【正文】 球形 YQG 3~4μm 8 108 堆積硅珠 YQG 3~4 μm 8 108 理想 原理：吸附 特點：峰易拖尾 適用：分離極性化合物 3． 流動相：底劑 （ 烷烴 ） + 有機極性調(diào)節(jié)劑 ? 例： 正己烷或庚烷 + 氯仿 4． 影響 k的因素：與固定相性質(zhì)和流動相性質(zhì)有關(guān) 溶質(zhì)分子極性 ↑ ， 洗脫能力 ↓ ， k↑ ， tR↑ 溶劑系統(tǒng)極性 ↑ ， 洗脫能力 ↑ ， k↓ ， tR↓ ? 注：調(diào)節(jié)溶劑極性 ， 可以控制組分的保留時間 5． 出柱順序：強極性組分后出柱 ， 弱極性組分先出柱 6． 硅膠吸水量 ↑ ， LSC→ LLC ? 硅膠含水量較小 吸附色譜 硅膠極性較大 ? 硅膠含水量 17% 分配色譜 硅膠失活 → 載體 吸附的水 → 固定液 1． 分離機制：利用組分在兩相中溶解度的差異 2． 固定相：載體 +固定液 （ 物理或機械涂漬法 ） ? 缺點：系統(tǒng)內(nèi)部壓力大 ， 易流失 ， 不實用 固定液 —— 極性 → NLLC 固定液 —— 非極性 → RLLC 3． 正相色譜 ——固定液極性 流動相極性 （ NLLC） ? 極性小的組分先出柱 ， 極性大的組分后出柱 ? 適于分離極性組分 反相色譜 ——固定液極性 流動相極性 （ RLLC） ? 極性大的組分先出柱 ， 極性小的組分后出柱 ? 適于分離非極性組分 二、液液分配色譜法（ LLC） （一）常規(guī)化學鍵合相 利用化學反應(yīng)將固定液的官能團鍵合在載體表面 1． 分離機制：分配 + 吸附 （ 以 LLC為基礎(chǔ) ） 2． 特點： 不易流失 熱穩(wěn)定性好 化學性能好 載樣量大 適于梯度洗脫 化學鍵合固定相 （二）反相鍵合相固定相 1． 分離機制：疏溶劑理論 正相 —— 流動相與溶質(zhì)排斥力強 ， 作用時間 ↑ ， k↑ ， 組分 tR↑ 反相 —— 流動相與溶質(zhì)排斥力弱 ， 作用時間 ↓ ， k↓ ， 組分 tR↓ 2． 固定相： 極性小的烷基鍵合相 C8柱 ， C18柱 （ ODS柱 —— HPLC約 80%問題 ） 3． 流動相： 極性大的甲醇 水或乙腈 水 流動相極性 固定相極性 底劑 + 有機調(diào)節(jié)劑 （ 極性調(diào)節(jié)劑 ） ? 例：水 + 甲醇 ， 乙腈 ， THF 4． 流動相極性與 k的關(guān)系： 流動相極性 ↑ ， 洗脫能力 ↓ ， k↑ ， 組分 tR↑ 5． 出柱順序：極性大的組分先出柱 極性小的組分后出柱 6． 適用：非極性 ~中等極性組分 （ HPLC80%問題 ） （三）正相鍵合相色譜 1． 分離機制：溶質(zhì)分子與固定相之間定向作用力 、 誘導力 、 或氫鍵作用力 2． 固定相：極性大的氰基或氨基鍵合相 3． 流動相：極性小 （ 同 LSC） 底劑 + 有機極性調(diào)節(jié)劑 ? 例：正己烷 + 氯仿 甲醇 ， 氯仿 乙醇 4． 流動相極性與 k的關(guān)系： 流動相極性 ↑ ， 洗脫能力 ↑ ， 組分 tR↓ ， k↓ 5． 出柱順序：結(jié)構(gòu)相近組分 ， 極性小的組分先 出柱極性大的組分后出柱 6． 適用： ? 氰基鍵合相與硅膠的柱選擇性相似 （ 極性稍小 ） 分離物質(zhì)也相似 ? 氨基鍵合相與硅膠性質(zhì)差別大 ， 堿性 分析極性大物質(zhì) 、 糖類等 1．反相離子對色譜法（ IPC或 PIC） 反相色譜中 ， 在極性流動相中加入離子對試劑 ， 使被測組分 與其中的反離子形成中性離子對 ， 增加 k和 tR， 以改善分離 1） 離子對試劑：烷基磺酸鈉 → 分析堿 四丁基季胺鹽 → 分析酸 2） 影響 k的因素 a． 與 m的極性有關(guān) （ 同反相色譜 ） b． 與 R的鏈長有關(guān)： R↑ 長 ， 極性 ↓ 小 ， tR↑ ， k↑ 3） 適用：較強的有機酸 、 堿 ? 三、離子色譜法（ IC） 2．反相離子抑制色譜 在反相色譜中 ， 通過加入緩沖溶液調(diào)節(jié)流動相 pH值 ， 抑制 組分解離 ， 增加其 k和 tR， 以達到改善分離的目的 1） 離子抑制劑：弱酸 、 弱堿性物質(zhì) pH一定的緩沖溶液 2） k的影響因素： 與流動相極性有關(guān) ， 還與 pH值有關(guān) ? 選擇流動相：應(yīng)同時考慮極性及 pH值 酸性物質(zhì) —— 加入酸 HAc tR↑ ， k↑ 堿性物質(zhì) —— 加入堿 NH3 24 高效液相色譜儀 1． 泵： 恒壓泵：流量精度不穩(wěn) 恒流泵：常用 2． 進樣裝置 1） 隔膜進樣 （ 高分子有機硅膠墊 → 進樣室 ） GC系統(tǒng)壓力較小 ， 可以 HPLC系統(tǒng)壓力太大 ， 必須停泵進樣 （ 早期 ） 2） 閥進樣：不必停泵 ， 六通閥 液相色譜 3． 色譜柱：直徑 4~6mm,柱長 10~30cm 柱效評價：色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測器 1） 紫外檢測器：適于吸收紫外光的物質(zhì) 2） 熒光檢測器：只能分析自身發(fā)光的物質(zhì) 靈敏度高 3） 示差折光檢測器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴格 4） 電化學檢測器 5） 化學發(fā)光 ?第六章 電解與庫侖分析法 ? 167。 m = = MQ 96487n M n i t 96487 ? Q = i t Q = ∫ i dt 0 t 法拉第電解定律有兩層含義： ● 電極上發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)的量與通過體系的 電量成正比 ● 通過相同量的電量時，電極上沉積的各物 質(zhì)的質(zhì)量與其 M/n成正比。 62 控制電位電解法 不同金屬離子具有不同的分解電壓，在電解分析中，金屈離子大部分在陰極析出，要達到分離目的，就需要控制陰極電位。 庫侖分析要求： ●工作電極上只發(fā)生單純的電極反應(yīng) ● current efficiency requires 100% 實際分析中，工作電極（通常為陰極）的電位是隨著電解過程的進行而不斷變化的，而且陽極電位及電解電流也是可變的。通常通過下列裝置來控制陰極電位。 63 控制電位庫侖法 Coulometer Potentiometer Coulometer (庫侖計） ■ Silver Coulometer (weight Coulometer) Netty Pt cathode Pt wire anode AgNO3 solution On cathode: Ag+ + e → Ag On anode: 2H2O 4e→O 2 + 4H+ ● 庫侖滴定（ Titration Coulometer） 167。 66 庫侖滴定方法的優(yōu)點 16