柱入口壓力隨時間變化，而且以指數(shù)形式增加，溶質(zhì)保留時間則隨之減少，同時減少的情形是類似于程序線性升溫所得的情況 。 ? 程序升速需要使用一入口高壓控制閥，以及一個相匹配的檢測器。 ? 短柱程序升速的優(yōu)點是容易得到寬程度升速范圍，不需要太高的入口柱壓，同時在運行一個周期后，流速能很快恢復(fù)，這樣運行周期之間的間隔很短。 ? ② 采用程序升溫 ， 可以利用溶劑效應(yīng) 、 冷阱或溶質(zhì)集中技術(shù) ， 從而可減少由于大體積 ， 慢進(jìn)樣而引起的譜帶展寬 。 ? ④可提高樣品的檢測靈敏度。 ? TR為程序升溫的基本參數(shù)，它的重要性可與恒溫色譜中的保留體積或保留時間相比，對每一個組分在一定的固定液體系中， TR是定性數(shù)據(jù)。 2022/2/17 76 （ 2） 非線性升溫 ? ① 線性 － 恒溫加熱 ? 首先線性升溫到固定液最高使用溫度 ，然后恒溫到最后幾個高沸點組分沖洗出來 ， 適于高沸點樣品分離 。 2022/2/17 77 ? ③ 恒溫 線性 恒溫加熱 ? 開始恒溫分離低沸點組分 ， 中間經(jīng)線性升溫 ， 再恒溫把高沸點組分沖洗出來 。 ? ④ 多種速度升溫 ? 開始以 r1速度升溫 ， 然后用以 rr3等速度升溫 。 ? 2022/2/17 80 ? 保留溫度與正構(gòu)烷烴的沸點 Tb成線性關(guān)系： bTaT bR ????2022/2/17 81 （ 三）初期凍結(jié) ? 在程序升溫中，當(dāng)一多組分寬沸程混合物進(jìn)樣后，由于起始溫度很低，因此對少數(shù)低沸點組分為最佳柱溫，得到良好的分離，而對高沸點組分，這個起始溫度是太低了， 因其 k值很大，蒸氣壓很低，大都溶解在固定液里，所以這些組分的蒸氣帶的移動速度非常慢，幾乎停在柱入口不動。 2022/2/17 82 ? 隨著柱溫的升高 ， 某些組分的蒸氣帶便開始以可觀的速度移動 ， 柱溫越接近保留溫度即接近柱出口處 ， 色譜帶速度增加得越快 。 大約在 （ TR30） ℃ 時 ，色譜帶恰好位于柱長的中央 。某一組分的保留溫度為 TR， ? 由上述分析知道，柱溫每升高 30℃ ，色譜帶的移行速度就提高一倍。 2022/2/17 84 ? 而在 TR與 TR－ 30這個區(qū)間。 45rLu ?L21r30u43 ??2022/2/17 86 ? 在 TR－ 30℃ 時組分恰好在柱子的中央，即 1/2L處， ? TR－ 60℃ 時位于柱子的 1/4L處， ? TR－ 90℃ 位于柱子的 1/8L處 …… 2022/2/17 87 （四）有效柱溫 ? 柱溫為 TR30℃ 時，組分在柱長的1/2處，在這個區(qū)間，可以認(rèn)為色譜帶以TR15℃ 處的平均速度移過色譜柱長的后半段，即 1/2L。依此類推， 以 TR75℃ 處的平均速度移動了柱長的 1/8L，以 TR150℃ 處的平均速度移動了柱長的1/16L… .. 2022/2/17 88 各平均速度處的柱溫乘以移動柱長的分?jǐn)?shù)之和，稱為有效溫度，以 T′ 表示。因此，它是對應(yīng)一定理論塔板數(shù)和分離特征的溫度。 2022/2/17 90 （ 五）柱效率的評價 ? （ n） 2tT2VTWt16WV16n RR ??????????????????vtWW 、 分別為用體積和用時間表示的在保留溫度下流出的色譜峰峰寬RRTTVt ???、 在相同的色譜條件下，以保留溫度為柱溫恒溫色譜中測得的同一組分的保留體積和保留時間2022/2/17 91 ? 用 tTR代替 tR的原因： ? ? 是程序升溫色譜中有初期凍結(jié)存在 ， 此時大部分組分停留在柱入口不動 ， 這段時間對色譜峰的擴張或柱效影響很小 ， 只有當(dāng)柱溫接近 TR時 ， 色譜帶快速通過柱子的大部分 ， 這時各種因素才對色譜帶擴散有明顯影響 ，只有這后一段保留時間對柱效計算才有意義 。 2022/2/17 92 1212VVRRWW)VV(2R???2121221RRVVVVWW????????????組分 的保留體積組分1的保 留體積組分 的峰寬組分的峰寬2022/2/17 93 因程序升溫中峰寬大致相等，故取其平均峰寬 W。 ? Ri與柱子的選擇性有關(guān) ， Ri值大致可以看出固定液選擇的好壞； 4nR4nVVVWVVRiTRRRRR1212 ??????4n從 數(shù)值，評價操作條件選擇是否合適。RrTt T V F T rV?? ? ? ?在程序升溫中，若升溫速率為 ，當(dāng)柱溫微小變化 時，其所用的時間 ，則 表示在溫度微小變化所需時間內(nèi)，載氣通過了保留體積的多少分之一。 2022/2/17 97 討論： ? ① 保留溫度主要由 r/F決定，而與初始溫度無關(guān)。即 r/F決定 TR。 因為大部分組分處于初期 “ 凍結(jié) ” 狀態(tài) ，而初溫的變化對 TR影響很小 ， 當(dāng)初溫足夠低或 TRT0100℃ ， T0對 TR的影響就可以忽略 ， 故 TR主要由 r/F決定 。 ? r/F與真正分離度 Ri關(guān)系是： ? 初始溫度越低 ， r/F值越小 ， 則 Ri越大 ， ? 隨著 r/F值的增大 ， Ri開始變小 ， ? 對于中等 r/F值 ， Ri有最大值 。 ? 一般來說 ， 在程序升溫中起始溫度的選擇根據(jù)以下幾點： ? ① 起始溫度通常選擇低于樣品中大多數(shù)低沸點組分的沸點 ， 如果初溫選得太低 ，則分析時間加長 ， 如初溫太高 ， 則低沸點組分分離不好 。 ? ③ 采用溶劑效應(yīng)時 ， 起始溫度應(yīng)低于溶劑沸點 20℃ ， 使樣品在柱入口處再濃縮 ， 采用冷阱起始柱溫能低－ 50℃ 。 ? ② 樣品中高沸點組分的沸點 。 ? 在較低的加熱速度下，分離度增大，但高沸點組分分離時間太長，且色譜峰變寬； ? 在加高的加熱速度下，雖然可以縮短分析時間，但柱效和分離度都降低。 ? 毛細(xì)管柱： ? 加熱速度為： ～ 2℃/min 。 ? 一般選在等于和高于恒溫色譜中的最佳線速或最佳流速。但在升溫過程中，流速要恒定